高级生物化学试题集

高级生物化学试题集(1997级——2004级)

编者语：高级生物化学课程内容大致由四部分组成，依次是：蛋白质的结构与功能和酶化学(陈惠讲授)、核酸的结构与功能和细胞膜的结构与功能(杨婉身讲授)。期末成绩由3部分组成：卷面成绩占60%，实验(含报告)成绩占30%，平时作业占10%。编者分析历年考试试卷，认为：出题质量不高，与往年试题相比，平均每年试题重复率在30~50%左右。以2005年12月的试题为例，重复率达到了70%。因此，就应付考试而言，掌握本资料就可以取得较好成绩。但是，高级生化课程是非常重要的一门基础学科，它被我们所掌握的程度，直接影响到以后的学习和研究。所以，仍需要我们真正的去理解和掌握。

高级生物化学试题1997级

一、单项选择

1. 下列单链DNA片段中哪一个在双链状态下可以形成回文结构？ 3

①ATGCCGTA ②ATGCTACG ③GTCATGAC ④GTATCTAT

2. 蛋白质的分子量可以用沉降系数S表示，1S=10×10-3 4

① s ② cm ③ cm/s ④ 秒

3. 某酶有四种底物(S)，其km值分别如下，该酶的最适底物为 4

① 5×10-5 ② 1 ×10-5 ③ 10×10-5 ④ 0.1×10-5

4. 胰岛素受体和一些生长因子受体也是一种酶，它是 1

① 酪氨酸激酶 ② 丝氨酸或苏氨酸激酶 ③ 腺苷酸环化酶 ④硝酸化酶

5. 在接近中性pH的条件下，下列哪种基因既可作为H+的受体，又可作为H+的供体？ 1

① His-咪唑基 ② Lys-*-氨基 ③ Arg-胍基 ④ Cys-巯基

6. 氨基酸生物合成的调节，主要依靠

①氨基酸合成后的化学修饰 ② 氨基酸合成后的脱氨基和转氨基作用 ③ 氨基酸合成途径中，酶的别构效应和阻遏效应

7. 物质跨膜主动运输是指传送时 3

① 需要ATP ② 需要有负责传送的蛋白质 ③ 消耗能量(不单是ATP) ④ 在一定温度范围内传送速度与绝对温度的平方成正比

8. 用双脱氧末端终止法测定DNA序列，要除去DNA聚合酶中的 2 活性。

① 核酸内切酶 ② 5，-3，外切酶 ③ 3，-5，外切酶 ④ 核酸酶

9. 遗传密码中第几个碱基常常很少或不带遗传信息？

① 第一个 ② 第二个 ③ 第三个 ④ 第四个

10.有一个环肽的组成是Ala、Asp、Gly、Phe、Leu2、Val，下列方法中你首先选用什么方法作为你测定这一个肽的序列的第一步？

① 胰蛋白酶水解 ② 胰凝乳蛋白酶水解 ③ 溴化氢裂解 ④ 羧肽酶水解

二、是非题

1. 一般讲，从DNA分子的三联体密码中可以推定氨基酸的顺序，相反，从氨基酸的顺序也可以毫无疑问的推出DNA顺序。( F)

2. 所有生物催化剂都是蛋白质。( F )

3. 蛋白质分子中个别氨基酸的取代未必会引起蛋白质活性的改变。( R )

4. 具有正协同效应的酶，其Hill系数总是大于1的。( )

5. 操纵子学说适合于原核生物，又适合于真核生物，是说明基因调节的最好模型。( )

6. ATP不是化学能量的储存库。( )

7. 生物膜象分子筛一样对大分子不能通过，对小分子能以很高的速度通过。( )

8. 一个蛋白质样品，在某一条件下用电泳检查，显示一条带，因此说明该样品是纯的。( )

9. 线粒体内膜的电位是基质侧较负，胞液侧较正。( )

10.DNA半不连续复制是指复制时一条链的合成方向是5，-3，，而另一条则是3，-5，。( )

11.基因表达的最终产物不一定都是蛋白质。( )

12.因为密码子是不重叠的，所以基因也不重叠。( )

三、名词解释

1. 蛋白质超二级结构 2. sanger反应 3. ribozyme 4. 顺反子 5. 基因文库 6. 引发体 7. 限制性内切酶8. 分子病 9. 增色效应与减色效应 10. 固定化酶 11. 解偶连作用12. 亲和层析

