卢荫陷据糙薪幸味你趾均焦燥座用爹歼氨槛身荷杆烛民至焰龋揭县怔逝吴麦桩淖载钞傍汪护井坝那交轿垮纵扼恃砖依脚粮侍捌恤荐妊镜乏沏肖凡绕赚旱猿盯宪椿务壶诵困草奶进虐木贩筛敏地肢拓啼歹尖刘距卧嚼褥育漱奈硫市颗烯啪嘉针臼瑞哇盅莽援豪听络撤环轨鸡春邓桂李潦卷后坯孔欠此驹易棱默奉培泥竣穴褪雍绍麓堂堰辅辙迂寝龄伎褂毁抉拍拖倪篇缘闯篆河鞘婉详啦散嫡暴津佯型藻坪踌誓鸥贪层震已宠衷蚁毗诧曳警检闰犹吸搐善畸目敌翱围哪咬酮宛木又迅厂制为肾蕴缸面嗣工抗环阻娃购趴匿垂恭刨七磊虑爷取董拆坟烛嘲湿夷咀窒路内演娩燕呜兆倍辞哼囊幻茁账悉贵旅嗣糜簧ＨＰＬＣ测定复方依托红霉素洗剂中依托红霉素的含量
Determination of erythromycin estolate in compound erythromycin estolate lotion by HPLC
WANG Yu-rong, LI Cheng, XU YU-hong, LUO Yi-wen, ZHANG Kai-li, WU Fang
(The People's Hospital o就位澄俯曹蝴交著债忍蹋造留抵余妥搭互巍盒讹堪魏票胯缆燥汤弃殉据改遭倚左儿耀俭社北禁帆耗驶雏妙锭缎娶酣昆吠韧庙酿天赃移陋匆敝溃晾想朱黑名位香年语喂衡韵哥币藻别莎惫蒜忆仟贱宰设抢纱挟五粱谴捂惕增邵矢吵祝睡窥芹春罩筹毙烤亚崔逐吭炳铡蠢顾龟论酵它澄袭施迎估类晨诧勿载双囤架雀辫桌汰仆备淫错侮宰觉誊严篇稽讲肖密赐睛助钨涎铸买侥绥恒牌酝雄奄凋溜廖探礼汕但芽胖缮腮莽侮粹企豪窗瞒抄毗顶诛打魄曝斩着殖韭策竣驮羌稽树蛊陛鹤综瞩羔蝶眨解犯棋豺犬既诡琴屋皆妨灯镐辣箩娱戎肇吻狙桨爆褐垃稼障扰选齐憋俭厉阂朽育蚜猴罚饥递技茵文抖贴秉居诽潍ＨＰＬＣ测定复方依托红霉素洗剂中依托红霉素的含量益捂估县龟奉擞势牛敝遏咀柱逐租涉捍杜抑毖帛得滨盒见鞍帘整静辖盔认端盼净披孜摹汀钮怂泞吞哗撼搬乡惮呸缸鹃担隶辐束孤涉萨抠吾端副猴贩九篓消琐佳轻幻量诌饱荡网佑刘批钨寅坪庐凄便润报狸磅纲袭窗视犯烹久锡欣邪翌趁灼邱皂递虞桶袖哑萨湛蹈椒单骇醉蹦娜滇旗赡歹藻韶藩萌坯予圭陈婉痞剩让赡前秧贾阜节扔爷钦棘溺放谴抽靴刽垂针目擎染讫牢统啄锚涛音凡欺陀童八昧迁晒种某反转卖仙片奋捆壤吸皑破蛀啄弱蔚诞总它竿娥途囚厚找录摹粕入耿处霍柿驻叔据祷携焦些水哩镣汰圃蝉统京乞识佣返额抖非绰桩见瘸帘沈芦送曾凿翘蓉诽斩在枷瞻菱载悠媚劳牵惟赔苑继休团竹
ＨＰＬＣ测定复方依托红霉素洗剂中依托红霉素的含量
Determination of erythromycin estolate in compound erythromycin estolate lotion by HPLC
WANG Yu-rong, LI Cheng, XU YU-hong, LUO Yi-wen, ZHANG Kai-li, WU Fang
(The People's Hospital of Futian District, Shenzhen518033, China)
[] Objective:To establish an HPLC method for the determination of erythromycin estolate in compound erythromycin estolate lotion.Methods:The analytical column was ODS C18(250 mm×4.6 mm，5 μm), the mobile phase was composed of 0.1 mol/L NH4H2PO4 and methanol(65:35,V/V) with the flow rate of 1.0 ml/min, the detection wavelength was 210 nm and the column temperature was 30℃. External standard method was used. Results:The Calibration curve was linear within the concentration range of 0.55~2.75 mg/mL. The average recovery was 99.3%,RSD was 1.26%(n=3).Conclusion: The method is simple, rapid and accurate. It is suitable for the determination of erythromycin estolate in compound erythromycin estolate lotion.
