甲苯二异氰酸盐对人支气管上皮细胞通透性的影响
莫冠文1，蔡绍曦1，赵海金1，李文军2，佟万成1，刘来昱1
【摘 要】摘要：目的探讨甲苯二异氰酸盐(TDI)对正常人支气管上皮细胞(16HBE)活性氧(ROS)生成及通透性的影响。方法应用改良的Son氏等方法制备TDI-人血清白蛋白(TDI-HSA)。四唑盐(MTT)比色法检测不同浓度的TDI-HSA对正常人支气管上皮细胞株16HBE活力的影响。实验分4组：以未加任何处理因素的16HBE为对照组，20、60、100 μg/ml的TDI-HSA处理16HBE 24 h，通过2',7'-二氢二氯荧光黄双乙酸钠(DCFH-DA)细胞内ROS荧光染色，收集细胞后以流式细胞仪检测荧光强度。选择对ROS水平影响较大的100 μg/ml的TDI-HSA处理16HBE 24 h。流式细胞仪定量检测抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸（NAC）对TDI-HSA诱导ROS生成的影响，荧光显微镜观察照相。采用跨上皮电阻(TEER)法检测上皮单层细胞的通透性。结果120 μg/ml以下浓度的TDI-HSA对细胞活力无显著影响。ROS水平在对照组、20、60和100 μg/ml组分别为：65.04±4.56，91.76±4.84，119.96±10.40，203.11±8.21。100 μg/ml TDI-HSA组与对照组及20、60 μg/ml组相比，16HBE的ROS水平显著升高(P＜0.05)。对照组、100 μg/ml TDI-HSA处理组、50 mmol/L NAC预处理组的细胞内ROS水平分别为：69.02±2.14，246.47±18.55，102.50±4.60；而TEER分别为：280.75±11.93，92.25±11.44，207.25±7.41。NAC可显著降低TDI-HSA诱导的ROS生成(P＜0.05)，改善氧化应激对单层细胞通透性的影响(P＜0.05)。结论TDI显著增加HBE ROS的产生，其诱导的氧化应激部分参与支气管上皮细胞通透性的增加。这可能是TDI诱发哮喘的发病机制之一。
本文来源：https://www.2haoxitong.net/k/doc/2aca63f1af02de80d4d8d15abe23482fb5da0270.html
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