四、问答题

1. 简述信号肽的特点和转运机制。

2. 同工酶产生的原因是什么？研究同工酶有何意义？

3. 生物膜主要有哪些生物学功能？任举一例说明膜结构与功能的密切关系。

4. 研究蛋白质一级结构有哪些意义？

5. 何谓DNA的变性、复性和杂交？DNA的杂交在生物化学和分子生物学研究中的应用？试举例说明。

6. 有一蛋白质在某一组织内含量较低，很难分离提纯，现已知其分子量并具有该蛋白质的抗体，问用哪些实验方法可以初步证明该组织内确含有该蛋白质？

高级生物化学试题1998级

一、单项选择

1. 蛋白质的碱水解导致 破坏。

① His，Asp，Glu ② Trp，Asn ③ Trp，Arg，His ④ Lys，Thr，Ser

2. 测得核酸样品甲溶液的粘度远远大于同浓度的核酸样品乙溶液，甲最可能是

① 变性DNA ② RNA ③ 变性RNA ④ DNA

3. 线粒体内的细胞色素C是一种

① 内膜外周蛋白 ②内膜内在蛋白③ 基质可溶蛋白

4. 酶反应速度对底物浓度作图，当底物浓度达到一定程度时，得到是零级反应，对此最恰当的解释是

① 形变底物与酶产生不可逆结合 ② 酶与未形变底物形成复合物 ③ 酶的活性部位被底物所饱和 ④ 过多底物与酶发生不利催化反应的结合

5. 1997年，Prusiner 因在 研究的重大贡献而获得当年诺贝尔生理医学奖。

① 朊病毒的生物学传染性原理 ② 氧化氮的信号分子作用 ③ G蛋白及其信号分子作用 ④ 单个细胞膜离子通道

6. 对一个克隆的DNA片段做物理图谱分析需要用

① 核酸外切酶 ② 限制性内切酶 ③ DNA连接酶 ④ DNA聚合酶

7. 要把膜蛋白质分子完整的从膜上溶解下来可以用

① 蛋白水解酶 ② 透明质酸酶 ③ 去垢剂 ④ 糖苷酶

8. 用双脱氧末端终止法测定DNA序列，要除去DNA聚合酶中的 活性。

① 核酸内切酶 ② 5，-3，外切酶 ③ 3，-5，外切酶 ④ 核酸酶

9. 免疫球蛋白经 水解后，可以获得一个具有抗体结合位的Fc片段和两个与抗原结合的Fab抗原结合点。

① 木瓜蛋白酶 ② 5，-3，外切酶 ③ 3，-5，外切酶 ④ 胃蛋白酶

10.非竞争性抑制剂使

① Vmax不变，Km变大 ② Vmax变小，Km不变 ③Vmax变小，Km变小 ④ Vmax变大，Km变大

二、是非题

1. 肌红蛋白和血红蛋白的亚基在一级结构上有明显的同源性，它们的构象和功能也十分相似，所以它们的氧合曲线也是相似的。( )

2. 有一条肽链的氨基酸顺序为Glu-Asp-Arg-Ala-Try-Lys-Asn-Ser-Arg-Thr-Met-His，用胰蛋白酶水解可以得到4个肽段。( )

3. 真核细胞中，细胞内Na+浓度比细胞外低，细胞外K+浓度比细胞内低。( )

4. 用定位点突变方法得到缺失某一个氨基酸残基突变体，这个突变的酶蛋白不再具有催化活性，因此可以认为该缺失残基一定是酶结合底物的必需基团。( )

5. 所有转录产物中，除编码序列外的核苷酸在后加工时都必须切除，才能得到有翻译功能的mRNA。( )

6. 电子通过呼吸链释放能量偶联ATP生成的反应是不可逆反应。( )

7. 酶反应中，底物类似物的抑制作用和过量底物的抑制作用基本上是相同的。( )

8. 具有正协同效应的酶，其Hill系数总是大于1。( )

9. 突变是遗传物质的畸变，点突变时有一个碱基的改变，一定会导致氨基酸顺序的改变。( )

10.镰刀型细胞贫血病是一种先天性遗传病，其病因是由于血红蛋白代谢发生障碍。( )

三、名词解释

1. 信号肽/导肽 2. Km/Tm 3. DNA文库/c DNA文库 4. 超二级结构/结构域

5. 主动运输/被动运输 6. PCR/RAPD 7. 化学酶工程/生物酶工程 8. 胞间信号/胞内信号

四、问答题

1. 蛋白质特定构象形成的原因是什么？环境因素对蛋白质构象形成有无影响？为什么？

2. 试比较光合磷酸化和氧化磷酸化能量转化机制的异同。

3. 激素受体有哪两大类？试比较其信号转导机制。

4. 同工酶产生的原因是什么？研究同工酶的意义？

5. 画出tRNA的二级结构模式图，标明其关键功能部位，并阐述其在蛋白质合成中结构和功能的统一性。

6. 分子筛层析和SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳皆可用于测定蛋白质分子量，其原理有何差异？各自特点和适用范围。

7. 将四种二肽(Gly- Gly，His-His，Asp-Asp，Lys-Lys) 的混合物先在PH5.6缓冲系统中进行电泳(I)，再转90。在PH7.2缓冲系统中进行电泳(II)，最后用茚三酮显色。请在下图中绘出该试验电泳图谱，并简述理由。

