第6章 RNA转录与转录后加工

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6RNA转录与转录后加工

1.主要内容1转录的基本概念
2大肠杆菌RNA聚合酶及其转录3真核生物的RNA聚合酶及其转录4RNA的转录后加工和反转录2.教学要求
1掌握转录的基本概念,原核转录的主要参与者(RNA聚合酶和启动子)以及原核
转录的过程(起始、延伸和终止)。
2掌握真核转录的三种主要RNA聚合酶、所转录的基因类型和参与转录过程各种因
子等。
3了解不同前体RNA的加工机制。

6.1RNA转录概述6.2细菌基因的转录6.3真核生物的转录6.4RNA的转录后加工6.5RNA的反转录
6.1RNA转录概述6.1.1信使的发现6.1.2几个基本概念
6.1.3RNA的合成的基本特点6.1.4RNA合成和DNA复制的区别
6.1.1信使的发现
1955Brachet用洋葱根尖和变形虫进行实验:若加入RNA酶,则蛋白质合成就停止;
若再加入来自酵母的RNA,又可合成蛋白质。
这表明什么?
同年GoldsteinPlaut用同位素标记变形虫RNA前体——

1

发现标记的RNA在核内。
标记追踪实验:经过一段时间又发现被标记的RNA在细胞质中,这表明什么?

1956E.VolkinL.Astrachan用同位素脉冲一追踪标记
表明T2噬菌体新合成的RNA的碱基比和自身的DNA碱基比相似,而和细菌的碱基
比不同。T2感染细菌时注入的是DNA,而在细胞里合成的是RNA
这表明什么?

最令人信服的证据是Hall.B.DSpiegeman,SDNA-RNA的杂交实验:
T2噬菌体感染E.coli后产生的RNA分离出来,分别与T2E.coliDNA进行分子
杂交。
结果这种RNA只能和T2DNA杂种链,而不能和E.coliDNA进行杂交。

JacobMonod预言:
1)这种信使应是一个多核苷酸;
2)其分子平均不小于5105bp,足以携带一个基因的遗传信息;3)它们至少是暂时连在核糖体上;4)其碱基组成反映了DNA的序列;5)它们能高速更新。
JacobMonod将它定名为:信使RNA(MessengerRNAmRNA
6.1.2几个基本概念
转录(transcription:是指以DNA为模板,在依赖于DNARNA聚和酶催化下,以4
rNTPATPCTPGTPUTP)为原料,合成RNA的过程。
在有些病毒中,RNA也可以指导合成RNA转录是基因表达的第一步,也是最关键的一步。

6.1.3RNA合成的基本特点
1960Weiss,S,B等发现RNA聚合酶(RNAPol。其特点是:
1)以核糖核苷三磷酸(rNTR)为底物;
2

2)以DNA为模板;3)按5′-3′方向合成;
4)无需引物的存在能单独起始链的合成;5)第一个引入的rNTP是以三磷酸形式存在;6)在体内DNA双链中仅一条链作为模板;7RNA的序列和模板是互补的。确定有义链
1963J.MarmurDotySpiegelnan区分有义链。采用枯草杆菌的SP8噬菌体为材料,
SP8DNA双链有差异明显。
现在将作为转录模板的DNA单链称为模板链或反义链(antisenstrand),非模板链称为有义链(sensestrand)或编码链。在体外DNA的两条链都可作为RNA合成的模板。

怎样用实验证实mRNA的合成总是延着5-3′方向进行的?
E.coli0C时需13秒钟才能加上一个核苷酸,但在37C每秒就可加上40个核苷酸;利用这个差别以14C来标记U,0C培养E.coli,。提取这种正在伸长的mRNA分子,发现——
14C标记首先出现在伸长的3′端,因此可以证明合成是延着5′-3′方向进行的。

6.1.4RNA合成和DNA复制的区别
(1转录时只有一条DNA链为模板,而复制时两条链都可作为模板;
(2DNA-RNA杂合双链不稳定,RNA合成后释放,而DNA复制叉形成后一直打开,
新链和母成子链;
(3RNA合成不需引物,DNA复制需引物;(4转录的底物是rNTP,复制的底物是dNTP(5聚合酶系不同。
6.2细菌基因的转录6.2.1细菌的RNA聚合酶6.2.2原核生物转录的起始延伸6.2.3原核生物转录的终止
3

本文来源:https://www.2haoxitong.net/k/doc/0406da7e2d60ddccda38376baf1ffc4ffe47e2e4.html

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