蛋白质的等电点测定与沉淀实验

发布时间：2020-10-01 01:03:18 来源：文档文库

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实验项目一、蛋白质的等电点测定及沉淀反应

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第三部分：实验记录与分析

实验现象记录及分析：

（一）蛋白质等电点测定

管号	pH值	混浊度	解释现象
1	5.9	——	未达到蛋白质的等电点，蛋白质颗粒上正负电荷过少。
2	5.5	++	接近蛋白质的等电点，蛋白质颗粒上正电荷不多，沉淀减少。
3	4.7	+++	达到蛋白质的等电点，蛋白质颗粒上正负电荷的数目相等蛋白质颗粒因失去电荷和脱水而沉淀。
4	3.5	+	大于蛋白质的等电点，蛋白质颗粒上正电荷大于负电荷，产生较少沉淀。

（二）蛋白质的盐析

1蛋白质的盐析

现象

解释

蛋白质溶液中

加硫酸铵溶液

有沉淀产生

无机盐（硫酸铵、硫酸钠、氯化钠等）的浓溶液能析出蛋白质。盐的浓度不同，析出的蛋白质也不同。

沉淀中加水	沉淀溶解	由盐析获得的蛋白质沉淀，当降低其盐类浓度时，又能再溶解，蛋白质的盐析作用是可逆的。
上清液中加硫酸铵粉末	有沉淀产生	硫酸铵粉末是强电解质，引起蛋白质胶体的凝聚沉淀。
沉淀中加水	沉淀不溶解	此时蛋白质分子内部结构发生重大改变，蛋白质常变性而沉淀，不再溶于水。

2.重金属离子沉淀蛋白质

	现象	解释
蛋白质溶液中加硝酸银	有沉淀产生	重金属离子与蛋白质结合成不溶于水的复合物。
沉淀中加水	沉淀不溶解	此时蛋白质分子内部结构发生重大改变，蛋白质常变性而沉淀，不再溶于水。

3.有机酸沉淀蛋白质

	现象	解释
蛋白质溶液中加三氯乙酸	有沉淀产生	有机酸使蛋白质变性而沉淀。
沉淀中加水	沉淀不溶解	此时蛋白质分子内部结构发生重大改变，蛋白质常变性而沉淀，不再溶于水。

4.有机溶剂沉淀蛋白质

现象

解释

有沉淀产生

此时蛋白质分子内部结构发生重大改变，蛋白质常

变性而沉淀。

5.乙醇引起的变性与沉淀

管号	操作	现象	解释
1	振荡混匀	有沉淀产生	乙醇能析出蛋白质。
1	加数滴盐酸	沉淀溶解	此时蛋白质分子的结构尚未发生显者变化，除去引起沉淀的因素后，蛋白质仍能溶解于水，并保持其天然性质而不变性。
2	振荡混匀	没有明显现象	溶液呈碱性，偏离等电点。
	醋酸中和	有沉淀产生，溶液变为黄色	醋酸与氢氧化钠反应，生成醋酸钠，达到等电点，甲基红使溶液呈黄色
	加数滴盐酸	沉淀溶解，溶液颜色变浅	盐酸中和氢氧化钠，使溶液呈中性。
3	振荡混匀	没有明显现象	溶液呈酸性，未达到等电点。
3	碳酸钠中和	有沉淀产生，溶液变	蛋白质与溶液中的离子反应
		为红色	产生沉淀，溶液呈酸性所以显红色。
	加数滴盐酸	沉淀溶解，溶液颜色变浅	未达到蛋白质的等电点，沉淀溶解。