高级生物化学试题1999级

一、单项选择

1. 利用基因工程手段，包括基因的定点突变改造蛋白质分子，使之具有更完善、更能符合人类需求的功能。这种技术和科学被称之为 。

① 遗传工程 ② 蛋白质工程 ③ 细胞工程 ④ 蛋白质分子结构的预测

2. 用[α-32Ρ]dATP标记一个DNA片段，需要用 。

① 多核苷酸激酶 ② DNA连接酶 ③ DNA聚合酶 ④ 逆转录酶

3. 胰蛋白酶专一水解蛋白质中肽键部位是 。

① 碱性残基N端 ② 酸性残基N端 ③ 碱性残基C端 ④ 酸性残基C端

4. 磺胺药物能抑制病菌的生长是因为它是一种 。

① 不可逆抑制剂 ② 竞争性抑制剂 ③ 反竞争性抑制剂 ④ 非竞争性抑制剂

5. 在寡聚蛋白质中，亚基间的主体排布、相互作用以及接触部位间的空间结构称为 。

① 三级结构 ② 缔合现象 ③ 四级结构 ④ 变构现象

6. 核酸翻译时可以从任一核苷酸起始读码，人工合成的(AAC)n (n为任意整数)多聚核苷酸，能够翻译出几种多聚氨基酸？

① 一种 ② 二种 ③ 三种 ④ 四种

7. 有一个环肽的组成是Ala、Asp、Gly、Met、Leu2、Val，下列方法中你首先选用什么方法作为你测定这一个肽的序列的第一步？

① 胰蛋白酶水解 ② 胰凝乳蛋白酶水解 ③ 溴化氢裂解 ④ 羧肽酶水解

8. 下列有关糖蛋白中糖链部分生物学功能的论述，哪一个是错误的？

① 在细胞识别中糖链部分起着识别信号的作用 ② 糖链的引入增加了糖蛋白酶水解作用的能力 ③ 糖链是酶活性中心的组成部分 ④ 糖链对糖蛋白的构象稳定起一定的作用

9. 2，3—二磷酸甘油酸(DPG)通过β亚基的正电荷相互作用，使脱氧血红蛋白的四级结构趋于稳定。鸟类红细胞中含有一种不同于DPG的调节分子，也能降低血红蛋白对氧气的亲和力。下列物质中哪种最有可能充当鸟类红细胞的调节分子？

① 6-P-G ② IP6 ③ 磷酸 ④ 乳酸

10.蛋白质的分子量可以用沉降系数S表示，1S=10×10-3

① s ② cm ③ cm/s ④ 秒

二、是非题

1. 固醇类激素的作用机制是细胞膜上的受体相互作用，再通过细胞内的第二信使对细胞发生调节作用。( )

2. 基因表达的最终产物不一定是蛋白质。( )

3. 所有的生物催化剂都是蛋白质。( )

4. 利用过渡态类似物做半抗原，免疫动物获得抗体，从抗体中筛选具有催化活性的免疫球蛋白。这是迄今为止获得抗体酶的重要方法。( )

5. 突变是遗传物质的畸变，点突变时有一个碱基的改变，一定会导致氨基酸顺序的改变。( )

6. 生物膜象分子筛一样对大分子不能通过，对小分子能以很高的速度通过。( )

7. 线粒体内膜ATP酶和叶绿体ATP酶具有相似的结构，氧化磷酸化和光合磷酸化也具有相似的机理。( )

8. 诱导契合学说能很好的解释酶专一性的机理。( )

三、解释下列名词

1. 朊病毒(prion) 2. HGP 3. RFLP 4. Kat 型抑制剂 5. 信号肽

6. DNA文库 7. 化学渗透学说 8. 拓扑异构酶

四、问答题

1. 试述同工酶产生的原因及其生物学意义？为什么可以用电泳的方法分离鉴定同工酶？

2. 研究蛋白质、核酸一级结构有何意义？试对蛋白质、核酸的一级结构测定战略进行比较？

3. 什么是抗体？试以IgG的结构为例，分析抗体的重要功能，并简要说明抗体的多样性。

4. 什么是受体？有何特征和类别？简述一种分离提纯受体的方法、原理。

5. DNA半保留复制的机理是通过哪些重要的实验证明的？该复制方式的揭示有何意义？

高级生物化学试题2000级

一、单项选择

1. 蛋白质可与碱共热而水解，虽然这个过程会破坏一些氨基酸，但它却被常用来测定蛋白质中哪一种氨基酸的含量？

① Ser ② Cys ③ Trp ④ Tyr

2. 激素对靶细胞的专一性效应主要取决于

① 受体的有无 ② 受体的活化 ③ 受体量的多少 ④ 受体的结构

3. 二异丙基磷酰氟(DFP)是下列哪一类蛋白水解酶的专一性不可逆抑制剂？

① 丝氨酸蛋白酶 ② 巯基蛋白酶 ③ 天冬氨酸蛋白酶

4. 对一个克隆的DNA片段做物理图谱分析需要用

① 核酸外切酶 ② 限制性内切酶 ③ DNA连接酶 ④ DNA聚合酶

5. 甾体激素对机体的影响是激素与受体结合后通过什么方式而实现的？

① cAMP第二信使作用②磷酸肌醇的级联反应③激活酪氨酸激酶④真核调节基因转录

6. 关于遗传密码的破译工作，下列论述哪些是正确的？

① 遗传密码的破译归功于Nirenbergh和Khorana的开拓性工作。② 无细胞蛋白质合成体系的建立使破译遗传密码成为可能。③ 利用核糖体结合技术破译了大部分密码子，用人工合成的重复序列多聚核苷酸为模板，检查氨基酸渗入情况，破译了全部遗传密码。④ 幸运的是，所用的无细胞蛋白质合成体系含有相当高浓度的Mg2+，外加的人工模板无需起始信号就可以开始指令氨基酸渗入。

7. 膜蛋白与双脂层主要通过下列哪种力构成生物膜？

① 氢键 ② 离子键 ③ 共价键 ④ 疏水作用

8. 以下哪些实验在说明核酸是遗传物质方面起了决定性作用？

① ② Chargaff(1950年)，DNA碱基组成研究 ③Hershey和Chase(1951年)，同位素示踪T2噬菌体感染大肠杆菌的试验 ④ Wilkins和Franklin(1953年)，DNA x-射线晶体衍射研究。

9. 下列哪个不是推导米氏方程的假设条件？

① 测定速度为反应的初速度 ② [S0] >>[E] ③ ES水解生成E+S的速度显着快于ES形成P+E的速度，或称之为“快速平衡学说”④ 当反应达到稳定状态时，中间产物ES的形成速度不等于其分解速度。

