重组牛碱性成纤维细胞生长因子免疫原性的研究向军俭李鸿智*林剑(暨南大学生物系广州510632)摘要本文用重组牛碱性成纤维细胞生长因子(recombinant bovine basic fibroblast growt h facto r, r bFG F)作为免疫原注射给小白鼠,收集不同时相的血清,用间接ELI SA检测其产生抗体水平,以评价其免疫原性。发现给小白鼠注射一定剂量的bFGF可引起抗体的产生。本研究首次对临床使用r bFG F治疗肌萎缩侧索硬化症(Amyotrophic L ateral Sclerosis,ALS)的患者,动态观察其血清rbFGF抗体(Ant-i rbF GF)的消长情况,发现经肌肉注射rbFGF可明显引起机体产生ant-i rbFGF(IgM),与疗效成反比,与疗程成正比;还首次发现有的AL S病例在注射rbF GF前血清中已存在较高水平的ant-i r bFG F(IgM),提示这种细胞生长因子的自身抗体可能诱发自身免疫反应而与ALS有关。关键词碱性成纤维细胞生长因子免疫原性自身抗体肌萎缩侧索硬化症重组牛碱性成纤维细胞生长因子(rbFGF)具有促进创伤愈合、软组织的修复、促进血管新生,像神经生长因子那样具有很明显的神经营养作用[1]。rbFGF在临床的应用对人体是否具有免疫原性,对于探讨rbFGF 的疗效和安全性是一个重要的问题,尤其是重组牛基因产物作为异源性细胞因子用于人体治疗,其免疫原性研究更为重要。已有实验证明,将适量的rbFGF用作为抗原与弗氏完全佐剂(或不完全佐剂)混合后免疫小鼠和家兔,可以获得高效价的抗体,ELISA效价可达1: 1600~3200[2]。本工作通过给小白鼠注射rbFGF和收集临床使用rbFGF(均不含任何佐剂)治疗后患者血清,检测其用药前后各时相血清中抗rbFGF的抗体水平,以评价rbFGF 对于人体及小鼠的免疫原性。材料与方法一、材料1.试验动物:昆明种小鼠,购自第一军医大学动物中心,体重18~22g雌雄各半,随机分组;家兔,购自中山医科大学动物中心,雌性,体重2000g。2.主要试剂:rbFGF暨东生物工程研究所生产提供,冻干品,使用前生理盐水稀释至所需浓度;兔抗鼠rbFGF血清,本室制备[2];羊抗鼠Ig G-HRP,北京生物制品研究所生产,1: 100稀释;羊抗人IgG-H RP;羊抗人IgM-H RP 均为华美生物工程公司产品,1:2000稀释; BSA,华美生物工程公司产品。3.临床样品:采自经肌肉多点注射rbFGF治疗的神经内科的肌萎缩侧索硬化症患者,在注射rbFGF前采样一次,以后每间隔7天采样,分离血清-25e冻存待测。二、方法1.rbFGF小鼠抗血清的制备:小鼠雌、雄各半,每组6只,分为对照和低、中、高剂量组385总基础医学与临床1998118(5)BASIC M EDICA L SCIEN CES AN D CL IN ICS*医学院华侨医院神经内科
本文来源：https://www.2haoxitong.net/k/doc/927ffa6158fb770bf78a5573.html
