1. 沉淀蛋白质的方法有哪些?各有何特点?
沉淀蛋白质的主要方法有:盐析、有机溶剂、某些酸类、重金属盐、加热凝固。
上述方法的特点:中性盐破坏蛋白质的水化膜和电荷,采用不同浓度盐可将不同蛋白质分段析出,盐析得到的蛋白质具有生物学活性。有机溶剂可破坏蛋白质的水化膜使其沉淀,常温下操作,蛋白质无活性,低温下操作,则有活性。某些酸类如钨酸、三氯醋酸等的酸根与带正电荷的蛋白质结合而沉淀,前提是溶液的 pH 值小于 PI。该法得到的蛋白质无活性。与酸类相反,重金属离子 pb 2＋ 等可与带负电荷的蛋白质结合而沉淀,故要求溶液 pH 大于 PI。该法得到的蛋白质也无活性。在等电点时加热蛋白质可形成凝块沉淀。该法得到的是变性蛋白质。
2. 简述 RNA 的种类及其生物学作用。
⑴RNA 有三种：mRNA tRNA 和 rRNA
⑵生物学作用：rRNA 与蛋白质结合构成核糖体，核糖体是蛋白质合成的场所。tRNA 携带运输活化了的氨基酸，参与蛋白质的生物合成。mRNA 是 DNA 的转录产物，含有 DNA 的遗传信息，每三个相邻碱基决定一个氨基酸，是
蛋白质生物合成的模板。
3. 简述真核生物 mRNA 的结构特点。
成熟的真核生物 mRNA的结构特点是：⑴ 大多数的真核 mRNA在 5'端以 7甲基鸟嘌呤及三磷酸鸟苷为分子的起始结构。这种结构称为帽子结构。帽子结构在 mRNA 作为模板翻译成蛋白质的过程中具有促进核糖体与 mRNA 的结合，加速翻译起始速度的作用，同时可以增强 mRNA的稳定性。⑵ 在真核 mRNA的 3'末端，大 多数有一段长短不一的多聚腺苷酸结构，通常称为多聚 A 尾。一般由数十个至一百几十个腺苷酸连接而成。因为在基因内没有找到它相应的结构，因此认为它是在 RNA 生成后才加进去的。随着 mRNA 存在的时间延续，这段聚 A 尾巴慢慢变短。因此，目前认为这种 3'末端结构可能与 mRNA 从核内向胞质的转位及mRNA 的稳定性有关。
4. 用竞争性作用的原理解释磺胺药抑菌作用机制。
竞争性抑制作用的强弱取决于抑制剂的浓度和底物浓度的相对比例。在抑制剂浓度不变的情况下，增加底物浓度能减弱抑制剂的抑制作用；在底物浓度不变的情况下，抑制剂只有达到一定浓度才能起抑制作用。
利用竞争性抑制作用原理可阐明一些药物的作用机制。例如磺胺类药物抑制某些细菌的生长，是因为这些细菌的生长需要利用对氨基苯甲酸合成二氢叶酸，而磺胺类药物的结构与对氨基苯甲酸极其相似，可竞争性的抑制细菌体内的二氢叶酸合成酶，从而防碍了二氢叶酸的合成，由于这些细菌只能利用二氢叶酸合成四氢叶酸，而不能直接利用叶酸，所以对氨基苯磺胺可造成四氢叶酸的缺乏而影响核酸的合成，从而影响细菌的生长繁殖。根据竞争性抑制
的特点，在使用磺胺类药物时，必需保持血液中药物的浓度远高于对氨基苯甲酸的浓度，才能发挥有效地抑菌作用。
5.1 分子 α—酮戊二酸彻底氧化分解成二氧化碳和水，产生多少分子 ATP？
α—酮戊二酸→ 三羧酸循环→草酰乙酸→ 磷酸烯醇式丙酮酸 → 丙酮酸→ 乙酰辅酶 A →三羧酸循环。（写出详细步骤）
6.简述磷酸戊糖途径的生理意义。
①提供 5磷酸核糖，是合成核苷酸的原料。②提供NADPH，参与合成代谢（作为供氢体）、