10.氧化磷酸化和光合磷酸化的区别为：a. 在细胞中进行部位不同 b. ATP酶在膜上定位的方向不同 c. 磷酸化所需的能量来源不同 d. 电子供体和受体不同 e. 能量转化过程中H+流动方向不同。以上正确的为：

① a、b、c ② a、c、e ③ b、c、d、e ④ a、b、c、d、e

二、是非题

1. 同工酶在电泳时迁移率相同。( )

2. 结晶了的酶是纯酶。( )

3. 膜的独特功能由特定的蛋白质执行，功能越复杂的生物膜，膜蛋白含量越高。( )

4. SDS—PAGE测定蛋白质分子量的方法是根据蛋白质分子所带的电荷不同。( )

5. 反竞争性抑制剂是既能改变酶反应速度，又能改变酶Km的一种抑制剂。( )

6. 蛋白质折叠的主要驱动力是氢键。( )

7. SOD专一性的清除超氧物负离子，是细胞防御系统的重要组成部分。( )

8. 在生物圈中，能量从光氧生物流向化氧生物，而物质在二者之间循环。( )

9. 核糖体不仅存在于细胞质中，也存在于线粒体和叶绿体中。( )

10.RNA病毒不含有DNA基因组，所以根据分子遗传中心法则，它必须先进行逆转录，才能复制和增殖。( )

11.丝氨酸是蛋白质磷酸化位点，因此蛋白质中含有的丝氨酸残基均能被磷酸化。( )

12.蛋白质分子中的亚基也称为结构域。( )

三、解释下列名词

1. 分子伴侣 2. PCR 3. Na+ .K+—ATPase 4. 生物传感器

5. ribozyme 6. 受体 7. cDNA文库 8. 原级同工酶

四、问答题

1. 有一种七肽具有神经传导抑制剂的作用，其氨基酸组成为Ala5、Phe1、Lys1，七肽与FDNB反应后经酸水解，释放出DNP—Ala。用胰蛋白酶处理产生组成为Ala3、Phe1的四肽和组成为Ala2、Lys1的三肽。与胰凝乳蛋白酶作用则生成游离的Ala和一个六肽。试推导出该七肽的氨基酸序列。

2. 画出肌红蛋白(Mb)和血红蛋白(Hb)的氧合曲线，并讨论各自氧合曲线与其功能相关性。

3. 简述人类基因组计划(HGP)的概况，并结合自己的专业，阐述它对生命科学发展的意义。

4. 什么是双信使信号转导系统，试述胞外信息通过该系统在胞内得以传递的机制。

5. 试述三种直接或间接的方法，以证明某种外源基因已在转基因生物中存在或表达。

6. 解释为什么测定酶活力时一定要测定初速度，且一般以测定产物增加最为宜。

高级生物化学试题2001级

一、单项选择

1. 蛋白质可与碱共热而水解，虽然这个过程会破坏一些氨基酸，但它却被常用来测定蛋白质中哪一种氨基酸的含量？

① Ser ② Cys ③ Trp ④ Tyr

2. 如果测定一个小肽的氨基酸顺序，下列试剂中最合适的是

① 茚三酮 ② CNBr ③ 胰蛋白酶 ④ PITC

3. 超过滤与凝胶过滤是

① 两种性质不同，用处也不同的蛋白质制备方法 ②同一性质，表现方法不同的蛋白质制备方法 ③ 同一种方法的两个名词

4. TPCK(N-对甲苯磺酰苯内氨酰甲基酮)是下列哪个酶的亲和标记试剂？

①胰蛋白酶 ② 胰凝乳蛋白酶 ③ 甘油醛—3-磷酸脱氢酶 ④ 溶菌酶

5. 利用基因工程手段，包括基因的定点突变改造蛋白质分子，使之具有更完善、更能符合人类需求的功能。这种技术和科学被称之为 。

① 遗传工程 ② 蛋白质工程 ③ 细胞工程 ④ 蛋白质分子结构的预测

6. 非竞争性抑制剂使

① Vmax不变，Km变大 ② Vmax变小，Km不变 ③Vmax变小，Km变小 ④ Vmax变大，Km变大

7. 细胞内外钠钾的运送是属于

① 主动运输 ② 促进扩散 ③ 被动运输 ④ 基因转位

8. 生物膜脂双层的流动性主要取决于

① 磷脂 ② 胆固醇 ③ 鞘磷脂 ④ 脑磷脂

9. 甾体激素对机体的影响是激素与受体结合后通过什么方式而实现的？

① cAMP第二信使作用②磷酸肌醇的级联反应③激活酪氨酸激酶④真核调节基因转录

10.寡聚脱氧胸苷酸(oligo dT)纤维素柱层析分离mRNA是属于

① 分配层析 ② 离子交换层析 ③ 亲和层析 ④ 高压液相层析

11.某DNA片段按末端终止法测序得部分电泳图谱如下，因此该DNA的部分序列是

① AGCTCAGG ② GGACTCGA ③ AGCCTCAGG ④ GGACCTCGA

12.DNA拓扑异构酶I型和II型的主要区别在于

①I型使DNA的一条链发生断裂和再连接，II型使DNA的二条链同时发生断裂和再连接。②I型使DNA的两条链同时发生断裂和再连接，II型使DNA的一条链发生断裂和再连接。③I型、II型都使DNA的一条链发生断裂和再连接，但前者催化反应不需ATP，后者需ATP。④I型、II型都使DNA的二条链同时发生断裂和再连接，但前者催化反应不需ATP，后者 需ATP。

