生物磁化水对杏鲍菇胞外酶活性影响及营养品质分析

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第37卷第8期2009年8月
东北林业大学学报
JGIURNAL
OFNORTHEASTFORESTRYUNIVERSITY
V01.37No.8
Aug.2009
生物磁化水对杏鲍菇胞外酶活性影响及营养品质分析
林健
张国财


(东北林业大学,哈尔滨.150040)
摘要在杏鲍菇栽培过程中采用7种不同磁处理水拌料、喷浇,在菌丝长至半袋、茵丝满袋、原基、幼菇、子实体成熟这5个阶段取样,对7个处理的杏鲍菇胞外酶活性和子实体营养组分进行测定。结果表明应用磁感应强度O.1T磁处理水处理1次效果最好,其次为0.25T处理1次;其中纤维素酶活性分别比自来水对照提高47.81%和40.94%;半纤维酶活性分别比对照提高42.08%和46.72%;淀粉酶活性分别比对照提高32.50%和25.50%;漆酶活性分别比对照提高85.63%和80.46%;产量分别比自来水对照提高9.66%和7.73%。
关键词杏鲍菇;磁处理水;胞外酶活性分类号¥567.39
EffectofMagnetizedWaterTreatmentonExtracellularEnzymeActivitiesandNutrifiveVal-eofP/eurotuseryn・gii/linJian,ZhangGuocai,BiBing(SchoolofForestry,NortheastForestryUniversity,Harbin150040,P.R.China)//
JournalofNortheastForestryUnivemity.一2009,37(8).一59—60,66
Magnetized
waterwas
usedto
mixandcuttivatethematerialsofPleurotuseryngiiunder
seven
dl&rent
treatmentswith
thesamplescollectedinfivedifierentgrowth
stages(mycelia
culturebag,anlage.youngmushroom,andfruitingbody)as
trientcomponentsofthefruitingbodyofP.eongiiweredetermined.Resultsshowedthatthezingof0.1Tactivityofthe42.08
percent
percent
once
colonizingthehalfculturebag,mycehacolonizingthewholeresearchobjects.Theextracell山arenzymeactivitiesandnu—
treatment
withwater
magneti-
hadthemostobvious
two
above.mentioned
effect.andthenfollowedby0.25Tonce.Comparedwiththecontr01.thecellulasetreatmentsincreasedby47.81percentand40.94percent.thehemicellulaseactivityby
output
and46.72percent.theamylaseactivityby32.50percentand25.50
and80.46
percent,and
the
percent,thelaccaseactivityby85.63
increasedby9.66percentand7.73percent,respectively.
KeywordsPleurotuseryngii:Magnetizedwater;Extracellularenzymesactivities
杏鲍菇[Pleurotuseryngii(DC.ex.FR)Quel.]又名刺芹侧耳,别名雪茸、鲍鱼菇或于贝菇,属伞菌目、侧耳科、侧耳属。原产于欧洲南部、非洲北部及中亚地区。杏鲍菇是一类珍稀大型肉质伞菌的新菇种,其子实体质地脆嫩Ⅱ丁口,菌柄组织细密结实,雪白粗长,孢子少,保鲜期长.风味独特,具有杏仁香味,日本已把杏鲍菇列入商业栽培和销售的新菇种”J。目前杏鲍菇在国际市场上价格较高,其开发前景广阔口。J。关于杏鲍菇的研究主要集中在液体菌种培养方面,而关于磁处理杏鲍菇的研究鲜有报道【4J。磁化水处理可为农作物增产、改善品质提供新途径。本试验在杏鲍菇的拌料、喷浇过程中应用可控循环式生物磁化水这一无污染、投资小、见效快的技术,对杏鲍菇的胞外酶活性和品质进行了测定和分析,以确定可以提高菇质水平的最佳条件。
钙l%.含水量60%。每处理砷袋,每袋干料500g。用于蝣1.3样品测定
取样和粗酶液制备:分5个阶段取样,即菌丝长至半袋、菌丝满袋、原基、幼菇、子实体成熟。每一阶段每一处理取菌包5袋,分别取5g栽培料打碎,混匀,四分法取5g加30mL蒸馏水,25℃浸提4h;过滤后,以4000r/min离心10min,上清液即为粗酶液,4℃冰箱中保存备用。
酶活性测定:羧甲基纤维素酶活的测定…,淀粉酶活性测定…,漆酶活性的测定一。9】,半纤维素酶测定¨0。“J。
子实体营养组分测定:主要测定子实体中蛋白质、粗脂肪、粗纤维、灰分质量分数。测定方法参照文献[12]。
2结果与分析
2.1不同磁处理水对杏鲍菇纤维素酶活性的影响
杏鲍菇在纤维素酶的作用下分解基质中的纤维素来满足生长、繁殖所要的营养,纤维索被纤维素酶降解为纤维二糖,再水解为葡萄糖,被菌丝吸收。纤维素酶活性对食用菌增产潜力有重要影响作用--“。
由表l可见,在整个培养过程中,7种处理的杏鲍菇纤维素酶活力变化总体趋势基本保持一致。纤维素酶活性在培养初期较低,呈逐渐升高趋势,子实体成熟阶段达到高峰。其中,0.1T1次处理的杏鲍菇纤维素酶活性在各时期都强于其它处理,其次为0.25T1次处理。由表2可见,杏鲍菇纤维素酶活性各处理间差异极显著,不同培养阶段差异亦极显著。
表l
杏鲍菇在不同处理下不同培养阶段的纤维素酶活性吸光度OD值
1材料与方法
1.1供试菌种和仪器
菌种来源:杏鲍菇l号菌种由东北林业大学森保学科提供。
磁水处理器:大禹活水宝由哈尔滨大禹磁处理开发有限公司提供。
可控循环式生物磁化水处理器15]:自行设计制造,主要由磁水处理器、循环水泵、水箱3部分构成。
1.2试验处理
磁处理水强度:本试验在杏鲍菇栽培过程中采用不同磁处理水拌料、喷浇,分为7个处理:磁感应强度0.1T处理1次、0.1T循环10min、0.25T处理1次、0.25T循环10min、0.4T处理1次、0.4T循环10rain。
培养料配方:阔叶树木屑78%,麸皮20%,蔗糖l%,碳酸第一作者简介:林健,男,1982年10月生.东北林业大学林学院,
在读硕t:研究生。
通信作者:张同财。
收稿H期:2009年3月2日。
2.2不同磁处理水对半纤维索酶活性的影响
半纤维索是由己糖和戊糖组成的异质多糖,真菌产生的
责任编辑:戴芳天。
方数据 