生物转化反应及维护谷胱甘肽的还原性。
7.用超速离心法将血浆脂蛋白分为哪几类？简述各类脂蛋白的来源和主要功用。
用超速离心法将血浆脂蛋白分为四类，分别是 CM（乳糜微粒），VLDL（极低密度脂蛋白），.LDL（低密度脂蛋白），HDL（高密度脂蛋白）。来源和功能分别是CM（乳糜微粒）由小肠黏膜上皮细胞合成，运输外源性甘油三酯；VLDL（极低密度脂蛋白）由肝细胞合成，运输内源性甘油三酯；LDL（低密度脂蛋白）由 VLDL 在血浆中生成，向肝外组织运输胆固醇；HDL（高密度脂蛋白）由肝细胞制造，向肝外组织运送磷脂、逆向向肝内运送胆固醇。
8.何谓酮体？酮体是如何生成及氧化利用的？
酮体包括乙酰乙酸、β羟丁酸和丙酮。酮体是在肝细胞内由乙酰 CoA 经 HMGCoA转化而来，但肝脏不利用酮体。在肝外组织酮体经乙酰乙酸硫激酶或琥珀酰 CoA转硫酶催化后，转 变成乙酰 CoA并进入三羧酸循环而被氧化利用。
9.简述体内乙酰 CoA 的来源和去路。
乙酰 CoA 的来源有糖的氧化分解，脂肪酸的氧化分解，酮体的分解，氨基酸的氧化分解；去路有氧化供能，合成脂肪酸，合成胆固醇，转化成酮体，参与乙酰化反应。
10.写出软脂酸彻底氧化分解的主要过程及 ATP 的生成。
软脂酸→软脂酰 CoA（2ATP）→7 次 β氧化生成 8 分子乙酰 CoA＋7（FADH2＋NADH＋
H ＋ ）8 分子乙酰 CoA→经三羧酸循环生成 CO2＋H2O＋96ATP7（FADH2＋NADH＋H ＋ ）→经氧化磷酸化生成 H2O＋35ATP故一分子软脂酸彻底氧化生成 CO2 和 H2O，净生成 96＋352=129ATP。
11.试述呼吸链的组成成分、存在形式及排列顺序。
呼吸链的组成部分包括 NADH、黄素蛋白、CoQ、铁硫蛋白和细胞色素体系。大部分成员以
复合体的形式镶嵌在线粒体内膜上，CoQ 和 Cyt c 游离存在于线粒体内膜。
12.血液氨基酸的来源与去路。
来源：食物蛋白的消化吸收；组织蛋白质的分解；体内合成。
去路：合成组织蛋白质；氧化分解；合成其他含氮化合物。
13.举例说明联合脱氨基作
14.试述丙氨酸彻底氧化（碳链部分）的过程，并计算生成多少分子的 ATP。
答题思路
⑴ 丙氨酸→丙酮酸＋NH3
⑵ 丙酮酸→乙酰辅酶 A(要求写出酶及辅酶)
⑶ 乙酰辅酶 A 进入三羧酸循环彻底氧化成 CO2 和水 （要求写出详细的反应步骤关键酶和脱氢酶的辅酶 ）
⑷ 计算 ATP （ 写出生成的各种还原型辅酶的数量然后计算 ATP 数量 ）
15.试比较酶的变构调节与化学修饰调节的异同。
相同点：均为细胞水平的调节，属快速调节，受调节的酶为代谢途径的关键酶或限速酶。
不同点：变构调节：变构剂与酶非催化部位通过非共价键可逆结合，使酶构象发生改变，活
性改变。无放大效应。
化学修饰调节：需酶催化，通过共价键连上或去掉一些基团，使酶结构改变，活性
改变，消耗少量 ATP，有放大效应。
16.简述参与 DNA 复制的酶与蛋白质因子，以及它们在复制中的作用。
酶或蛋白质因子 作用
DNA 聚合酶Ⅲ 合成 DNA 新链中的3＇5＇磷酸二酯键
DNA 聚合酶Ⅰ 校读、切除引物、填补空缺