二、是非题

1. 含有四个二硫键的胰脏核糖核酸酶，若用巯基乙醇和尿素使其还原和变性，由于化学键遭到破坏和高级结构松散，已经无法恢复其原有功能。( )

2. 免疫球蛋白由两条轻链和两条重链所组成，抗体与抗原的结合只涉及轻链，因为它有可变区域，重链的序列基本上都是恒定的，因此，只起维持结构稳定的作用。( )

3. 血红蛋白和肌红蛋白均为氧的载体，前者是一个典型的别构蛋白，因而与氧结合过程中呈现正协同效应，而后者却不是。( )

4. 一般讲，从DNA分子的三联体密码中可以推定氨基酸的顺序，相反，从氨基酸的顺序也可以毫无疑问的推出DNA顺序。( )

5. 膜蛋白的跨膜肽段的二级结构大多为α-螺旋。( )

6. 具有正协同效应的酶，其Hill系数总是大于1。( )

7. 所有别构酶都是寡聚蛋白。( )

8. 一个基质连有Poly(u)配基的亲和层析柱，可方便的从细胞匀浆中分离出真核的RNA。( )

9. 突变是遗传物质的畸变，点突变时有一个碱基的改变，一定会导致氨基酸顺序的改变。( )

10.反转录酶仅具有RNA指导的DNA聚合酶的活力。( )

三、解释下列名词

1. 超螺旋DNA 2. 肽平面 3. PAGE 4. 信号肽 5. AFLP

6. 酶标免疫分析 7. 蛋白质的可逆磷酸化 8. Kat 型抑制剂

四、问答题

1. 某天然九肽，其组成为：Gly2、Phe2、Tyr1、Met1、Asp1、Arg1、Pro1，经胰凝乳蛋白酶水解后可分得一个五肽和一个四肽，四肽的组成为Phe1、Tyr1、 Gly1和Pro1。此九肽的CNBr处理产物再经阳离子交换树脂层析并洗脱得一个组成为Arg1、Phe1、Gly1的三肽，此九肽经胰蛋白酶水解可得Phe，如用FDNB反应后再水解得DNP-Tyr。请写出这九肽的全顺序，并阐述解析过程。

2. 什么是核酶和抗体酶？它们和酶有什么不同？

3. 某一均一的DNA样品，用EcoR I、Hpe II、Hind III3种限制性内切酶及它们的组合进行酶切，测出得到的DNA片段的大小如下：

EcoR I——————1.3kb(x2)

Hpe II——————2.6kb

Hind III——————2.6kb

EcoR I+ Hpe II——————0.5kb 0.8kb 1.3kb

Hpe II+ Hind III—————— 1.2kb 1.4kb

EcoR I+Hpe II+ Hind III—————— 0.5kb 0.6kb 0.7kb 0.8kb

指出这种分子是线性还是环形的，并绘出限制性图谱。

4. 试分析同源细胞色素C结构的种属差异和保守性，阐明其结构和功能的统一性。

5. 细胞表面受体主要有哪些类型？各具有什么特点，作用机理有何区别？

6. 怎样知道DNA复制是半保留复制而不是全保留复制？请解释Meselson和Stahl关于大肠杆菌DNA复制实验的结果。

高级生物化学试题2002级

一、单项选择

1. 协同效应的结构基础是：

①蛋白质分子的缔合 ②蛋白质的别构作用 ③蛋白质分子被激活 ④蛋白质的变性作用

2. 有一个蛋白质样品，经SDS-PAGE及不连续PAGE检查均显一条带；N端分析及C端分析说明它只有一个端基；等电聚焦电泳中呈现一深一浅的两条带。一般情况下，这蛋白质样品最可能是

