专题1 基因工程
一.基因工程的概念及操作工具
(一)基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过体外DNA重组和转基因等技术,赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。是在 水平上进行设计和施工的,又叫做DNA重组技术。
(二)基因工程的变异原理是:
(三)基因工程的基本工具:
1.“分子手术刀”——
(1)来源:主要是从 中分离纯化出来的。
(2)功能:识别双链DNA分子中 的核苷酸序列,断开_________部位的 ,因此具有 性。
(3)实例:EcoRⅠ识别________________,断开_______________________
SmaⅠ 识别________________,断开_______________________
(4)结果:产生 末端和 末端。
2.“分子缝合针”——
(1)作用:_______________________________________________________________
(2)种类:___________________ __________
①相同点:都缝合 。
②区别:E·coliDNA连接酶连接
T4DNA连接酶连接 ,但连接平末端的之间的效率较 。
(3)与DNA聚合酶作用的异同:
DNA聚合酶只能将 加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键。
DNA连接酶是连接 ,形成磷酸二酯键。
3.“分子运输车”——
(1)运载体具备的条件:①
②
③
④
思考:标记基因的作用:是为了鉴定受体细胞中 ,从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是 。
(2)最常用的载体是____________,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核DNA之外,并具有 的双链 DNA分子。
(3)其它载体:
二.基因工程的基本操作程序(共分成四步)
(一)第一步:
1.目的基因是指: 编码蛋白质的结构基因 。
2.获得目的基因的方法有 、 和 。
3.基因文库:
(1)概念:含有某种生物DNA片段的 。
(2)种类: 和 。
(3)cDNA是指由 产生的DNA片段。跟正常的真核基因相比,它缺少
和 。
4.PCR技术:
(1)原理:
(2)过程:第一步:加热至90~95℃,
第二步:冷却到55~60℃,
第三步:加热至70~75℃,
(3)条件: 。
5.人工合成基因方法的适用范围:
(二)第二步: ,是基因工程的核心。
1.目的:使目的基因在受体细胞中稳定存在,并遗传至下一代,同时使目的基因能够表达和发挥作用。
2.组成:
(1)启动子:是一段有特殊结构的 ,位于基因的 ,是RNA聚合酶识别和结合的部位,能驱动基因转录出mRNA,最终获得所需的蛋白质。
(2)终止子:也是一段有特殊结构的 ,位于基因的 。将终止基因的转录。
(三)第三步:
1. 常用的转化方法:
(1)将目的基因导入植物细胞:采用最多的方法是 ,其次还有 __________ ___等。
农杆菌转化法:
a.适用范围:__________ ___
b原理:
c.过程:
(2)将目的基因导入动物细胞:最常用的方法是 。此方法的受体细胞多是 。 因为_________________________________________
(3)将目的基因导入微生物细胞:__________________________________________
2. 重组质粒导入受体细胞后,筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是
(四)第四步:
1.首先要检测 转基因生物的DNA上是否插入了目的基因,这是目的基因能否在受体细胞
内稳定遗传的关键,方法是采用
2.其次还要检测 目的基因是否转录出了mRNA,方法是采用 ,这是检测目的基因是否发挥功能作用的第一步。
问:前两步检测都需使用探针,探针是
3.最后检测 目的基因是否翻译成蛋白质,方法是从转基因生物中提取 ,用相应的
进行 ,还可以进行个体水平的鉴定,如
。
三.基因工程的应用
1.植物基因工程:抗虫、抗病、抗逆转基因植物,利用转基因改良植物的品质。
2.动物基因工程:
(1)用转基因动物生产药物:乳房生物反应器具体是将 与 重组在一起,导入 中,可以通过分泌的乳汁来生产所需要的药品。此方法培育的动物应为 性。
(2)用转基因动物作器官移植的供体:
将器官供体基因组导入某种调节因子,以抑制 的表达,或设法除去
,再结合克隆技术,培育出没有免疫排斥反应的转基因克隆猪器官。
3.用基因工程生产药物:构建工程菌(将药用蛋白基因导入菌类细胞内)
4.基因治疗:把 导入病人体内,使该基因表达产物发挥作用。
基因治疗的种类及其优缺点?
四.蛋白质工程
1.概念:蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础,通过________
__,对现有蛋白质进行 ,或制造一种新的蛋白质,以满足人类的生产和生活的需求。
2.蛋白质工程崛起的缘由:
3.蛋白质工程的直接操作对象: 。
4.基本途径:
5.成功的例子不多,原因是
专题2 细胞工程
一.植物细胞工程
(一)理论基础(原理):细胞的全能性
细胞全能性:①概念:具有某种生物全部 的任何一个 ,都具有发育成
的潜能。
②大小:分化程度高的 分化程度低的
分裂能力强的 分裂能力弱的
植物细胞 动物细胞
③表现全能性需要的条件:
(二)技术手段有植物组织培养技术和植物体细胞杂交技术
(三)植物组织培养技术:
1.过程:
_____ __ _______———→_____________———→__________―→______________
结合书上实验,总结脱分化和再分化的条件:
2.用途:
(1)微型繁殖,培育新个体:利用植物组织培养技术培育新个体的方式属于 生殖。
所以该技术不仅可以保持优良亲本的 ,还可以
地实现种苗的大量繁殖。
(2)作物脱毒,培育无病毒植株:因为植物的 附近所含病毒极少,甚至无毒。所以可以切取一定大小的 进行植物组织培养,从而获得脱毒苗。
(3)制造神奇的人工种子:以植物组织培养得到 、 、 等为材料,经 包装得到的种子,即人工种子,可代替天然种子 ,克服天然种子缺陷。
(4)用于单倍体育种:如以基因型为aabb和AABB的植物个体为亲本杂交,培育AAbb的新品种。
亲本杂交得F1(AaBb),开花后获取花药,内含精子(AB、Ab、aB、ab四
种类型);对其花药进行 ,得到 ;然后在
期用 处理;得到了正常的__________植株(AABB、
AAbb、aaBB、aabb四种类型),最后从中选择满足要求的个体,自交,收
获种子。最大优点是: 。
思考:
(1)花药的外面有花药壁,花药壁细胞在组织培养的过程中,可以表现全能性吗?
(2)如果能,它发育的个体是二倍体还是单倍体?
(3)如果是二倍体,如何与精子发育的单倍体分开?
(5)利用突变体,培育新品种:在植物组织培养的过程中,由于 组织一直处于不断的分生状态,因此易受到 或 因素的影响而发生 。从这些突变体中筛选出对人们有用的突变体,进而培育成新品种
(6)细胞产物的工厂化生产:通过对能产生对人们有利的细胞产物的细胞进行组织培养,从而让它们能够产生大量的细胞产物。
3.地位:是培育转基因植物、植物体细胞杂交培育植物新品种的最后一道工序。
(四)植物体细胞杂交技术
1.方法步骤:①_________ ____________________
②________________ ______ _______
③
小结:1.去壁的方法是_________________ __
2.诱导融合的方法有 法(包括 等)和 法(一般是用 作为诱导剂)
3.融合成功的标志是: 。
2.意义:
二.动物细胞工程
(一)理论基础:
(二)技术手段:动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体
(三) 动物细胞培养
1.概念:动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的 ,将它分散成 ,
本文来源:https://www.2haoxitong.net/k/doc/e50f44d885868762caaedd3383c4bb4cf7ecb796.html
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