拓扑异构酶 松弛 DNA 超螺旋结构成双螺旋
解螺旋酶 解开 DNA 双螺旋结构成两条单链
单链 DNA 结合蛋白 维持单链DNA 处于稳定状态
引物酶 合成 DNA 复制所需的RNA 引物
DNA 连接酶 将随从链中各冈崎片段连接起来
17..试比较复制、转录、翻译过程的异同点。
18.试述三种 RNA 在蛋白质生物合成过程中的作用。
mRNA：蛋白质合成的直接模板. tRNA：转运氨基酸到正确的位置
rRNA：与其它蛋白质结合组成核蛋白体，是合成蛋白质的场所
19.试述乳糖操纵子的结构及调控原理。
回答问题要点：
(1)乳糖操纵子的结构含 z、y 及 a3 个结构基因，分别编码 β—半乳糖苷酶、透酶和乙酰基转移酶，此 外还有一个操纵序列 O、一 个启动序列 P及一个调节基因 i。i 基因编码一种阻遏蛋白，后者与 O 序列结合，操纵子受阻遏而处于关闭状态。在启动序列 P 上游还有一个分解代谢基因激活蛋白(CAP)结合位点。由 P 序列、O 序列和 CAP 结合位点共同构成乳糖操纵子的调控区。
(2)阻遏蛋白的负性调节 在没有乳糖存在时，乳糖操纵子处于阻遏状态。此时，i 基因在 Pi启动基因操作下表达一种阻遏蛋白，此阻遏蛋白与 O 序列结合，阻碍 RNA 聚合酶与 P 序列结合，抑制转录起动。当有乳糖存在肘，乳糖转变为半乳糖，后者结合阻遏蛋白，使构象变化，阻遏蛋白与 O 序列解离。在 CAP 蛋白协作下发生转录。
(3)CAP 的正性调节：分解代谢基因激活蛋白 CAP 分子内有 DNA 结合区及 cAMP 结合位点。当没有葡萄糖及 cAMP 浓度较高时，cAMP 与 CAP 结合，这时 CAP 结合在乳糖启动序列附近的 CAP 位点，可刺激 RNA 转录活性提高；当有葡萄糖存在时，cAMP 浓度降低，cAMP与 CAP 结合受阻，因此乳糖操纵子表达下降。
20.简述肾上腺素使血糖升高的机制。（胰高血糖素？）
肾上腺素→ β 受体
肾上腺素β→受体
G 蛋白（无活性） 活性 G 蛋白
腺苷酸环化酶（AC） 活性 AC
（无活性）
ATP cTMP
无活性 PKA 活性 PKA
无活性磷酸化 b 酶 活性磷酸化酶 b 激酶
磷酸化酶 b 磷酸化酶 a
糖原 G1P G
21.结合胆红素与游离胆红素有何区别？
游离胆红素 结合胆红素
别名 间接胆红素 直接胆红素
血胆红素 肝胆红素
与葡萄糖醛酸结合 未结合 结合
与重氮试剂反应 慢或间接反应 迅速直接反应
水中溶解度 小 大
经肾随尿排出 不能 能
通过细胞膜对脑的毒性作用 大 无
22.试比较三种黄疸时血、尿、便的改变。
溶血性黄疸 肝细胞性黄疸 阻塞性黄疸
血清胆红素
游离胆红素 ↑↑ ↑
结合胆红素 ↑ ↑↑
尿三胆
尿胆红素 － ＋＋ ＋＋
尿胆素原 ↑ 不一定 ↓
尿胆素 ↑ 不一定 ↓
粪便颜色 加深 变浅或正常 完全阻塞时陶土色
23.简述癌基因的活化的机理
癌基因的活化机理主要有：⑴ 获得启动子和增强子 ⑵ 基因易位 ⑶ 基因扩增 ⑷ 点突变
○原野牧歌○
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