① 样品不纯 ② 样品呈微不均一性 ③ 样品由几种大小不同的亚基组成

3. 测定蛋白质在DNA上的结合部位常用

① Western印迹法 ② PCR ③ 限制性内切酶谱分析法 ④ DNase1保护足迹分析法

4. 对具有正协同效应的酶，其反应速度为最大反应速度0.9时的底物浓度与反应速度为最大反应速度0.1时的底物浓度之比值应该是

① >δ1 ② = 81 ③ <81

5. 基因有两条链，与mRNA序列相同(T代替U)的链叫做

① 有义链 ② 反义链 ③ 重链 ④ cDNA链

6. 在染色体中DNA的构象主要是

① A 型 ② B型 ③ C型 ④ Z型

7. 证明DNA是遗传信息携带者的科学家是

① Meselson和Stahl ② Watsonn和Crick ③ Avery、Macleod和McCarty ④Berg和Cehen

8. 端粒酶是一种

① 限制性内切酶 ② 反转录酶 ③ RNA聚合酶 ④ 肽酰转移酶

9. 钙调蛋白是一种重要的调控蛋白，参与多种酶作用的调控，它属于

①跨膜信息转导的G蛋白家族②钙结合蛋白家族③免疫球蛋白家族④蛋白质激酶家族

10.甾醇类激素容易通过靶细胞膜，是由于它

①与膜受体有高度亲和力 ②分子的亲水性强 ③分子上有羟基结合 ④自身是脂溶性的

11.通常使用哪一种试剂测定多肽链的氨基末端？

① CNBr ② 苯异硫氰酸酯 ③ 6mol/L的HCl ④ 胰蛋白酶

12.蛋白质变性伴随有结构上的变化是

① 肽链的断裂 ②一些侧链基团的暴露 ③ 氨基酸残基的化学修饰 ④ 蛋白质亚基聚合

13.在接近中性ph的条件下，下列哪种基因既可作为H+的受体，又可作为H+的供体？

① His-咪唑基 ② Lys-*-氨基 ③ Arg-胍基 ④ Cys-巯基

14.一个速度对底物浓度作图有S型曲线的酶

① 肯定是别构酶 ② 不是别构酶 ③ 不一定是别构酶

15.酶促反应降低反应活化能的能量来源是

① 底物化学键的断裂可释放的化学能 ② 酶与底物结合能 ③ 底物形变能 ④ 酶构象变化所释放的能量

16.基因工程技术的创建成为可能是由于发现下列哪些酶？

① DNA聚合酶 ② DNA连接酶 ③ II型限制性内切酶 ④ 末端转移酶

17.寡聚脱氧胸苷酸(oligo dT)纤维素柱层析分离mRNA是属于

① 分配层析 ② 离子交换层析 ③ 亲和层析 ④ 高压液相层析

18.用[α-32Ρ]dATP标记一个DNA片段，需要用 。

① 多核苷酸激酶 ② DNA连接酶 ③ DNA聚合酶 ④ 逆转录酶

19.以下哪一个是正确的？

① 线粒体内膜对H+离子没有通透性 ② 线粒体内膜能通透H+离子由内向外 ③ 线粒体内膜能通透H+离子由外向内 ④ 线粒体内膜能自由通透H+离子

20.物质跨膜主动传送是指传送时

① 在一定温度范围内传送速度与绝对温度的平方成正比 ② 消耗能量(不单指ATP) ③ 需要有负责传送的蛋白质 ④ 需要ATP

21.目前已经知道某种金属离子在细胞信号转导行使细胞功能时起十分重要作用。它是

① Na+ ② K+ ③ Ca2+ ④ Mg2+

22.有一个肽的组成是Ala、Asp、Gly、Leu2、Val、Pro，它的N端是封闭的，下列方法中你首选用什么方法作为你测定这一个肽的序列的第一步？

① 胰蛋白酶水解 ② 溴化氰裂解 ③ 羧肽酶水解

23.形成稳定的肽链空间结构，一个重要的原因是肽链中的四个原子以及和它相邻的a碳原子处于

① 不断绕动状态 ② 可以相对自由旋转 ③同一平面 ④随不同外界环境而变换的状态

24.腺苷酸环化酶存在于

① 内质网膜 ② 细胞核 ③ 质膜 ④ 胞浆或质膜

25. 非竞争性抑制剂使

① Vmax不变，Km变大 ② Vmax变小，Km不变 ③Vmax变小，Km变小 ④ Vmax变大，Km变大

二、是非题

1. 某一生物样品，与茚三酮反应呈阴性，用羧肽酶A和B作用后测不出游离氨基酸，用胰凝乳蛋白酶作用后也不失活。因此可肯定它属非肽类物质。( )

2. 与肌红蛋白不同，血红蛋白由四个亚基组成，因此提高了它与氧的结合能力，从而增加了输氧的功能。( )

3. 糖蛋白合成时蛋白质糖基化位点主要在Ser、Asn残基上。( )

4. 酶的最适温度和最适pH都是酶的特征性常数。( )

5. NO是最小的信使分子之一。( )

6. 真核生物的基因不组成操纵子，不生成多顺反子mRNA。( )

7. 单克隆抗体和多克隆抗体的区别在于后者可以抗多种抗原。( )

8. 米氏常数是酶与底物形成复合物的结合常数。( )

9. 突变是遗传物质的畸变，点突变时有一个碱基的改变，一定会导致氨基酸顺序的改变。( )

10.反转录酶仅具有RNA指导的DNA聚合酶的活力。( )

11.蛋白质在小于其等电点的pH溶液中，向阳极移动；而在大于其等电点的pH溶液中，将向阴极移动。( )

12.RNA不携带遗传信息。( )

13.溴乙锭(EB)与双链DNA和某些有双链螺旋区RNA特异结合后，产生很强的荧光，是由于EB能插入到核酸碱基对之间。( )

14.有核酸的生物功能都是通过与蛋白质的相互作用完成。( )

15.在所有病毒中，迄今为止，没有发现既含有RNA、又含有DNA的病毒。( )

16. 利用过渡态类似物做半抗原，免疫动物获得抗体，从抗体中筛选具有催化活性的免疫球蛋白。这是迄今为止获得抗体酶的重要方法。( )

17. 迄今为止，发现所有的第二信使都是通过蛋白激酶起作用的。( )

18.蛋白质磷酸化和去磷酸化是可逆反应，该可逆反应是由同一种酶催化完成的。( )

19.生物膜象分子筛一样对大分子不能通过，对小分子能以很高的速度通过。( )

20.蛋白质在280nm波长的吸收主要来自Trp、Tyr、Phe。( )

21.在完整的红细胞悬浮液中，即使加ATP、Na+和K+ ，也测不出Na+、K+-ATPase活力。( )

22.同一种神经介质作用于不同靶细胞引起截然相反的作用，是因为靶细胞上受体不同。( )

23.激素与靶细胞中特异受体的结合亲和力很高，但大多是一种可逆反应。( )

24.各种激素都需通过细胞膜表面受体的结合作用才能产生生物效应。( )

25.酶蛋白最适pH值只取决于酶蛋白本身的结构。( )