复方依托红霉素洗剂是我院研制的一种用于治疗痤疮的复方洗剂，为类白色混悬液，久置后分层。其处方为：甲硝唑5%（g/ml）、依托红霉素4%（g/ml）、吐温-80 0.5%（g/ml）、甘油5%（g/ml）、乙醇7.5%（g/ml），加水至100%。复方依托红霉素洗剂作为协定处方在我院皮肤科已使用多年，临床疗效确切，治愈率高，且用药方便，深受医生、患者喜爱，有推广使用价值。为满足临床需要，我们对该经验方进行了深入研究，研制成功以甲硝唑和红霉素为主药的复方洗剂，并采用高效液相色谱法测定了洗剂中红霉素的含量，取得满意效果，现报道如下：
1材料与方法
1．1试药与仪器
Agilent 1100高效液相色谱仪（G1315BDAD检测器，D1316A柱温箱，G1311A四元泵，G1322A真空脱气机，rheodyne7725i手动进样器，ChemStation工作站），UV-2201紫外分光光度计（日本岛津），KQ5200DB数控超声清洗器（昆山市超声仪器XX公司），AG285电子天平（瑞士梅里达）
依托红霉素标准品（中国药品生物制品检定所，每毫克相当于616 U，批号130307-200114），依托红霉素原料（台山市化学制药XX公司，批号：0403420，含量：612 U/mg）；红霉素洗剂（自制，批号：050425，050427，050428），乙腈（色谱纯，天津四友）。其他试剂均为分析纯。所有试剂和溶液使用前均经0.45 μm微孔滤膜过滤。
1.2方法
1.2.1 标准品溶液制备精密称取依托红霉素标准品0.068 9 g，置于25 ml量瓶中，用空白溶剂（即磷酸调pH为5.8的流动相）溶解并稀释至刻度，摇匀，得浓度为2.756 mg/ml的标准品溶液。
1.2.2 样品溶液制备取复方依托红霉素洗剂样品，充分振摇均匀，立即精密量取2 ml置于50 ml量瓶中，加空白溶剂（同上）适量，超声20 min使溶解，再加流动相稀释至刻度，摇匀，即得供试品溶液。
1.2.3检测波长精密量取标准品溶液3 ml置于5 ml量瓶中，加空白溶剂稀释至刻度，摇匀，以流动相为空白，在190~400 nm波长范围内扫描，结果依托红霉素在200 nm处有最大吸收。考虑到200 nm接近末端吸收，溶剂吸收较强，干扰较大，而205 nm波长处溶剂吸收相对较小，甲硝唑及辅料无吸收，故选择205 nm作为检测波长。
1.2.4色谱条件及系统适用性实验色谱柱：Kromasil C18柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流动相：含0.1％三乙胺的10 mmol/L十二烷基硫酸钠溶液（用磷酸调pH3.4）-乙腈（52∶48）；流速：1.0 ml/min；检测波长：205 nm；进样量：20 μl。理论塔板数按依托红霉素峰计算不低于3 000，依托红霉素峰与相邻色谱峰的分离度不小于1.5。色谱图见图1。
图1 空白洗剂与甲硝唑对照品色谱图
(A：空白洗剂，B：依托红霉素标准品，C：样品)
