第二部分 酶的应用 实验6 α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测
一、酶与固定化酶
1．酶：活细胞产生的具有催化作用的一类有机物，它是生物体内各种化学反应的催化剂。
2．固定化酶：将________的酶用________或________方法________，使之成为________而又有________。
3．将酶改造成固定化酶的原因是：
由于酶________，且不利于________，所以要将酶改造成固定化酶。
4．酶固定化的方法有：
________法、________法、________法和________法等。本实验用的是________法。
5．固定化酶作用的机理：
将固定化酶________，当________时，在________的作用下________。
答案：2.水溶性 物理 化学 固定在某种介质上 不溶于水 酶活性的制剂
3．在水溶液中很不稳定 工业化使用
4．吸附 共价偶联 交联 包埋 吸附
5．装柱 底物经过该柱 酶 转变为产物
二、淀粉水解的过程及其在淀粉指示剂下的颜色反应：
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答案：糊精 蓝 红 不显
三、α淀粉酶的固定化及淀粉水解作用检测的实验
1．实验目的：
(1)制备________。
(2)进行________的测试。
2．实验原理：
将________酶固定在________上，一定浓度的淀粉溶液经过________后，可使淀粉水解成________。用________测试，若流出物呈________色，表明有________生成。
3．本实验使用的酶及特性：
本实验使用的酶是________酶，其作用的最适宜pH为________，最适宜温度为________。
4．实验设备及用品：
5 mL塑料注射器、50 mL烧杯、滴管、自行车用气门芯及夹子、注射器架、试管或微量离心管3支。
5．实验材料及其制备：
(1)材料：固定化的α淀粉酶、可溶性淀粉酶、5 mol/L KI—I2溶液。
(2)部分材料的制备：
▲α淀粉酶的固定化：
▲可溶性淀粉溶液：取________mg可溶性淀粉溶于100 mL________中，搅拌均匀。
▲可溶性淀粉溶液：称取0.127 g________和0.83 g________。加蒸馏水100 mL，完全溶解后装入滴瓶中。
6．实验步骤：
(1)淀粉溶液流经固定化酶柱
将灌注了________的注射器放在注射器架上，用滴管加________溶液，使该溶液以________mL/min的流速过柱。
(2)接取流出物
待从固定化酶柱中流出________mL的溶液后，接收________mL流出液。
(3)流出物鉴定
在流出物中加入________溶液，观察颜色。用水稀释________倍后再观察颜色。
(4)洗涤、保存固定化酶柱。
实验后，用________倍柱体积的蒸馏水洗涤此柱。放置在________℃冰箱中保存。
(5)几天后取出冰箱中该固定化酶柱，重复实验，观察结果。
7．实验结果的比较：
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答案：1.(1)固定化α淀粉酶 (2)淀粉水解
2．α淀粉 石英砂 固定化酶柱 糊精 淀粉指示剂
红 糊精
3．枯草杆菌的α淀粉 5.5～7.5 50～75 ℃
5．实验材料及其制备：
(2)α淀粉酶 酶不纯 石英砂 气门芯 夹子 10
洗涤 未吸附的游离淀粉酶 50 热水 碘 碘化钾
6．(1)固定化酶 淀粉 0.3 (2) 5 0.5 (3)KII2
1 (4)10 4
7．蓝 红 红
本文来源：https://www.2haoxitong.net/k/doc/c9232cee7f21af45b307e87101f69e314332fabb.html
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