细胞增殖检测(CCK—8检测法)最佳实验条件的确定

发布时间:2019-08-03 17:06:59   来源:文档文库   
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细胞增殖检测(CCK—8检测法)最佳实验条件的确定
作者:林春丽 王旭 李世明 姚丽娜
来源:《国外畜牧学·猪与禽》2017年第05

         要:在培养基的研发及生产中,促细胞增殖的能力是鉴定培养基质量优劣的一项重要指标,其检测方法也是至关重要的。近年来,各研究院和生物实验室普遍采用快速细胞增殖检测的方法,如CCK-8染色法。本文通过一系列实验分析影响细胞增殖检测结果的因素,以及这些因素的影响范围,从而确定最佳的实验条件。

        关键词:CCK-8试剂;细胞增殖;OD

        中图分类号:Q343.6 文献标识码:A 文章编号:1001-0769201705-0088-03

        细胞增殖检测原理:CCK-8试剂中含有WST-8[其化学名称为:2-2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-4-硝基苯基)-5-24二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐],被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲臜染料,生成的甲臜产物的数量与活细胞的数量成正比,在波长为450 nm 490 nm条件下,利用酶标仪测定其吸光度,OD值越高证明活细胞数越多,供试品的细胞增殖能力就越强。

        CCK-8检测法的操作步骤:细胞接种细胞培养添加CCK-8试剂孵育测定吸光度,其优点是:试剂不需要溶解,重现性好,操作简单,灵敏度高。

        1 实验目的

        本实验通过改变细胞增殖检测的条件(细胞贴壁率、孵育时间)来检测已知结果的两批样品血清,通过已知的检测结果与实际检测结果对比,来确定影响CCK-8检测的因素,以及控制范围。

        2 實验材料

        2.1 样品血清

        样品血清分别为胎牛血清和新生牛血清。依据《中华人民共和国药典》2010版的细胞增殖检测法检测,结果为胎牛血清细胞增殖能力明显优于新生牛血清。

        2.2 试剂和器材

本文来源:https://www.2haoxitong.net/k/doc/c408d02d534de518964bcf84b9d528ea80c72ff0.html

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