SDS软件基本操作方法
1、启动设备先开电脑,再开定量PCR仪主机电源,最后启动SDS软件。
2、新建文件菜单File→New,assay选择AbsoluteQuantification〔实时定量模式〕,打开一个空白文件。
3、探针设置双击任意一个孔打开Wellinspector窗口。点击AddDetector按钮,打开DetectorManager窗口。点击File→New,新建探针〔探针名称建议使用“基因_荧光”格式,如GAPDH_FAM、ACTIN_VIC等〕。设置报告基团〔FAM或者VIC〕和淬灭基团〔TaqMan探针选TAMRA;MGB探针和SYBRGreen染料选None〕等。完成后点OK。在DetectorManager窗口选择相关探针,点击AddtoPlateDocument按钮。点击Done关闭DetectorManager。
4、填样品表在96孔表中选定样品孔,在Wellinspector页面的SampleName栏中填入样品名称;在探针列表的Use选项下的方框中打钩选择探针;在Task栏中选定样品类型〔阴性对比选NTC;未知样品选Unknown;标准品选Standard。关于标准品Standard,还要在Quantity栏中输入浓度或者拷贝数。参比荧光〔PassiveReference〕选ROX〕。关闭Wellinspector窗口。
5、循环参数切换到Instrument页面,循环参数不需要修改,定量PCR的标准反映体积是50μL。
6、启动扩增点Save按钮保存文件。确认96孔板在主机内放置妥当后,点击Start按钮开始PCR循环。
7、保存结果程序结束后,点Disconnect按钮,然后File→Save保存实验结果。
8、数据分析点击自动分析实验结果。切换到Result页面,进入扩增曲线〔AmplificationPlot〕子页面查看图谱。切换到Report子页面,查看实验报告。保存结果。从File菜单中选择Export,再选择数据类型,输出数据。
水产养殖实验教学中心
二○一五年六月
本文来源:https://www.2haoxitong.net/k/doc/78e8b6832f3f5727a5e9856a561252d381eb20ff.html
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