麻黄汤及拆方平喘作用的实验研究(1)讲解

发布时间：2018-10-14 07:31:31 来源：文档文库

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麻黄汤及拆方平喘作用的实验研究*(1)

作者：朱秋双，任春清，王彩云，余林中，罗佳波

【关键词】麻黄汤

【摘要】目的通过观察麻黄汤不同配伍的平喘作用，研究君药与臣、佐、使药之间的关系。方法正常豚鼠用组胺-乙酰胆碱混合液整体引喘，测定引喘潜伏期。以卵白蛋白致敏豚鼠，采用竞争性蛋白结合分析法测定其cAMP含量。结果单方麻黄、麻黄加桂枝、麻黄加杏仁、全方组的跌倒潜伏期比麻黄加甘草组长，差异有显著性意义（P＜0.05）；除单方麻黄组外，其他各配方组及全方组过敏豚鼠肺组织cAMP含量比盐水对照组高，差异有显著性意义（P＜0.05），尤以麻黄加桂枝、甘草组和全方组为著（均P＜0.05）。结论麻黄汤平喘作用依赖于麻黄、甘草能下调其作用，杏仁、桂枝作用不明显。cAMP测定结果显示与整体实验结果不一致，其平喘机制需进一步探讨。

【关键词】麻黄汤；组胺；乙酰胆碱；环磷酸酰苷

Experimental study on anti-asthmatic effects of Mahuang Decoction and its compositions

【Abstract】 Objective To investigate effects of different compatibility in antiasthmatic effect to explore the relationship among the dominant drug and others in the prescription.Methods The normal guinea pigs were detected the latent period after caused asthma by histamine and acetylcholine in vivo.After the guinea pig were sensitized by the egg albumin,the content of cAMP of lung were detected by the radioimmunoassay（RIA）.Results The latent period of falling down of the group of ephedrine,the compound of ephedrine and cassia twig,the compound of ephedrine and almond,Mahuang Decoction show significant variance compared with the group of mahuang plus licorice root（P＜0.05）.The effect of Mahuang Decoction and the compound of ephedrine,cassia twig and licorice root on the content of cAMP of lung in sensitized guinea pig shows significant variane compared with the group of NS.Conclusion Minister-drug and adjuvant-drug have certain extent effect to the pharmacological effects of the dominant drug.

【Key words】 Mahuang Decoction;histamine;acetylcholine;cyclic AMP

中医复方是中医治病的主要临床应用形式，历代医家在长期的临床实践中，总结出君臣佐使的组方配伍理论。麻黄汤为医圣张仲景名方，出自《伤寒论》，由麻黄、桂枝、杏仁、甘草4味中药组成［1］。药理研究证实，麻黄汤全方具有解热、促进腺体分泌、抗病毒、镇咳、祛痰、扩张支气管等作用［2］。为了探讨麻黄汤的组方原理，本实验通过观察方剂中各味药不同组方药效的变化，探讨麻黄汤的组方原理。

1 材料与方法

1.1 动物体重150~200g豚鼠及250~350g豚鼠，清洁级，雌雄各半，购于第一军医大学实验动物中心。分笼饲养，每笼5只，自由进食、饮水。动物在本实验室饲养1周。在活动、进食、粪便均无异常后进行实验。

1.2 药品与试剂麻黄、桂枝、杏仁、甘草原药材选定符合2000年版中国药典规定的饮片，购自广东省药材公司。各配伍组合煎液：原药浸泡30min，麻黄先煮20min，再和余药共煎30min，棉花过滤去渣，全方煎液浓缩成含生药1.3g/ml。结合对麻黄汤方剂组成的传统认识，采用叠加法进行拆方，原有药材的剂量保持不变，形成如下不同配伍组合：（1）麻黄；（2）麻黄桂枝；（3）麻黄杏仁；（4）麻黄甘草；（5）麻黄桂枝杏仁；（6）麻黄杏仁甘草；（7）麻黄桂枝甘草；（8）麻黄桂枝杏仁甘草。另设阴性对照即生理盐水（NS）对照组，阳性药物（氨茶碱）对照组。氯化乙酰胆碱（上海第三制药厂，031025），盐酸肾上腺素注射液（上海禾丰制药厂，031223），磷酸组胺（上海丽珠东风生物技术有限公司，031124），氨茶碱（南方第四制药厂，030916），卵白蛋白（上海第三制药厂，030126），氢氧化铝（上海第三制药厂，021211），cAMP（sigma公司，031024），环磷酸腺苷测定试剂盒（北京中国原子能科学研究院，031013）。

1.3 仪器雾化器：CSW-1型，鞍山市无线电一厂；旋转蒸发仪：R501型，上海申科机械研究所。

1.4 对引喘潜伏期的影响［3］将挑选合格的100只150~200g清洁级豚鼠随机分为10组。各组分别灌胃给予相应药液2ml/只，NS组灌胃给予等容量生理盐水，阳性药物对照组灌胃给予氨茶碱25mg/只，2h后，放入密闭玻璃钟罩（4L）内，用超声雾化器喷入引喘药液（2%氯化乙酰胆碱和0.1%磷酸组胺等体积混合液）15s/次，观察豚鼠的引喘潜伏期，判断受试药物平喘作用。

1.5 对cAMP含量的影响［4］取250~350g白色豚鼠100只，雌雄各半，随机分为10组。以4%卵白蛋白生理盐水0.2ml后腿肌内注射和4%氢氧化铝乳胶0.2ml腹腔注射致敏，于致敏次日起开始灌胃给药，麻黄汤不同配伍组2ml/只，NS对照组给予等容量生理盐水，肾上腺素组2ml/只（内含肾上腺素2mg），每日1次，连续14天。末次给药2h后，用2%卵白蛋白超声雾化吸入激发，激发后的豚鼠用木锤击头部致死。每只豚鼠迅速取50mg肺组织，加入预冷的5%三氯醋酸，冰浴中匀浆，于4℃ 3000r/min离心15min。上清用5倍体积的水饱和乙醚洗涤4次，水相在70℃~75℃水浴上吹干，得标本。采用竞争性蛋白结合分析法测定其cAMP含量。

1.6 统计学方法数据以（x±s）表示，应用SPSS 10.0统计软件进行单因素设计的方差分析，组间比较用SNK进行［5］。

2 结果

2.1 麻黄汤不同配伍对豚鼠整体动物组胺-乙酰胆碱混合液引喘潜伏期的影响见表1。豚鼠整体动物用组胺-乙酰胆碱混合液引喘，喘息明显。统计学处理表明，各组致跌倒潜伏期比较F=9.733，P=0.000，说明组间差异有非常显著性。表1 麻黄汤不同配伍对豚鼠整体动物组胺-乙酰胆碱混合液引喘潜伏期的影响注：与麻黄甘草组比较，▲P＜0.05；与NS、麻黄汤不同配伍组比较，#P＜0.05

2.2 麻黄汤不同配伍对过敏豚鼠肺组织cAMP含量的影响见表2。各实验组对过敏豚鼠肺组织cAMP含量的影响比较，F=373.079，P=0.000，说明组间差异有非常显著性意义。与NS对照组比，除了单方麻黄组外，其他麻黄汤不同配伍组和肾上腺素组均能提高肺组织cAMP含量（P＜0.05）。其中麻黄加桂枝、甘草组提升cAMP含量明显高于其他配伍各组，其差异有显著性（P＜0.05）。全方的作用虽不如麻黄加桂枝、甘草组，但强于其他配伍各组，其差异有显著性（P＜0.05）。