环介导等温扩增技术在临床检测中的应用

发布时间:2019-08-06 18:34:51   来源:文档文库   
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环介导等温扩增技术在临床检测中的应用

作者:于 荔

来源:《中国现代医生》2009年第24

        [摘要] 目的 探讨环介导等温扩增技术在临床检测中的应用。方法 采用我院200810月门诊或住院患者85份试验用的含结核杆菌的阳性痰液和阴性痰液,通过染色涂片镜检和经典PCR的方法及使用改良罗氏培养法进行培养予以定性,并与LAMP法检测结果比较。结果 LAMP法与培养法、Amplicor MTB PCR法检测痰液中结核分枝杆菌的阳性率无明显差异。结论 LAMP法是一种新型的核酸扩增方法;由于它是近年来兴起的一种技术,是一种便捷、特异性强和灵敏度高的快速基因检测技术。

        [关键词] 环介导等温护增技术;临床检测

        [中图分类号] R446.1 [中图分类号] A[文章编号] 1673-9701(2009)24-43-02

        

        日本学者Notomi[1]2000年发明了一种全新的核酸扩增方法——环介导等温扩增技术(loop-mediated isothemal amplifi cation LAMP),其特点是针对靶基因的6个区域设计4种特异引物,利用一种链置换DNA聚合酶(Bst DNA polymerase)在等温条件(65℃左右)保温几十分钟,即可完成核酸扩增反应[2]。不需要模板的热变性、长时间温度循环、繁琐的电泳、紫外观察等过程,该技术的问世解决了基于核酸的分子生物学检测技术的诸多难题,使其作为快速诊断方法成为可能.,已经被广泛用于细菌、病毒和寄生虫等的检测,动物胚胎性别鉴定,食品卫生检疫及基因芯片的开发等,我们采用LAMP法对痰液中和培养基中的结核分枝杆菌进行检测,并分析报道如下。

        

        1材料与方法

        

        1.1试验样本

        试验用的含结核杆菌的阳性痰液和阴性痰液来自选自我院200810月门诊或住院患者85,全部样本均通过染色涂片镜检和经典PCR的方法及使用改良罗氏培养法进行培养予以定性。

本文来源:https://www.2haoxitong.net/k/doc/1af2f796640e52ea551810a6f524ccbff021ca6b.html

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