多（总）酚含量测定法（Folin-Ciocalteu试剂法）
李熙灿/Xican Li
（广州中医药大学）
[文献] Xican Li, Jing Lin, Yaoxiang Gao, Weijuang Han, Dongfeng Chen. Antioxidant activity and mechanism of Rhizoma Cimicifugae. Chemistry Central Journal. 2012; 6(1):140.
操作图解
[溶液配制]
1 Folin-Ciocalteu试剂(0.25mol/L)的配制
取2mol/L Folin-Ciocalteu试剂1mL，加蒸馏水7mL，充分混合，得0.25mol/L的Folin-Ciocalteu试剂,共8mL。
2 15%Na2CO3溶液（W/V）的配制
取Na2CO3•10H2O溶3.0g，溶于20mL水中，混匀即得。
3 标准溶液的配制（以连苯三酚为例）
精确称取连苯三酚标准品10mg．用水溶解并定容到50mL，得0.2mg/mL的对照品标准溶液。
4 连苯三酚标准曲线的绘制
A = 32.16733*C + 0.06012, R=0.998
线性范围：连苯三酚0.00-0.06mg/mL，A值在0.039-1.928之间。
5 样品溶液的配制
样品母液（1mg/mL）：精确称取样品2mg，用95乙醇溶解并定容到2mL，得1mg/mL样品母液。
如怀疑样品自身有吸收，可加做空白对照组。用0.5mL95乙醇代替0.5mLFolin-Ciocalteu试剂+即可，注意观察A值大小。
6 多酚含量的计算
依上述公式A = 32.16733*C + 0.06012, 由A值即可求得浓度C值。
7 说明
7.1 不同的分光光度计所测得的A值可能不一样，所以，同一次实验要用同一台分光光度计；
7.2 Folin-Ciocalteu试剂：可向试剂公司购买，一般其浓度为2 M，使用前最好稀释。也可以自配方法如下：将100g钨酸钠(Na2WO4 ·2H2O), 25g钼酸钠( Na2MoO4·2H2O) ,700 mL蒸馏水，50 mL 85%磷酸及100 mL浓盐酸装入带回流装置的2000mL圆底烧瓶中，充分混合，文火缓慢回流10h,在加入150g硫酸锂(Li2SO4),50 mL蒸馏水及数滴液溴，然后将烧瓶内溶液开口煮15min，以驱除过量的溴，冷至室温后用容量瓶定容至1000mL，过滤。滤液呈微绿色。置于冰箱中长期冷藏备用临用时稀释。（钨酸钠、钼酸钠、硫酸锂，都比较贵)
本文来源：https://www.2haoxitong.net/k/doc/9aa058c7a58da0116c1749a8.html
文档为doc格式