遵义医学院硕士论文缺血/药物后处理对离体大鼠心肌线粒体功能及心磷脂的影响>>>>
缺血/药物后处理对离体大鼠心肌线粒体功能
及心磷脂的影响>>>>
摘要
目的:本研究采用Langendorff离体灌注建立大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,观察缺血后处理(IPostC和线粒体钾通道开放剂二氮嗪(DZ)药物后处理对缺血再灌注损伤大鼠心功能、心肌酶学、心肌氧自由基、心肌线粒体膜电位、心肌线粒体呼吸功能及心磷脂的影响,并探讨KATP通道开放剂在缺血/药物后处理心肌保护中的作用。
方法:采用Langendorff装置建立大鼠离体心肌缺血再灌注模型,将SD大鼠随机分为续灌组(C)、缺血再灌注损伤组(CON)、二氮嗪后处理组(DZ)、5-羟葵酸拮抗二氮嗪后处理组(5-HD+DZ)、缺血后处理组(IPO)、5-HD拮抗缺血后处理组(5-HD+IPO)组,每组8例。C组:在Langendorff灌注平衡20min后续灌70min;CON组:平衡20min,缺血前灌注4℃ST.Thomas停跳液,全心缺血40min,复灌30min;DZ组:平衡20min,全心缺血40min,缺血后给予含二氮嗪(50µmol/L)的K-H液灌注5min后,然后再用K-H液复灌注25min;5-HD+DZ组:二氮嗪后处理之前先给予含5-羟葵酸(100µmol/L)的K-H液灌注5min,再用K-H液复灌注20min;IPO组:平衡20min,缺血前灌注4℃ST.Thomas停跳液,全心缺血40min,采用恢复灌注10s、全心停灌10s,连续6次循环(共计2min,然后再用K-H液复灌注28min,;5-HD+IPO:缺血后处理之前先给予含5-羟葵酸(100µmol/L)的K-H液5min,再用K-H液复灌注23min。观察:1.平衡末及再灌注末各组不同时间心功能及心肌酶学的变化;2.平衡末及再灌注末取心肌并分离、制备线粒体,观察线粒体膜电位及氧自由基的变化;3.平衡末及再灌注末取心肌并分离、制备线粒体,观察线粒体呼吸功能的变化;4.平衡末及再灌注末取心肌并分离、制备线粒体,提取线粒体总磷脂,观察各组线粒体心磷脂含量的变化。
结果:1.心功能(HR、CF、LVDP、LVEDP)、心肌酶学(LDH、CK)、线粒体膜电位(Δψ):各组内再灌注末的心功能、心肌酶学及线粒体膜电位与平衡末比均有显著性差异(P<0.05或P<0.01);再灌注末:CON组与C组比有极显著差异(P<0.01;DZ组与IPO组的心功能、心肌酶学、线粒体膜电位优于CON