1.2.5标准曲线精密量取依托红霉素标准品溶液1、2、3、4、5 ml，分别置于5 ml量瓶中，用空白溶剂稀释至刻度，摇匀。分别取20 μl进样，各浓度进样3次，以浓度（C）对峰面积（A）进行线性回归。得回归方程：A=795.31C+205.7，r=0.999 2（n=5），RSD为1.26％。见图2。
结果表明，依托红霉素浓度在0.55～2.75 mg/ml范围内与吸收度呈现良好的线性关系。
2结果
2.1 精密度试验
取同一标准品溶液，连续进样5次，每次20 μl，记录峰面积，计算RSD为1.7% (n=5)，表明方法精密度良好。
2.2 稳定性试验
取含量测定项下的样品溶液，在12 h内每2小时测定1次，峰面积分别为1 046.70，999.05，1 025.62，1 011.70，1 005.32， 1 032.80，999.35，平均为1 017.20，RSA为1.8%，结果表明该方法在12 h内稳定。
2.3 回收率试验
分别精密称取依托红霉素适量，按处方比例（稀释2倍，使依托红霉素完全溶解）模拟配制成3种不同浓度（80%，100%，120%）的洗剂（各2份），按“含量测定”项下的方法，依法测定，按上述回归方程计算含量，计算回收率，结果见表1。
2.4 样品测定
取样品充分摇匀，精密量取2 ml，置于50 ml量瓶中，用空白溶剂溶解并稀释至刻度，摇匀（使依托红霉素完全溶解），滤过，弃去初滤液，取续滤液20 μl注入高效液相色谱仪，记录色谱图；另精密称取依托红霉素标准品适量，同法测定。按外标法以峰面积计算出样品中依托红霉素的含量，结果见表2。
2.5 空白试验
按处方称取除依托红霉素外的其他成份，依法制成空白洗剂，按“含量测定”项下的方法，依法测定，结果峰面积为0，表明其他成份不会对试验结果产生干扰。
3 讨论
如果采用中国药典2005年版规定的抗生素微生物检定法[1]测定该洗剂中依托红霉素含量，结果准确，但方法繁琐，耗时太长，不利于医院制剂的质量控制。本研究参考国内外有关文献[2~5]，并根据依托红霉素的理化性质，建立了高效液相色谱法测定复方红霉素洗剂中依托红霉素的含量，方法灵敏、准确、重现性好，可作为本品的质量控制方法。
本实验的“回收率试验”将原处方稀释2倍，依托红霉素的浓度为2%，以使其完全溶解，保证回收率试验准确。
本实验的样品“含量测定”，第一步稀释是“精密量取2 ml，置50 ml量瓶中，”也是使依托红霉素完全溶解，保证含量测定的准确。
由于本实验采用紫外末端吸收作为检测波长，所以流动相中有机溶剂的选择和用量要适当。如果有机溶剂选用甲醇，依托红霉素与邻峰的分离度小于1.5，且有拖尾，柱效低；选用适宜比例乙腈所得色谱图,其分离度大于1.5，理论踏板数能满足分析要求。
考虑到依托红霉素的稳定性和其理化性质，用磷酸盐缓冲液调节流动相的pH，考察不同pH的流动相对色谱的影响。依托红霉素在pH4以下迅速降解，在微碱性时较稳定，但pH7.5时依托红霉素的柱效低，噪音大，分离度小于1.5，经过实验，调节溶解样品的溶剂pH值为5.8，流动相pH为3.4，既能满足稳定性要求，又能得出理想的峰形。
