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2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体
一,学习目标
1.掌握动物细胞融合技术及应用。(重点)
2.简述单克隆抗体的制备。(重、难点)
二,自主学习
1.概念:动物细胞融合也称______,是指________________动物细胞结合形成____________的过程。
2.原理:____________。
3.诱导融合的三种方法
(1)物理法:例如______等。
(2)化学法:例如______。
(3)生物法:例如____________。
4.过程:不同______的两个细胞______融合―→______融合→______分裂→两个完整的杂交细胞。
5.意义:突破了有性杂交方法的局限,使____________成为可能。
1.传统抗体的制备
(1)方法
(2)缺点:产量低、______低、______差。
2.单克隆抗体的制备
(2)解决思路:将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合为__________。
(3)制备过程:制备产生特异性抗体的B淋巴细胞:向
免疫小鼠体内注射特定的__________,然
后从小鼠__________内获得相应的B淋巴
细胞
获得杂交瘤细胞
_____培养和_____检测
将杂交瘤细胞在_____培养或注射到__________内增殖
提取单克隆抗体:从__________或小鼠_____中提取
(4)单克隆抗体的特点:__________强、__________高,并可大量制备。
三,合作探究
探讨:动物细胞融合与植物原生质体融合所依据的原理是什么?
探讨:动物细胞完成融合的标志是什么?
探讨:比较动物细胞融合与植物体细胞杂交所用的促融方法的异同。
探讨4:仔细观察教材P53图224,探讨下列问题:
(1)制备单克隆抗体过程中的几种细胞有何特点?
(2)单克隆抗体制备过程中有两次筛选,其目的分别是什么?
探讨5:用单克隆抗体及相关物质制成的“生物导弹”中真正起治疗作用的物质是什么?是单克隆抗体吗?
探讨6:若不采用动物细胞融合的方法,能否生产出单克隆抗体?试简要说明。
习题巩固
1.动物细胞融合和植物原生质体融合相比较,特殊性表现在( )
A.融合的原因 B.融合的优点
C.融合的诱导手段 D.融合的过程
2.下图是单克隆抗体制备过程示意图,其中①过程注射的物质和A细胞的名称分别是( )
A.抗体、T淋巴细胞
B.抗原、T淋巴细胞
C.抗体、B淋巴细胞
D.抗原、B淋巴细胞
3.下列关于动物细胞融合的说法,错误的是( )
A.动物细胞融合也称细胞杂交,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程
B.动物细胞融合需要用纤维素酶处理
C.动物细胞融合时需要人工诱导
D.常用的诱导动物细胞融合的因素有:聚乙二醇、灭活的病毒、电激等
4.关于单克隆抗体制备过程的叙述,正确的是( )
A.可直接从动物体内获取B淋巴细胞进行培养
B.杂交瘤细胞具有B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的双重特点
C.用灭活病毒诱导融合后形成的融合细胞即可产生单克隆抗体
D.经选择培养基筛选出来的杂交瘤细胞即可用于单克隆抗体的生产
5.(2016·扬州高二质检)利用细胞工程方法,以埃博拉病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列有关单克隆抗体的叙述,正确的是( )
A.用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内,产生的血清抗体为单克隆抗体
B.体外培养单个浆细胞可以获得大量针对埃博拉病毒的单克隆抗体
C.将等量浆细胞和骨髓瘤细胞混合,经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞
D.利用该单克隆抗体与埃博拉病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出埃博拉病毒感染者
6.列关于细胞工程的叙述,错误的是( )
A.电刺激或聚乙二醇均可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合
B.去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理
C.小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可形成杂交瘤细胞
D.某种植物甲、乙两品种的体细胞杂交后代与甲、乙两品种杂交后代的染色体数目相同
7.下列关于单克隆抗体制备过程的叙述,正确的是( )
【导学号:72240026】
A.制备过程中不需要动物细胞培养技术
B.杂交瘤细胞具有浆细胞与癌细胞的所有特点
C.经选择性培养基筛选出来的杂交瘤细胞即可用于单克隆抗体的生产
D.单克隆抗体制备过程中的细胞两两融合可得到三种融合细胞
8.单克隆抗体技术在疾病诊断和治疗以及生命科学研究中具有广泛的应用。下列关于单克隆抗体的叙述,错误的是( )
A.特异性强、灵敏度高
B.与抗癌药物结合可制成“生物导弹”
C.体外培养B淋巴细胞可大量分泌单克隆抗体
D.由效应B细胞与骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞分泌
9.下图表示用生物工程制备人抗A抗体的过程。请回答下列问题。
(1)人的红细胞膜表面有被称为凝集原的特异________;从免疫学角度看,这种凝集原是________。
(2)图中细胞1是小鼠体内注入人A型血红细胞后而获得的________细胞,这种细胞具有产生___________________________________________________
________的特点,但难以在体外培养。甲培养皿中培养的细胞2是从患骨髓瘤的小鼠体内获取的骨髓瘤细胞,这种细胞在体外培养时能____________,但不会产生抗体。
(3)为了能充分发挥上述两种细胞各自的特点,经特殊处理,在促细胞融合因子的作用下,使两种细胞发生融合,形成图中的细胞3,这种细胞称为____________。把它在乙培养皿中进行培养,则能产生大量的细胞群,这种方法称为________。
(4)过程①的主要目的是____________________________________。通过过程②或③的培养方法能产生大量__________抗体。
10.请回答以下与抗X单克隆抗体的制备相关的问题:
(1)首先将________注入小鼠体内,从小鼠脾脏中获得免疫细胞,其中至少有一种________(填细胞名称)能分泌抗该抗原的抗体。
(2)动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用的诱导剂外,还可以采用_______________________________________________________________。
(3)动物细胞培养液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素等,与植物细胞培养基相比,二者的区别是____________________________________
________________________________________________________________。
(4)在动物细胞融合过程中,需要将所选取的组织细胞离散开,以利于细胞融合,可用______________或____________处理离体组织细胞使之分散开。
(5)____________技术是单克隆抗体技术的基础。
(6)杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是________________。
本文来源:https://www.2haoxitong.net/k/doc/68fe13db988fcc22bcd126fff705cc1754275f5c.html
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