土壤有效磷测定

碳酸氢钠提取——钼锑抗比色法（Olsen法）

1 方法提要

碳酸氢钠溶液除可提取水溶性磷外，也可以抑制Ca2+的活性，使一定量活性较大的Ca-P盐类中的磷被浸出，也可使一定量活性Fe-P和Al-P盐类中的磷通过水解作用而浸出。由于浸出液中Ca、Fe、Al浓度较低，不会产生磷的再沉淀。浸提液中的磷可用钼锑抗比色法定量测定。土壤浸出的磷量与土液比、液温、振荡时间及方式有关。本法严格规定土液比为1：20，浸提液温度为25℃±1℃，振荡提取时间为30min。

2 适用范围

本方法适用于石灰性土壤有效磷含量的测定；中性土壤及水稻土也可参照使用。

3 主要仪器设备

3.1分光光度计或紫外－可见分光光度计；

3.2恒温（25C 1C）往复式或旋转式振荡机，或普通振荡机及恒温室，满足180r/min±20r/min的振荡频率或达到相同效果；

3.3塑料瓶，200mL；

3.4无磷滤纸。

4 试剂

4.1 无磷活性碳粉：如所用活性碳含磷，应先用1：1盐酸溶液浸泡24h，然后移至平板漏斗抽气过滤，用水淋洗到无Cl-为止（约4～5次），再用碳酸氢钠浸提剂浸泡24h，在平板漏斗上抽气过滤，用水洗尽碳酸氢钠，并至无磷为止，烘干备用；

4.2 氢氧化钠溶液［ρ(NaOH)=100g·L-1］：称取10g氢氧化钠溶于100mL水中；

4.3 碳酸氢钠浸提剂［ρ(NaHCO3)=0.50mol·L-1，pH=8.5］称取42.0g碳酸氢钠（NaHCO3）溶于约950mL水中，用100g·L-1氢氧化钠溶液调节pH至8.5(用酸度计测定)，用水稀释至1L。贮存于聚乙烯瓶或玻璃瓶中备用。如贮存期超过20d，使用时须重新校正pH；

4.4 酒石酸锑钾溶液［ρ（K(SbO)C4H4O6·H2O）＝3g·L-1］：称取0.5g酒石酸锑钾溶于水中，稀释至100mL；

4.5 钼锑贮备液：称取10.0g钼酸铵［(NH4)6Mo7O24·4H2O］溶于300mL约60℃水中，冷却。另取208mL浓硫酸缓缓注入800mL水中，搅匀，冷却。然后将稀硫酸注入钼酸铵溶液中，搅匀，冷却。再加入100mL 5g·L-1酒石酸锑钾溶液，最后用水稀释至2L，盛于棕色瓶中备用；

4.6 钼锑抗显色剂：称取0.5g抗坏血酸(C6H8O6左旋，旋光度+21～22°)溶于100mL钼锑贮备液中。此溶液有效期不长，应用时现配；

4.7 磷标准贮备液[ρ（P）=100μg·mL-1]：称取经105℃下烘干2h的磷酸二氢钾（优级纯）0.4390g，用水溶解后，加入5mL浓硫酸，然后加水定容至1000mL。该溶液放入冰箱可供长期使用；

4.8磷标准溶液[ρ（P）=5μg·mL-1]：吸取5.00mL磷标准贮备液于100mL容量瓶中，定容。该溶液用时现配。

5 分析步骤

称取通过2mm孔径筛的风干试样2.50g，置于200mL塑料瓶中，加入约1g无磷活性炭，加入25℃±1℃的碳酸氢钠浸提剂50.0mL，摇匀，在25℃±1℃温度下，于振荡器上用180r/min±20r/min的频率振荡30 min±1min，立即用无磷滤纸过滤于干燥的150mL三角瓶中。同时做空白试验。

吸取滤液10.00mL于25mL比色管中，缓慢加入显色剂5.00mL，慢慢摇动，排出CO2后加水定容至刻度，充分摇匀。在室温高于20℃处放置30min，用1cm光径比色皿在波长700nm处比色，测量吸光度。

校准曲线绘制：吸取磷标准溶液［ρ(P)=5μg·mL-1］0，0.50，1.00，1.50，2.00，2.50，3.00mL于25mL比色管中，加入空白试液10.00mL，显色剂5mL，慢慢摇动，排出CO2后加水定容至刻度。此标准系列溶液中磷的浓度依次为0.00，0.10，0.20，0.30，0.40，0.50，0.60μg·mL-1。在室温高于20℃处放置30min后，按上述样品待测液分析步骤、条件，用标准系列溶液的零浓度调节仪器零点进行比色，测量吸光值，绘制校准曲线或计算回归方程。

6 结果计算

有效磷（P），mg·kg-1＝

式中：

ρ——查校准曲线或求回归方程而得测定液中P的质量浓度，μg·mL-1；

V ——显色液体积，25mL；

D ——分取倍数，即试样提取液体积/显色时分取体积，本试验为50/10；

103和1000——分别将μg换算成mg和将g换算为kg；

m ——风干试样质量，g。

平行测定结果以算术平均值表示，保留小数点后一位。

7 精密度

平行测定结果的允许误差

8 注释

1）测定时也可采用紫外－可见分光光度计于波长880nm处比色，由于此波长处浸出的有机质已基本无吸收，浸提时可不加活性碳脱色。

2）如果土壤有效磷含量较高，应减少浸提液的吸样量，并加浸提剂补足至10.00mL后显色，以保持显色时溶液的酸度。计算时按所取浸提液的分取倍数计算。

3）10mL NaHCO3浸提滤液加入钼锑抗试剂后，即产生大量的CO2气体，由于容器瓶口较小，CO2不易逸出，易造成试液外溢。实际操作过程中也可采用将10.00mLNaHCO3浸提滤液、5.00mL钼锑抗试剂和10.00mL水均准确加入50mL三角瓶中，无需再定容进行显色的方式操作。

4）用NaHCO3溶液浸提有效磷时，温度影响较大，应严格控制浸提温度。

5）土样经风干和贮存后，测定的有效磷含量可能稍有改变，但一般无大影响。

本文来源：https://www.2haoxitong.net/k/doc/bf0dce325f0e7cd184253644.html