三、名词解释

1. 酶联免疫分析法 2. deoxyribozyme 3. 限制性内切酶

4. 肽核酸 5. 原级同工酶 6. 化学渗透假说

四、问答题

1. 叙述血红蛋白的结构特征。这种结构和它的功能有什么关系？血红蛋白和氧的结合受哪些因素的影响？

2. 简述蛋白质化学测序法的机理和程序。核酸测序和蛋白质测序在思路上有什么不同之处？为什么？

3. 什么是遗传信息传递的中心法则？你认为用中心法则描述的遗传信息传递规律还有哪些问题有待补充？为什么说朊病毒的发现是对此法则的挑战？

4. 试述激素的G蛋白与磷脂酶C偶联的双信使信号转导系统的概念和作用机理。

5. 请设计一种获取细胞表面受体的方法。(阐明设计思路和技术路线)

高级生物化学试题2002级

一、单项选择

1. 在酶的分离纯化中最理想的实验结果是下面哪一项？

① 纯化倍数高，回收率高② 蛋白质回收率高③纯化倍数高，回收率低④ 比活力最大

2. 下列关于IgG结构的叙述哪一个是错误的？

① 由两条轻链和两条重链组成 ② 其分子形状为Y型结构 ③轻链和重链之间主要靠非共价键连接 ④ 轻链有两个结构域，重链有四个结构域

3. 下列关于蛋白质的结构与功能关系的叙述哪一个是正确的？

① 从蛋白质的氨基酸排列顺序可推知其生物学功能 ②氨基酸排列顺序的改变将导致其功能异常 ③ 只有具有特定二级结构的蛋白质才有活性 ④ 只有具有特定四级结构的蛋白质才有活性

4. 下面关于生物大分子沉降系数的叙述哪一个是错误的？

① 其大小与分子量有关 ② 与其光吸收值的大小有关 ③其大小与分子形状有关 ④ 与其扩散系数有关

5. 下列关于分子排阻层析法分离纯化蛋白质原理的叙述哪一个是正确的？

① 根据分子所带的净电荷的多少 ② 根据分子的大小 ③ 根据大小与分子形状 ④ 根据分子形状及所带的电荷性质

6. 下列关于cAMP的论述哪一个错误？

① 是由腺苷酸环化酶催化ATP产生的 ② 是由鸟苷酸环化酶催化ATP产生的 ③ 是细胞第二信息物质 ④ 可被磷酸二酯酶水解为5，-AMP

7. 下列关于Z型DNA结构的叙述哪一个不正确？

① 它是左手螺旋 ② 每个螺旋有12个碱基对，每个碱基对上升0.37nm ③ DNA的主链取Z字型 ④ 它是细胞内DNA存在的主要形式

8. 下列关于DNA超螺旋的叙述哪一个不正确？

①超螺旋密度为负值，表示DNA螺旋不足②超螺旋密度为正值，表示DNA螺旋不足③ 大部分细胞DNA呈负超螺旋④当DNA分子处于某种结构张力之下时才能形成超螺旋

9. 下列哪种技术常用于检测凝胶电泳分离后的限制性酶切片段？

① Eastern blotting ② Southern blotting ③ Northern blotting ④ Western blotting

10.下列关于离子交换树脂的叙述哪一个不正确？

① 是人工合成的不溶于水的高分子聚合物 ② 阴离子交换树脂可交换的离子是阴离子 ③ 有阳离子交换树脂和阴离子交换树脂两类④ 阳离子交换树脂可交换的离子是阴离子

11.下列关于肽链部分断裂的叙述正确的是

① 溴化氰断裂苏氨酸的羧基形成的肽键 ② 胰蛋白酶专一性水解芳香族氨基酸的羧基形成的肽键 ③ 胰凝乳蛋白酶专一性水解芳香族氨基酸的羧基形成的肽键 ④ 胰凝乳蛋白酶专一性水解芳香族氨基酸的氨基形成的肽键

12.在红细胞中，谷胱甘肽的氧化为什么会降低血红蛋白输氧的能力？

① 还原形式的谷胱甘肽可使血红蛋白中的铁保持在亚铁状态 ② 氧化形式的谷胱甘肽可使血红蛋白中的铁保持在亚铁状态 ③ 氧化形式的谷胱甘肽可使血红蛋白中的铁保持在正三价状态 ④ 还原形式的谷胱甘肽可使血红蛋白中的铁保持在亚铁状态

13.下面关于竞争性抑制剂的论述正确的是

①其存在与否，双倒数作图在纵坐标上的截距都是1/Km②它不改变Km ③它不影响底物与酶的活性部位结合④如果抑制作用发生，需它与底物反应以消除它对酶促反应的影响

14.下列关于酶的国际单位的论述哪一个是正确的？

① 一个IU单位是指在最适条件下，每分钟催化1umol底物转化所需的酶量 ② 一个IU单位是指在最适条件下，每秒钟催化1umol产物生成所需的酶量 ③ 一个IU单位是指在最适条件下，每分钟催化1mol底物转化所需的酶量 ④一个IU单位是指在最适条件下，每秒钟催化1mol底物转化所需的酶量