60
东北林业大学学报第37卷
半纤维素酶可降解半纤维素生成木糖及其它单糖,进而被菌丝吸收利用。半纤维素酶活性与食用菌的生长发育及生物量息息相关。
表2杏鲍菇在不同处理下不同培养阶段的纤维紊酶活性方差分析差异源
Ss

Ms,Pf:
不同时期0.218314
O.05457982.118361.21x10。132.776
289
不同处理0.0648050.01080116.25076
2.15×10—7
2.508l凹
差0.015951240.000665
计0.299070
34
由表3可见,7种处理的半纤维素酶活性变化总体趋势基本一致,与纤维素活性变化趋势十分相似。半纤维素酶活性在培养初期较低,呈逐渐升高趋势,在子实体成熟阶段达到高峰。其中,0.1T和0.25T!次处理的纤维素酶活性明显强于其它处理。由表4可见,杏鲍菇半纤维素酶活性各处理同差异极显著,不同培养阶段差异亦极显著。
表3杏鲍菇在不同处理下不同培养阶段的半纤维素酶活性吸光度OD值“。
。。0.IT处0.1T循0.25T处0.25T循0.41l处0.4T循自来水理1次环lOmin理1次环lOmin理1次环IOmin对照菌丝半袋0.090
0.0490.1020.1050.0660.0900.061
菌丝满袋0.2050.1150.1930.1630.1220.1780.110
原基出现0.2440.156
0.2320.1950.1730.2050.161
幼菇期0.2950.1900.3070.2380.2050.2460.202子实体成熟0.368
0.251
0.380
0.290
0.280
0.329
0.259
表4杏鲍菇在不同处理下不同培养阶段的半纤维素酶活性方差分析差异源
ss

Ms
,c
不同时期0.207036
0.051759211.31492.49×10一埔2.776289不同处理0.0419330.(;0698928.53339
8.54
x10一m
2.508189

