项目名称重要花卉、果蔬病毒的检测鉴定技术及应用

项目名称：重要花卉、果蔬病毒的检测鉴定技术及应用

申报奖种：2018年福建省科学技术进步奖

推荐单位：福州海关（原福建出入境检验检疫局）

项目简介:

本项目以我国花卉、果树及蔬菜上发生严重或具有检疫重要性的病毒为研究对象，开展了检测鉴定技术研究，建立了快速的检测技术，研制了检测试剂盒，并制定了标准化的检测规程，为我国口岸检疫、农业生产部门对花卉、果树及蔬菜病毒的检测提供了可靠的技术支持。主要技术内容包括：（1）建立了重要花卉病毒巢式PCR、实时荧光PCR、RT-LAMP、双重RT-PCR、双重实时荧光RT-PCR、三重RT-PCR、七重RT-PCR等快速检测技术；（2）建立了重要果树病毒RT-RPA、RT-LAMP、实时荧光RT-PCR、斑点杂交等分子快速检测及血清学检测技术；（3）建立了重要蔬菜病毒RT-RPA、数字PCR、RT-LAMP等分子快速检测及血清学检测技术；（4）研制了病毒血清学检测试剂盒、现场快速分子检测试剂盒和试纸条；（5）建立了可同时筛查烟草花叶病毒属多种花卉、果树和蔬菜病毒的分子筛查技术；（6）花卉、果树及蔬菜病毒检测技术及试剂盒的实际应用。本项目已申请国家发明专利8项（其中5项获授权），制订国家标准5项、行业标准5项，发表论文23篇（其中SCI收录7篇）。矚慫润厲钐瘗睞枥庑赖賃軔。

主要完成单位：福建出入境检验检疫局检验检疫技术中心，中国检验检疫科学研究院，福建农林大学，福建省农业科学院果树研究所，厦门出入境检验检疫局检验检疫技术中心聞創沟燴鐺險爱氇谴净祸測。

主要完成人及其贡献：

1. 沈建国：项目主持人，负责项目总体设计、组织实施和关键技术研究。

2. 张永江：项目组主要成员，参与完成花卉、果树及蔬菜病毒检测鉴定技术及试剂盒研制。

3. 吴祖建：项目组主要成员，参与完成花卉、蔬菜病毒检测鉴定技术及项目指导。

4. 高芳銮：项目组主要成员，参与完成花卉、蔬菜病毒检测鉴定技术、试剂盒应用。

5. 谢丽雪：项目组主要成员，参与完成果树病毒检测鉴定技术、试剂盒应用。

6. 廖富荣：项目组主要成员，参与完成花卉、蔬菜病毒检测鉴定技术。

7．陈细红：项目组主要成员，参与完成花卉、蔬菜病毒检测鉴定技术部分研究工作。

8. 蔡伟：项目组主要成员，参与完成花卉、蔬菜病毒检测鉴定技术部分研究工作。

9. 杨宏凯：项目组主要成员，参与完成花卉病毒检测鉴定技术部分研究工作。

代表性论文专著目录：

1.Jin J, Shen J G, Cai W, Xie G H, Liao F R, Gao F L, Ma J F, Chen X H, Wu Z J. Narcissus yellow stripe virus and Narcissus mosaic virusdetection in narcissus via multiplex Taqman-based reverse transcription-PCR assay. Journal of Applied Microbiology, 2017, 122(5):1299-1309 残骛楼諍锩瀨濟溆塹籟婭骒。

2.Huo Y Y, Li G F, Qiu Y H, Li W M, Zhang Y J. Rapid detection of Prunus necrotic ringspot virus by reverse transcription-cross-priming amplification coupled with nucleic acid test strip cassette. Scientific Reports, 2017, 7(1)酽锕极額閉镇桧猪訣锥顧荭。

3. Gao F L, Shen J G, Liao F R, Cai W, Lin S Q, Yang H K, Chen S L. The first complete genome sequence of Narcissus latent virus from Narcissus. Archives of Virology, 2018, 163(5):1-4彈贸摄尔霁毙攬砖卤庑诒尔。

4. Gao F L, Du Z G, Shen J G, Yang H K, Liao F R. Genetic diversity and molecular evolution of Ornithogalum mosaic virus based on the coat protein gene sequence. PeerJ, 2018, 6(11):e4550謀荞抟箧飆鐸怼类蒋薔點鉍。

5.Tang Y J, Gao F L, Zhen Y, Wu Z J, Yang L. Complete genome analysis of Jasmine virus T from jasminum sambac in china. Archives of Virology, 2016, 161(7):2033-2036厦礴恳蹒骈時盡继價骚卺癩。

6.Gao F L, Jin J, Zou W C, Liao F R, Shen J G. Geographically driven adaptation of Chilli veinal mottle virus revealed by genetic diversity analysis of the coat protein gene. Archives of Virology, 2016, 161(5):1329-1333茕桢广鳓鯡选块网羈泪镀齐。

7.Zhang Y J, Li X J, Li M, Qiu Y H, Li G F, Li Y Q, Zhu S F. Development of reverse transcription loop-mediated isothermal amplification assay for sensitive and rapid detection of Hosta virus X. Journal of Phytopathology, 2018,00:1-7鹅娅尽損鹌惨歷茏鴛賴縈诘。

8.沈建国,高芳銮,蔡伟,金晶,廖富荣,吴祖建.进境欧洲水仙种球上病毒的检测与鉴定. 植物保护学报, 2017, 44(2) :283-289 籟丛妈羥为贍偾蛏练淨槠挞。

主要知识产权证明目录：

授权的发明专利：

1.发明专利“美人蕉黄斑驳病毒巢式PCR检测试剂盒及其检测方法”（ZL 2.7）。預頌圣鉉儐歲龈讶骅籴買闥。

2.发明专利“美人蕉黄斑驳病毒荧光定量PCR检测试剂盒及其检测方法”（ZL 2.8）。渗釤呛俨匀谔鱉调硯錦鋇絨。

3.发明专利“一种检测葡萄卷叶伴随病毒2号的RPA引物及其检测试剂盒”（ZL2.X）。铙誅卧泻噦圣骋贶頂廡缝勵。

4.发明专利“一种检测葡萄A病毒的RT-LAMP试剂盒及其专用引物”（ ZL2.8）。擁締凤袜备訊顎轮烂蔷報赢。

5.发明专利“鉴定烟草花叶病毒种属的方法及其专用条形码引物”（ZL2.7）。

发布的标准：

1. 国家标准，李属坏死环斑病毒检疫鉴定方法（GB/T 33114-2016）。

2. 国家标准，水仙迟季黄化病毒检疫鉴定方法（GB/T 33115-2016）。

3. 国家标准，玉簪属植物X病毒检疫鉴定方法（GB/T 35330-2017）。

4. 国家标准，葡萄A病毒检疫鉴定方法（GB/T 35332-2017）。

5. 国家标准，葡萄黄点类病毒检疫鉴定方法（GB/T 35337-2017）。

推广应用情况：

本项目属于社会公益类，已在福建、广东、浙江等口岸和农业生产等部门应用，检出了多种重要的花卉、果树和蔬菜病毒，制订了多项国家标准和行业标准，不仅大大提高了病毒检测效率，确保了货物的快速、安全通关，而且防止了国外危险性病毒传入，保护农业生产安全。贓熱俣阃歲匱阊邺镓騷鯛汉。

本文来源：https://www.2haoxitong.net/k/doc/0b3c72976ad97f192279168884868762caaebb93.html