DOPC囊泡储备液的制备
1. 取浓度为25g/L的DOPC氯仿溶液0.2mL于圆底烧瓶中,用较缓慢的氮气流干燥吹干;(25mg/mL)(称取5-10mg)
2. 在瓶底会形成薄的DOPC磷脂膜,为了去除DOPC中剩余的氯仿,将瓶放于真空干燥器至少4h;
3. HEPES缓冲液:10mM HEPES、150mM NaCl、4.8mM NaOH
100mL: HEPES 238.3 mg
NaCl 877.5 mg
NaOH 19.2 mg
用pH试纸测缓冲液pH
4. 加入5mL HEPES缓冲液到瓶中,磁力搅拌30min;(1mg/mL)
5. 清洗脂质挤出器,使DOPC悬浮液通过聚碳酸酯膜孔径(50nm),产生单层DOPC囊泡,测粒径。制备的囊泡储备液储存在密封室(氮气)4摄氏度,制备后4天内使用;
6. 清洗QCM-D芯片等;
7. QCM-D 按顺序将5mL HEPES缓冲液--- 5mL 0.07g/L DOPC囊泡(稀释:取1mg/mL 1mL+13.28 mL HEPES涡旋混匀)---5mL HEPES缓冲液
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