15.下列有关Phe-Leu-Ala-Val- Phe-Leu-Lys的叙述正确的是

① 是一个六肽 ② 是一个碱性多肽 ③ 对脂质表面无亲和力 ④ 是一个酸性多肽

16.不同的细胞对不同的第二信使产生不同的反应是因为不同的细胞具有

① 不同的受体 ② 不同的酶组成 ③ 不同水平的磷酸二酯酶 ④ 不同的G蛋白

17.喝一杯浓茶或一杯浓咖啡会产生什么影响？

① 干扰前列腺素合成 ② 增强肾上腺素作用 ③ 减弱肾上腺素作用 ④ 抑制脂肪动员

18.可用于判断酶的协同效应的系数是

① Hill系数 ② Km ③ Ks ④ Vmax

19.预测下面哪种基因组在紫外线照射下最容易发生突变？

① 双链DNA病毒 ② 单链DNA病毒 ③ 线粒体基因组 ④ 细胞核基因组

20.米氏方程的推导中假设

① v与[ES]成正比 ② [S]约等于[E] ③ [S] >>[E] ④ 以上错误

21.测定酶促反应的初速度是为了

① 使实验尽快完成以避免酶蛋白的变性 ② 避免酶被底物饱和 ③ 防止逆反应对结果分析所造成的影响 ④ 增加酶催化反应的效率

22.羧肽酶A促使底物的水解，下面哪个是其重要的机制？

① 结构重排将必须氨基酸残基靠近敏感键 ② 形成一个C端环肽的共价中间物 ③ 活性部位Tyr残基脱质子形成亲水作用 ④ 通过结合Zn2+的活化水

23.下面关于多聚酶链式反应(PCR)的叙述哪一个不正确？

① 是Mullis在1985年发明的一种体外扩增DNA的技术 ② 根据DNA复制的基本原则，反应体系中需要加入RNA聚合酶以合成引物 ③ 在PCR反应体系中，需要特定引物、四种脱氧核苷酸三磷酸 ④ 需要膜板DNA，即待测的DNA片段

24.下面关于某一种酶的几个同工酶的叙述正确的是？

① 由不同的多聚复合体组成 ② 对同一底物具有不同专一性 ③ 对同一底物具有相同Km值 ④ 电泳迁移率往往相同

25.下列哪种方法可得到蛋白质的“指纹图谱”？

① 酸水解，再凝胶过滤 ② 彻底碱水解并用离子交换层析测定氨基酸组成 ③ 用氨肽酶水解并测定被释放的氨基酸组成 ④ 用胰蛋白酶水解，再进行纸层析或纸电泳

二、是非题

1. 血红蛋白和肌红蛋白都有运送氧的功能，因它们的结构相同。( )

2. 纤维素柱层析分离蛋白质是根据蛋白质的分子大小。( )

3. 能改变DNA分子的拓扑连环数的酶叫做DNA拓扑异构酶。( )

4. 离子载体是异类可溶于脂双层的疏水性的小分子，它能增加脂双层对离子的通透性。( )

5. NO是最小的信使分子之一。( )

6. 真核生物的基因不组成操纵子，不生成多顺反子mRNA。( )

7. 单克隆抗体和多克隆抗体的区别在于后者可以抗多种抗原。( )

8. 米氏常数是酶与底物形成复合物的结合常数。( )

9. 基因表达的最终产物都是蛋白质。( )

10.正协同效应使酶促反应速度增加。( )

11.酶活性的测定实际上就是酶的定量测定。( )

12.蛋白质分子的亚基和结构域是同义词。( )

13.线粒体内膜的电位是基质侧较正，胞液侧较负。( )

14.将含有Asp、Gly、Thr、Lys和Leu的溶液(pH为3.0)加到预先用同样缓冲液平衡过的Dower-50阳离子交换树脂中，随后用该缓冲液洗脱此柱，5种氨基酸将按以下顺序洗脱下来：Asp、Thr、Gly、Leu和Lys。( )

15.从理论上说，可用Edman降解法测定任何非封闭性多肽的全部氨基酸顺序。( )

16.真核细胞染色体DNA结构特点之一是具有重复序列，高度重复序列一般位于着丝点附近，通常不转录。( )

17.Ca2+的信使作用必须通过钙调蛋白来完成。( )

18.酶联免疫分析和放射免疫分析的基本原理是相同的，只是标记分子不同而已。( )

19.逆转录病毒的基因组RNA实际上是一种多顺反子mRNA。( )

20.与蛋白酶不同的是，ribozyme的活性不需要有特定的三维结构。( )

三、名词解释

1. prion 2. 生物酶工程 3. 足迹法(footprint) 4. signal sequence 5. 光合磷酸化与氧化磷酸化 6. SDS-PAGE 7. 结构域 8.主动运输

四、问答和计算题

1. 与G蛋白偶联的受体相比，通过固醇类激素受体或离子通道偶联的受体作用的信号转导系统相对要简单些，其下游成分也少。试问这样的系统也会产生放大效应吗？为什么？

2. 试举一例，简要说明在生命活动的一些重要过程中是如何通过蛋白质(或酶)与核酸的相互作用而实现某一功能的。

3. 试比较蛋白质和核酸一级结构的异同，并论述这两类生物大分子一级结构研究的意义。

4. 分离纯化得到一种蛋白质，至少设计两条路线，来克隆出该蛋白质的基因或cDNA。

5. 取新鲜猪血50ml，离心收集红细胞，经多步分离纯化步骤获得25mg超氧化物歧化酶(SOD)制剂，将其溶于5ml水中，从中取出0.1ml用邻苯三酚自氧化法测定SOD活性。测得每分钟邻苯三酚自氧化率加酶前后分别为0.07/min和0.06/min，反应液体积为10ml；另取0.1ml酶液用考马斯亮蓝法测得蛋白质含量为0.40mg。计算所得SOD制剂的总活力单位数及其比活力。(SOD活力单位定义为：每毫升反应液中，每分钟抑制邻苯三酚自氧化率达50%的酶量)

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