文章编号 1007-9564(2007)03-0282-02基质金属蛋白酶-2在子宫内膜异位症中的表达及意义063000 河北省唐山市,华北煤炭医学院组胚教研室 曲银娥 杨 梅3 王毅峰33关键词 子宫内膜异位症;基质金属蛋白酶;免疫组织化学;子宫内膜摘要 目的 探讨基质金属蛋白酶-2(Matrix metalloproteinase-2,MMP-2)在子宫内膜异位症发生发展中的作用。方法 SP法进行免疫组织化学染色检测MMP-2在子宫内膜异位症在位内膜、异位内膜和正常子宫内膜组织中的表达。结果 MMP-2在各组内膜组织中均有表达,异位内膜组强于在位内膜组和对照组,差异有统计学意义。增生期各组内膜中异位内膜组与在位内膜组和正常内膜组之间差异有统计学意义,在位内膜组与正常内膜组之间差异无统计学意义;分泌期各组内膜之间差异无统计学意义。正常内膜与在位内膜组织中MMP-2蛋白表达分泌期高于增生期,差异有统计学意义;而异位内膜增生期和分泌期腺上皮及间质中均呈高表达状态,差异无统计学意义。结论 MMP-2在内异症的形成中发挥重要作用。 子宫内膜异位症(内异症,Endometriosis,EMs)指子宫内膜在子宫腔被覆面以外的地方种植生长,包括内膜间质和上皮细胞在子宫腔以外部位的异位生长[1],是生育期妇女的常见病,其发病率逐年上升。虽然内异症在病理诊断上属于良性疾病,但其行为却类似于恶性肿瘤,具有增生、浸润、扩散及远处转移等恶性行为,且无良好的治疗方法[2]。基质金属蛋白酶(Matrix metalloproteinases,MMPs)与基底膜和其它细胞外基质成分的降解密切相关,参与内异症的发生发展。本研究通过检测MMP-2在内异症异位内膜、在位内膜及正常内膜中的表达,探讨MMP-2在内异症发生发展中的作用。1 资料与方法1.1 一般资料 所取病例为2003年6月—2004年12月期间就诊于唐山市妇幼医院妇科,经腹腔镜检查或开腹手术、术后经病理检查证实为内异症者。其中子宫内膜异位症异位内膜组织76例,年龄26～52(34.1±5.5)岁,增殖期56例,分泌期20例。同时通过刮宫或切开手术取子宫内膜异位症患者的在位子宫内膜共64例,年龄28～51(35.6±4.12)岁,增殖期40例,分泌期24例。选择同期因子宫肌瘤行子宫切除术的72例正常子宫内膜为对照组,年龄25～48(35.0±3.72)岁,增殖期48例,分泌期24例。所有患者无其他内外科及内分泌疾病,术前3个月未应用激素治疗,月经周期规律,增生期和分泌期的划分根据月经周期及病理所见。所有组织术后立即取材,经10%中性甲醛溶液固定,石蜡包埋,5μm连续切片5张,1张行常规H E染色进行病理形态学观察,余者用于免疫组织化学染色。1.2 方法1.2.1 主要试剂 鼠抗人MMP-2单克隆抗体、SP免疫试剂盒和山羊血清、DAB显色试剂盒均购自福州迈新生物技术开发公司。1.2.2 SP法检测MMP-2 切片常规二甲苯脱蜡,梯度乙醇至水。采用Streptavidin Peroxdase Conjugated Method免疫组化方法,即SP法进行免疫组织化学染色,实验操作严格按说明书进行。以0.01M PBS代替一抗作为阴性对照,以已知阳性标本为阳性对照。1.2.3 免疫组化阳性判断标准 MMP-2阳性信号为腺上皮细胞胞浆呈棕黄色着色,间质中也有表达。根据文献Krajews2 ka[3],按半定量的方法评定每一张标本:随机选取高倍镜(×400)下至少5个视野,计数阳性细胞的百分率,并进行计分(0～4分),同时对阳性细胞免疫染色强度进行计分(0～3分),免疫组化染色评分=阳性细胞百分数评分×染色强度评分。0分为阴性(-),1～2分为弱阳性(+),3～4分为中等阳性(6),4分以上为强阳性(7)。1.3 统计学方法 应用SSPS11.0软件进行统计学处理,秩和检验比较各组间免疫组化结果。2 结果2.1 MMP-2蛋白在三组内膜中的表达情况 MMP-2在各组内膜组织中均有表达,主要表达于子宫内膜组织的腺上皮细胞中,间质中也有表达,阳性细胞胞浆呈棕黄色或棕褐色。异位内膜组、在位内膜组和对照组中阳性表达率分别为82.89%、68.75%、58.33%。三组阳性构成比差异有统计学意义,异位内膜组强于在位内膜组和对照组,差异具有统计学意义,在位内膜组与对照组间差异无统计学意义。见表1。表1 各组内膜MMP-2阳性构成比比较组别nMMP-2(例)-+67总阳性率(%)正常内膜72302515258.33在位内膜64202016868.75异位内膜761314391082.893△ 注:与正常内膜组比较3P<0.01;与在位内膜组比较△P<0.01表2 分泌期和增生期各组内膜MMP-2阳性构成比比较组别nMMP-2(例)-+67总阳性率(%)增生期 正常内膜4828108241.67 在位内膜4018126455.00 异位内膜5612828878.583△分泌期 正常内膜242731291.67 在位内膜242810491.67 异位内膜20168595.00 注:与正常内膜组比较3P<0.01;与在位内膜组比较△P<0.01・282・Chinese Journal of Coal Industry Medicine Mar.2007,Vol.10,No.3333河北大学职业卫生技术学院解剖教研组唐山市工人医院妇产科
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