月季的植物组织培养综述

发布时间：2017-03-24 12:15:08 来源：文档文库

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月季的植物组织培养综述

摘要：

随着生物技术的迅猛发展，植物组织培养和细胞培养等现代生物技术得到普遍重视和应用，为月季的快繁和新品种的选育提供了新的途径，在月季的改良上显示了很大的应用潜力。以月季为试材进行组培试验,综述了月季组织培养、快繁的研究技术及进展，并对月季组培的最优条件进行了总结。本研究探索出的月季组培快速繁殖技术，在试管苗单芽诱导丛生苗、利用代用品培养降低组培成本、试管苗管外扦插生根、试管苗微型化长途运输等方面，较前人有所改进。

月季为蔷薇科蔷薇属木本植物, 其花姿优美，花型丰富，花色齐备, 树型易修剪，栽培难度小;其花型大，美丽，幽雅，高贵。月季通常采用扦插、嫁接和压条繁殖，但是一些名贵品种扦插不易生根，主要靠芽接繁殖，而芽接速度慢，因而造成优良品种的月季苗供不应求。

前言：

为了进行月季组织培养实验，我们查阅了相关文献，从多个方面了解影响月季组织培养的因素，如外植体的取材部位、时间、大小、消毒、接种方式、不同阶段激素的配比、培养基成分、培养条件等，以期在实验中调控月季组培的环境，确保实验顺利进行。同时探究由愈伤组织诱导出芽及生根所需的最佳浓度配比。并在月季组织培养过程中，掌握外植体消毒方面要注意的事项，整个培养过程中培养条件的选取与控制，同时探究由愈伤组织诱导出芽及生根所需的最佳浓度配比。并在月季组织培养过程中，掌握外植体消毒方面要注意的事项，

整个培养过程中培养条件的选取与控制，实验过程中出现的现象的观察记录以及分析，在这个过程中不断加强理论与实践的联系，深化对理论知识的理解。察记录以及分析，在这个过程中不断加强理论与实践的联系，深化对理论知识的理解。

关键词：月季、MS培养基、激素等。

综述：

培养基

基本培养基

众多培养基中以MS 培养基的效果为最好，广泛用于月季的离体快速繁殖中。对MS 培养基的成分及物理性能进行合理的选择会提高月季组织培养的成功率。

诱导培养基以MS为基本培养基，附加适量的细胞分裂素 6 一苄氨基嘌呤( 6 - BA) 和生长素萘乙 D 6 7 B 0 2) 酸 ( NAA) 。

激素

不同激素对诱导愈伤组织的影响诱导培养基以ＭＳ为基本培养基，附加适量的细胞分裂素和生长素。生长素增加至0.1mg/L时，细胞分裂素浓度的高与低已对增殖系数不产生明显影响。最适的侧芽诱导培养基为MS+细胞分裂素0.5-3.0mg/L和生长素0.01-1.00mg/L，且培养基中添加蔗糖有增加丛生芽数量的作用。

不同生长素种类和浓度对月季生根和移栽成活率的影响。用NAA 诱导生根和提高移栽成活率效果最好，浓度为100ppm 为宜，现在IAA 诱导生根和高移栽成活率效果并不理想，其浓度只能在1mg/L 以下,超过时对生根的促进作用已不显著,反而大幅度降低移栽成活率。NAA和IBA对月季的诱导生根都有较好的效果,在1/2MS培养基附加NAA或IBA0.1-1.5mg/kg均可诱导不定根的产生,生根63.3%-93.3%。

糖浓度的影响

不同类型的月季，其组培需求的碳源和糖浓度有所不同。月季组培最常用的碳源是蔗糖，在丰花月季的组织培养中，初代培养的蔗糖含量为5%，继代培养的蔗糖含量为3%时培养效果最好。

无机盐

试验证明，全量的MS无机盐对茎增殖效果最好。无机盐浓度和含糖量对月季生根的影响。采用较低浓度的无机盐对月季生根效果较好。但糖浓度不可降低。否则削弱苗的生长势，试验证明，1/2MS+30g/l蔗糖利于生根。

MS 培养基中的氮盐含量是影响月季生根的主要因素，把MS 培养基中氮素含量从60mmol/l减少到7.5mmol/L（相当于1/8MS 中的氮素含量）时，嫩茎生根效果良好，保持7.5mmol/L的氮素含量，MS 培养基中其它无机盐的浓度减少到原配方的1/16，对生根没有影响；但氮素含量过高会引起月季组培苗的生根不适。

琼脂

培养基中的固化支持物，并非完全不起作用的物质，它含有能影响外植体的物质，培养基中大约有十分之九的固化支持物是琼脂，月季组织培养中，琼脂的种类和产品质量的差异会影响芽的发育与增殖月季的侧芽在纯净的琼脂上发育较好。

6、培养条件（温度、光照、PH、无机盐）

诱导和继代培养均在黑暗条件下进行，培养温度为25Ċ，3-4周更换一次培养基。3次重复。

培养温度21℃最好最高不超过25℃，有昼夜温差，生根阶段对温度变化非常敏感，生根温度保持在21度左右，光照10-12h/d，光强800-1200LX。

结果发现,在不同的温度下其生长情况有很大的差异。在21℃时嫩茎生根数目最多,而且嫩茎生根的百分率也最高,然而在温度低于或高于21℃时,嫩茎生根数目均较21℃时减少,同时嫩茎生根的百分率降低,呈现出一个明显的生根数量变化趋势。

防褐化

外源激素2mg/L 6-BA易引发褐变，应用时可考虑少量添加。2mg/L Kt和2mg/L NAA对组织褐变影响不大，考虑使用；使用乙醇消毒剂时，对外植体泡的时间不能过长，建议以5-10为佳；全光照条件培养容易诱发褐变。外植体的大小对褐变的发生及褐变程度有一定影响。外植体越小,切面与体积的比率越大，伤害及褐化的程度就越大;相对大的材料褐变的程度较轻.除了机械伤害外，接种时各种化学消毒剂对外植体的伤害也会引起褐变，酒精消毒效果较好，但对外植体伤害很重;升汞对外植体伤害比较轻。一般来讲，外植体消毒时间越长，消毒效果就越好。

外植体

取材

①取材部位

外植体一般选取生长健壮的当年枝条的饱满而外萌发的侧芽，剪取腋芽尚未萌发的枝条，去除茎段两端各2毫米选芽以茎段中芽为最好，因为接种后，中段芽第5 天左右就能萌发，而基部和稍部的芽往往迟至15 天才萌发。

②取材时间

外植体的取材部位对芽的萌发也有影响。外植体的取材时间及培养所需时间对月季嫩茎的发育和增殖也有影响。对于月季而言，选取外植体的最佳时间是冬季。

③取材大小

取无菌苗叶片切成0.5cm×0.5cm的小块，叶柄，茎段切成小段。外植体很小时，有利于培养脱毒的植株．对月季的杉树坏疽环斑病毒可通过茎尖培养的方式达到脱毒的目的，如果单纯为了快速繁殖，可用大的茎尖或茎段进行离体培养，这时外植体的大小决定了茎尖的成活比例。一般说外植体愈大，成活率愈高，成苗时间愈短。外植体的大小同时影响外植体自身的发育和月季组培苗茎的增殖，外植体的长度在9.0-10.0mm，直径在3.0-3.5mm范围时．茎的增殖和发育是最好的。

2.消毒

接种材料为当年抽生侧芽饱满的幼嫩茎段，自来水冲洗10-20min；75%或70%乙醇表面消毒15s。用无菌水冲洗3次。2%NaClO灭菌5—10min。然后用无菌水冲洗3次。