食品微生物学技术思考题答案
1.如何区别高倍镜和油镜？
答：（1）油镜更接近标本片（2）油镜与标本间的介质是香柏油（3）油镜刻有“oil”或“Hi”字样，也刻有一圈红线或黑线为标记。
2．为什么在使用高倍镜及油镜是应特别注意避免粗调节器的错误操作？
答：使用高倍镜及油镜时镜头距离标片很近，而粗调节器的调节幅度较大，粗调节器的错误操作会使镜头大幅度向标本移动，很容易损坏标本和镜头。一般先用低倍镜找到物象后换到高倍镜，就只需要用细调节器了。
3.用油镜观察时应注意哪些问题？在载破片和镜头之间加滴什么油？起什么作用？
答：（1）应该先用擦镜纸将镜头擦干净，以防止上次实验的污染，操作时，先低倍再高倍，用完要擦掉油。（2）在转换油镜时，从侧面水平注视镜头注视镜头与玻片的距离。使镜头浸入油中而不以压破载玻片为宜。（3）从目镜内观察，把孔径光阑开到最大，使其明亮。然后用微调将镜台下降，直至视野内物象清晰。如油镜已离开油面仍未见物象，需重复操作。加的是香柏油。作用是增加折光率，增加显微镜的分辨率。
4.在调节焦距时，往往出现一些疑似观察标本的物象点，物象点可能是目镜或物镜上的杂质，也可能是标本片上的观察对象，如何通过操作判断这些物象点是否在标片上？答：移动标本片，看物象点是否移动，如果不移动，则不在标本片上。5．如果涂片未经热固定或固定温度过高、时间过长，会出现什么现象？
答：固定时间是杀死菌体，使菌体蛋白质凝固黏附于载玻片上，增加菌体对染色剂的结合力，易于着色。但是如果没固定，不容易着色，且容易被清水冲走。温度过高会使细胞收缩变形，时间过长会导致菌体变形或形态破坏，难以着色，从而导致难以着色。6.为什么要培养18-24h的细菌菌体进行革兰氏染色？
答:此时菌体进入比较活泼的繁殖生长期，细胞壁比较好着色。若菌龄太老，由于菌体死亡或自溶常使革兰氏阳性菌转呈阴性反应，关键在于细胞壁的通透性的改变。如果菌龄过老，不便于显微镜下观察时阴性还是阳性菌。
7．如何操作才能保证革兰氏染色结果正确，其中的关键环节是什么？
答：具体操作步骤为（1）涂片，与简单染色法相同，要求薄而均匀。（2）干燥、固定，在空气中自然晾干，或将涂面朝上，在酒精灯微小火焰上干燥；在酒精灯火焰上通过3-4次，温度不宜过高。（3）染色，用结晶紫进行初染1min,然后水洗。用碘液进行媒染，用碘液覆盖染色部位1min,水洗。在涂有细菌的部位连续滴加95%乙醇，约30s，水洗脱色。用番红溶液复染1min,水洗。（4）干燥，自然干燥或用吸水纸吸干，也可以用电吹风吹干。（5）镜检。
关键环节是酒精脱色。
8．为何常用插片法培养放线菌观察个体形态？
答：放线菌的营养菌丝生长在培养基表面或插入培养基里面，不易被接种针挑取制片。采用插片法可观察到放线菌自然生长状态下的特征，而且便于观察不同生长时期的形态。
9.在显微镜下，如何区分基内菌丝和气生菌丝？
答：一般气生菌丝颜色较深，直生或分枝丝状，比基内菌丝粗；而基内菌丝色浅、发亮，可看到隔膜，继而断裂成球状或杆状小体。10.放线菌与细菌的菌落最显着的差异是什么？
答：放线菌的菌落与细菌菌落最显着的差异是放线菌菌落干燥，不透明、表面呈致
密的丝绒状，上有一薄层彩色的干粉。菌落和培养基的连接紧密，难以挑取，菌落的正反面颜色常不一致，并常有辐射状皱褶。
11.酵母细胞和大肠杆菌在大小、形态上有何不同？如何鉴别?答：（1）酵母细胞大小一般为（1-5）um*（5-30）um,而大肠杆菌为（）um*（）um,酵母细胞比大肠杆菌大得多。（2）酵母细胞通常呈球形、卵圆形、腊肠形、椭圆形或藕形等。而大肠杆菌呈短杆或长杆状，且大肠杆菌周身鞭毛，能运动，酵母细胞无鞭毛，不能游动。（3）可通过观察来鉴别，酵母细胞在高倍镜下即可清楚，，而大肠杆菌须在油镜下才能清楚观察得到。（4）酵母细胞没有核膜而大肠杆菌有，酵母菌的菌落一般有酒气而大肠杆菌的菌落没有。
12.假丝酵母的假菌丝是怎样形成的？有没有横隔？
答：其假菌丝是各细胞间仅以狭小的面积相连，呈藕节状，在分隔处缢缩，是由酵母不停地出芽生殖所形成的。没有横隔。
13.为何要用乳酸—石炭酸溶液作霉菌水浸片？
答：霉菌菌丝较粗大，细胞易细缩变形，且孢子易飞散，所以制标片时常用乳酸石炭酸溶液，用此染液做霉菌制片的特点是细菌不变形，具有杀菌、防腐作用。用水浸片不易干燥，能保持较长时间，能防止孢子四处飞散，染液具有一定的染色作用，染液的颜色能增大反差。
14.比较霉菌菌丝与假丝酵母菌丝的区别。
答：假丝酵母是指能形成假菌丝，不产生子囊孢子的酵母。假菌丝没有横隔，各细胞间仅以狭小的面积相连，呈藕节状，在分隔处缢缩。霉菌的菌丝大多有横隔，整个菌丝的直径粗细一致，且分枝与主干的直径一致，呈竹节状的细胞串。假菌丝与真菌丝明显不同之处在于其两细胞有一细腰，而不像真正菌丝横隔处两细胞宽度一致。15．三种霉菌在菌落基本特征有何不同？如何鉴定？
答：毛霉菌落呈绒毛状、棉花状，其菌落与培养基连接紧密，不易挑起。菌落的正反面颜色、构造及边缘与中心的颜色构造常常不一致。曲霉菌落的定型为圆形，直径在2-3cm，边缘整齐，菌丝比毛霉短，呈致密的绒毛状。曲霉菌落的正反面颜色不一样。而青霉菌落呈青蓝色，表面粗糙。可根据霉菌表面的颜色、致密程度、大小进行鉴定。16.制备培养基的一般程序是什么？
答：一般程序是称量→配调→调节PH值→过滤分装→加塞→包扎标记→灭菌。17.灭菌在微生物学实验中有何重要意义？
答：经过灭菌后，才能保持无菌状态，防止培养基被污染，以及杂菌影响实验结果。18.紫外线为何有杀菌作用？经紫外线照射的部分为何会出现异常菌落？
答：因为紫外线是一种高能量的光，紫外线中的一段C频摧毁对人体有害的细菌或病毒有极大的效用。通过紫外线对细胞、病毒等微生物的照射，以破坏其生命中枢DNA