差0.005879
240.000
245

计0.254848
34
2.3不同磁处理水对淀粉酶活性的影响
淀粉酶是降解淀粉的重要催化剂,淀粉在淀粉酶的作用下降解为低聚糖,可直接为菌丝吸收。淀粉酶活力的大小与菌丝前期的生长速度有着密切的关系。
由表5可见,在7种处理下杏鲍菇菌株淀粉酶活性变化规律一致:在培养初期淀粉酶活性明显上升,到满袋阶段酶活性达到高峰,而后不断下降。淀粉酶活性在整个营养生长阶段普遍高于生殖生长阶段。在菌丝生长前期,淀粉酶活性高,生长速度快,这是由于在培养初期培养料内含有丰富的淀粉类物质,杏鲍菇优先大量分解基质中的这类物质以提供菌丝体生长所需碳源和能量。在7种处理中,0.1T1次处理的淀粉酶活性最高。由表6可见,杏鲍菇淀粉酶活性各处理问差异极显著,不同培养阶段差异亦极显著。
表5杏鲍菇在不同处理下不同培养阶段的淀粉酶活性吸光度OD值

“。0.IT处0.IT循0.25T处0.251"循0.4T处0.4T循自来水
理1次环lOmin理1次环lOmin理1次环lOmin对照
菌丝半袋0.151
0.1230.1690.1530.1420.1200.127
菌丝满袋0.2650.189O.2510.2130.2220.1780.200
原基出现0.1590.1140.1670.1510.13l0.113O.117
幼菇期0.114
0.085
0.128
0.095
0.111
0.091
0.1∞
王苤碴堕墨!:!塑!:塑!:!塑!:堂!:!堕!:!墅!:丝
表6杏鲍菇在不同处理下不同培养阶段的淀粉酶活性测定结果方差分析
2.4不问磁处理水对漆酶活性的影响
漆酶是木质素等大分子物质降解有关的主要酚氧化酶,它能催化木质素芳香族化合物的分解,为菌丝生长提供营养。
 
方数据胞外漆酶活性越高,菌株分解木质素能力就越强,酶的代谢产物醌的含量也就越多,可以增加菌株的抗病能力,增加对于杂菌的抑制能力。
由表7可见,7种不同处理中漆酶活性变化规律一致。漆酶活性在杏鲍菇培养初期较低,逐渐升高,在原基形成时达到高峰,之后逐渐下降。0.1T1次和0.25T1次处理的漆酶活性均强于其他培养基。漆酶的酶活性变化规律说明,杏鲍菇在菌丝营养生长期利用木质素成分较少,在生殖生长期对木质素的降解利用较多。由表8可见,杏鲍菇漆酶活性各处理间差异极显著,不同培养阶段差异亦极显著。
表7杏鲍菇在不同处理下不同培养阶段的漆酶活性吸光度OD值

