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正在进行安全检测...

发布时间：2023-10-01 18:18:41 来源：文档文库

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实验六、小鼠采精方法
中国比较医学杂志CHINESEJOURNALOFCOMPARATIVEMEDICINE2005年4月第15卷第2期April,2005Vol.15No。2郑新民,李聚学，魏雁，乔宪凤,周荆荣
（湖北省农科院生物技术研究所，武汉
430072小鼠是世界上研究最为详尽的哺乳类动物［1］.但是目前人们仍然是通过手术法从小鼠附睾中获取精子，国内外尚无小鼠非手术法采精的报道.手术法采精为众多的科学研究带来了不便：（1手术法采精必须将雄鼠处死，分离其附睾和输精管来获取精子,过程繁琐，费时费工,且造成不必要的经济浪费［2]。另外，从附睾中获取的精子由于缺少副性腺中的诸多有益成分，精子品质难以保证[3];（2）不利于小鼠生殖生理的研究,在医学上,人们都是通过“杀鸡取卵”式地宰杀大量的雄鼠来获取精子进行科研分析[4-6],不但造成了很大的经济浪费，而且增加了实验的误差和难度;(3不利于某些动物模型的建立,例如，由于小鼠精子获取繁琐，人工授精技术不易建立，精子载体转基因技术尚无理想的动物模型,这极不利于该项研究的开展［7］。由此可见,建立一种方便快速的小鼠非手术法采精技术对解决小鼠手术法采精中存在的问题、小鼠生殖生理的研究和建立某些小鼠动物模型都是很有意义的。
1材料和方法
1。1实验动物

SPF级昆明小白鼠雄鼠,购自湖北省预防医学科学院。合格证号为：SYXK(鄂）20035853。
1.2小鼠假阴道抽吸器的制备
小鼠假阴道的制作：取一段长约2cm,内径8mm的软质透明塑料管,在其内侧套上一层厚度约0.1mm的胶膜,胶膜要求透明且有良好的弹性。在塑料管中部钻一直径为2mm的小孔,将一外径与小孔相当的硬质插管插入小孔中，深度与塑料管管壁厚度相当,小孔周围用强力胶水密封,向小管中轻轻吹入空气即可将塑料管内侧胶膜充起。将制好的小鼠假阴道与胶头吸管相连,小鼠假阴道抽吸器即制作完毕。
1.3电刺激采精仪的制备
电刺激采精仪由电刺激发生器和直肠探子两部分组成。电刺激发生器由交流变压器、电流表、电压调节器，变频器,电源开关等部件组成.直肠探子可用小塑料管自行制成,探子上装有电极，电极与电刺激发生器插座用电线相连。电刺激采精仪的特点：
电压连续可调，范围为0~20V；频率选择范围为0～50Hz;通电间歇时间可根据不同情况自行选择.1。4小鼠采精实验
1。4。1小鼠保定:利用筒式法保定小鼠,小鼠保定筒可用与小鼠体躯相似的塑料筒制成，塑料筒两端钻有插孔,一端锯有缺口.待小鼠钻入筒内后,迅速将铁钉插入插孔中,限制小鼠伸缩，即可将小鼠保定。将保定好的小鼠在筒内旋转，使其生殖器暴露在缺口中,以利精

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