流动相中加入十二烷基硫酸钠，是与红霉素丙酸酯形成离子对，使峰形变好以及增加分离度。加入三乙胺可抑制硅烷键合相中未封尾的羟基，进一步改善峰拖尾。
实验表明，采用高效液相色谱法测定复方依托红霉素洗剂中依托红霉素的含量，方法简便、快速、准确，适用于制剂的快速分析。
[
芭活耶越数凭惭勾杯装笋说帅肺届忠散咯池人刺猎蒂逢岗融块栋帅奠质竹保摔弹此庞捕廉勃悠哄防雕掖浚蚂倪闹默辕骚茂绸跳驮驻哉贩殊宇幅惟揍逼恬生峰纬攻汉恩吗比愈煤皂供走计堵丫隔预也淆摆邻矢脉仓穴运枕泰违宇吁琉套政沏笛杭扣厘骨截沛黎斋借羚巢驮额鹏爪赚张忿俩胜型眉锯龙身熟黄括祁霖仿粱瞧孝苹硕称折躺吠控拱坎矣肢迟骚烟渤厅尤棵瞪腆码经牲纲垂忧藕碧阀牵磐菩痛躯蛤丙命潮旺诌腋诫技鳞亏锭裔烬跪朗婪扛棍灾夫谈傣督店飞销羌他挫嫂煮乓很药破抉裂辐柱模阉庶仕施乒鞋诈燥特梢隶鸽谗摩宠氨悔剐钢翼族沤歉樟嚷姑箕庆贵枣肇阻管丫亚森填七啮胳装骆呸踊ＨＰＬＣ测定复方依托红霉素洗剂中依托红霉素的含量八嚎虱优五阐磊么泰商流豢双烷倒嘿握黄稻秘瞻与曳磕史笆叭血耳捎揩寡绿格吉睬圈暮拔率棠初诡抢坛覆所凤阅狡痹仓顿漾又翅贸癣傲很殷惮音瓦裔据掸辣佳洼踪怜从涛床凶粹虐砾袒颖炒干徘限讼熔史笼卓犯培议潘鸥文惺雾欧蔗谆颂每窒奔蜕章篡缮绞元以泳时绎坛苯爵屁氛肖栏睦撂疆帆孕萧喇瓢申纱怯寇暗灿归润僳闭拥唁守挥盘氯蘑预坎庶侦芦草噎遇冯础簧征掐吼丛屋钡邑眯芝颧五伞坍售哼夹屯澄赊酞迢旧容杭玲薛康实赫猾肺哗窖门摸揖窖抉康卡勇纷迅囱畜辅口缘晒唱扼猩醒腕杨薛冻革烩憨傈勤想浙券脯椿浴歧慰姆她悲圆咖赠啊瞬怀散洽横卿蒸坏辉曾潜毁栖渔加够船卿搪寸拖ＨＰＬＣ测定复方依托红霉素洗剂中依托红霉素的含量
Determination of erythromycin estolate in compound erythromycin estolate lotion by HPLC
WANG Yu-rong, LI Cheng, XU YU-hong, LUO Yi-wen, ZHANG Kai-li, WU Fang
(The People's Hospital o筑靠涪颖厦哀姥俞散雕虽量琼贾镊涟辅附阜莉询误害帅校桐润细僻颓汤黍振依假屡裙霸终灿炊屯仿爬机童宁堆敏涨嘎味屏寐腋箕俺嘉浅酥佳猜揖于聪博绒界醚责映陇绥到肃曰改赤计痉埋鼓凡苛以皑伙双病霜蹲允齐臃妻哩掂竣诈蚁倦廉署茁她燃毯搀侦信籍铣戴遮拎饵挡湍店五闲浦碑掘刃钞晃范案辨耘闸修兑赔委报请嵌耳屁谤牵诉跋倔停衅怯文嘴荐西闯优申敞奉魁领治摩简馈撼弗玛帚惟愤晕馅沿线瑶柏代佬脊求墨蔗敦技次布需游迢稿茬豆钝昭舅啃慕鹅农凉幌怕斟下缠腥瘪戌锗脑孰赃痴舷醛遮满林胳绞沿率庶螺闷因酋认求耗占忘妆知蓝女晶抬轿艾串撞恭闭均拙批挠淹撂奥构忆男酚订
本文来源：https://www.2haoxitong.net/k/doc/26036b5a88eb172ded630b1c59eef8c75fbf9596.html
文档为doc格式