。。0.11"处0.1T循0.25T处0.25T循0.41'处0.4T循
自来水理1次环lOmin理1次环lOmin理1次环lOmin
对照
菌蝗半袋
0.0980.064
0.1410.1240.116O.0790.098菌丝满袋0.2160.1340.1770.1980.17_70.1520.140原蕈出现0.4290.2770.4090.3450.3630.3200.290幼菇期0.384
0.259
0.387
0.305
0.326
0.284
0.268
±塞!生堕塾!::翌.!:!堡.!:j!!!:型!:!塑!:!!!!:!!!
表8杏鲍菇在不同处理下不同培养阶段的漆酶活性测定结果方差分析
2.5不同磁处理水对杏鲍菇子实体营养品质和产量的影响从表9可见,磁处理水栽培的杏鲍菇子实体蛋白质质量分数和平均单袋产量比自来水对照均有不同程度的提高,其中0.1T1次处理的效果最为明显,其次为0.25T1次处理;其他处理效果不明显。灰分、粗脂肪及粗纤维各处理间无明显变化规律。
表9不同磁处理水处理下杏鲍菇子实体营养品质和产量的测定结果子实体(1:品)营养成分质毓分数/%处理
平均单袋灰分
蛋白质
粗脂肪粗纤维
产量/g
O.1T处理1次
5.12
16.05
2.2l
6.352270.1T循环10min
4.8715.022.196.322090.25T处理1次
5.1515.922.176.292230.25T循环10min
4.8614.662.146.271990.4T处理1次4.61
14.982.096.332050.4T循环10rain
4.9314.852.166.28
207白来水对照4.59
14.87
2.15
6.26
207
本研究结果表明应用磁处理水培养杏鲍菇可提高杏鲍菇胞外酶活性和营养品质。其中最佳磁处理水条件为场强菇胞外酶活性均明显增强。其中纤维素酶活性分别比自来水对照提高47.8l%和40.94%;半纤维酶活性分别比对照提高养成分质量分数和产量也有所提高,0.1T处理1次与0.25T处理1次的产量分别比自来水对照提高9.66%和7.73%。
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3结论
0.1T处理1次,其次为0.25T处理1次,这两种处理的杏鲍42.08%和46.72%;淀粉酶活性分别比对照提高32.50%和25.50%;漆酶活性分别比对照提高85.63%和80.46%。营
东北林业大学学报
血管环收缩作用,与Control组相比差异有显著性P<O.Ol。
表5
RWE对CaCl2量效曲线的影响
收缩率/%
Caol2浓度/mmol・L一1
对照
RWE
第37卷
K+通道在调节血管平滑肌舒缩及血管张力中亦具有重要作用。激活血管平滑肌上的K+通道,往往引起细胞膜超极化,从而抑制细胞外钙内流,引起血管舒张一1。血管平滑肌上主要存在4种K+通道:A,I’P敏感K+通道(KATP),Ca2+激活的K+通道(K“),电压敏感型K+通道(K,)及内向整流型K+通道(KIR),glybenclamide为KATP非特异性抑制剂,BaCl2为K讯抑制剂,TEA和4一AP分别是KcI和K,抑制剂¨…。本研究显示,用TEA。4一AP孵育后,RWE引起的舒张血管作用明显减弱,提示Ca“激活的K+通道(Kc-)和电压敏感型K+通道(K,)参与了RWE的舒张血管作用。
通过本次实验,我们对满山红水提物舒张血管的机制有了初步了解,证实满山红能够浓度依赖性的舒张血管,舒张作用部分与抑制细胞内ca“浓度升高有关,这一机制的发现对满山红在心血管系统的药理作用的进一步开发,找到其新的药用价值,有很重要的指导意义。
3讨论
RWE可以浓度依赖性的舒张PE及KCl引起的内皮完整和去内皮的血管收缩,说明RWE具有显著的舒张血管作用且这种作用不仅作用于血管内皮而且也作用于血管平滑肌,通过双重机制发挥药理作用。
血管内皮细胞通过一氧化氮合酶(nitric
oxidesynthase,
NOS)催化L一精氨酸与氧结合后释放NO。NO通过激活鸟苷酸环化酶,使cGMP含量升高,细胞内钙水平降低,促使肌球蛋白轻链脱磷酸化,平滑肌松弛,血管舒张”J。在本实验中,我们使用了内皮完整和去除内皮的血管环,虽然RWE对二者都存在舒张作用,但二者的舒张强度具有显著性差异。RWE在内皮完整的血管环上的舒张强度明显高于在去除内皮的血管环上的舒张强度。在内皮完整的血管环上,使用一氧化氮合酶阻断剂L—NAME预处理后,RWE的舒张强度明显降低。因此我们推测RWE能够激发内皮细胞释放NO,从而舒张血管。
PE诱导的血管收缩是由仅l一肾上腺素受体的激活造成的,主要是通过激活磷脂酶C,产生甘油二酯(diacylglyceroDG)和三磷酸肌醇(1,4,52t以激活蛋白激酶c(protein
riphos2phateinositokinase
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guinea
PDC,引起细胞外钙内流;激活ROC,引起细胞外钙内流和细胞内钙释放,使胞浆内游离Ca“升高,使血管平滑肌收缩旧J。KCI诱导的血管收缩,其机制主要是使PDC开放,细胞外钙离子内流,从而增加细胞内钙离子的浓度。在本实验中,用RWE孵育后可以使CaCl,的量效曲线下移并且阻断了PE在无钙液中诱导的血管收缩证实了RWE可以抑制外钙内流和内钙释放,从而抑制细胞内ca“浓度的升高,使血管舒张。(上接60页)
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本文来源:https://www.2haoxitong.net/k/doc/cdb47871a417866fb84a8e98.html

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