文档文库
手机版
投诉建议
热门搜索:
心得体会
演讲稿
思想汇报
首页
心得体会
学习心得体会
培训心得体会
军训心得体会
社会实践
作风建设
工作心得体会
教育心得体会
演讲稿
演讲稿格式
演讲稿范文
竞聘演讲稿
师德演讲稿
三分钟演讲稿
思想汇报
思想汇报范文
转正思想汇报
大学生思想汇报
季度思想汇报
教师思想汇报
工作计划
工作计划格式
工作计划开头
工作计划结尾
总结与计划
工作计划模板
工作总结
年终工作总结
年度工作总结
个人工作总结
实习报告
实习报告范文
实习计划范文
实习鉴定范文
实习报告内容
个人简历
求职简历
简历范文
简历模板
简历表格
简历格式
祝福语
春节
除夕
元宵
端午节
合同范文
合同范本
合同样本
合同范本格式
首页
>
内参抗体和WB实验的关系
内参抗体和WB实验的关系
发布时间: 来源:
文档文库
小
中
大
字号:
手机查看
>
>
>
>
进口内参抗体
——
在
WB
实验中为什么需要使用内参抗体?
>
>
>
>
>
要检测一个基因的表达产物是否正确,或者比较表达产物量的相对变化,首选方法是
WesternBlot
。虽然,顺利的时候
WesternBlot
做起
来很简单,可不顺的时候也很令人心烦
――
做不出结果啦、假阳性啦、结果出现多条带啦、到底是一抗有问题还是二抗有问题啦
……
毕竟,作为一
种有活性的生物大分子,抗体和抗原的反应毕竟不象
1+1
那么明确,而用这种不确定的试剂来测定同样知之甚少的表达产物,确实是有一定的不
确定性的。所以,严谨的
WesternBlot
实验设计中要求有良好的参照体系,对实验结果分析是非常有用的。
我们知道,
要用
WesternBlot
比较不同条件下或者不同组织中,
目的蛋白表达量的相对多少,
前提条件是等量的细胞上样,
才有比较的基础。
特别表达量不高时,上样量的差别就很可能影响结果的分析。艾美捷向您推荐使用内参抗体来检测您的实验系统,或者校准您的实验结果。内参即
是内部参照(
InternalControl
),对于哺乳动物细胞表达来说一般是指由管家基因编码表达的蛋白
(HousekeepingProteins
,它们在各组织
和细胞中的表达相对恒定,在检测蛋白的表达水平变化时常用它来做参照物。在
WesternBlotting
中使用内参其实就是在
WB
过程中的另外用内
参对应的抗体检测内参,这样在检测目的产物的同时可以检测内参的表达,由于内参在各组织和细胞中的表达相对恒定,借助检测每个样品内参的
量就可以用于校正上样误差,这样半定量的结果才更为可信。此外使用内参可以作为空白对照,检测蛋白转膜情况是否完全、整个
WesternBlot
显色或者发光体系是否正常。
实验结果分析其实很简单:如果样品蛋白量有限,只够进行一次电泳转膜实验时,分别检测样品的内参量和目的蛋白量。将各样品目的蛋白量
分别除以其内参含量,得到的数值即为内参校正后的各样品中目的蛋白相对含量,再用此数值进行样品间的比较和分析,得到目的蛋白含量在不同
样品间的实际变化结果。如果样品量充分,可以先检测内参,观测样品间内参显色条带是否一致,根据差异大小调整各样品的上样量重新进行
WesternBlotting
实验,至内参量一致为止;若内参一致,即可进行不同样品间目的蛋白表达变化分析。这样虽然麻烦一点,但是可以保证结果
更有说服力,更可信。毕竟我们的实验是一种严谨的工作。
常用的细胞总蛋白质内参有
GAPDH
(
glyceraldehyde-3-phosphatedehydrogenase
)和细胞骨架蛋白
beta-actin
或
beta-tubulin
,这
其中最近的国外文献报道中使用
GAPDH
内参的较多。对于一些植物的样本,则需要特别的植物
Actin
蛋白作为内参;同样的,如果提取的样本是
细胞核蛋白,那么
PCNA
或者组蛋白
H3
都是被经常使用的;而针对一些研究线粒体的客户,那么
CoxIV
则被较多的文献引用作为线粒体总蛋白
的内部参考。美国
Abbkine
品牌提供非常完整的内参产品解决方案,艾美捷公司向您推荐进口
Abbkine
全系列内参抗体产品,相关产品如下:
观察分子
内参抗体名称
Beta-ActinmAb(1C7
Beta-ActinmAb(1C7,HRP
GAPDHmAb(2B5
GAPDHmAb(2B5,HRP
Beta-TubulinemAb(3G6
PlantActinmAb(3T3
PCNAmAb(1D7
COXIVmAb(14Y2
HistoneH3mAb(2D10
>
>
>
>
内参类型
量
细胞总蛋白
细胞总蛋白
细胞总蛋白
细胞总蛋白
细胞总蛋白
植物细胞总蛋白
细胞核蛋白
细胞线粒体总蛋白
细胞核蛋白
42kD
42kD
36kD
36kD
55kD
42kD
28kD
16kD
18kD
Abbkine
Abbkine
Abbkine
Abbkine
Abbkine
Abbkine
Abbkine
Abbkine
Abbkine
A01010
A01015
A01020
A01025
A01030
A01050
A01040
A01060
A01070
小鼠源单克隆
品牌
货号
详情
小鼠源单克隆
,HRP
偶联
小鼠源单克隆
小鼠源单克隆
,HRP
偶联
小鼠源单克隆
小鼠源单克隆
小鼠源单克隆
小鼠源单克隆
小鼠源单克隆
>
>
>
>
美国
Abbkine
品牌是一家提供高性价比免疫学和细胞学科研产品及解决方案的品牌,艾美捷将其
引入中国,作为其中国区域代理,将为客户提供最具性价比的常规免疫学试剂,如各种标签抗体、内参抗
体、常规一抗以及全系列二抗,抗体检测底物以及相关试剂盒等。同时我们作为多家国际知名品牌的的中国代理或
区域代理,艾美捷能为您提供
系列的实验室解决方案。如果您对上述产品感兴趣,请到艾美捷科技有限公司垂询相关的产品信息及完整实验解决方案。
>
>
>
>
>
>
>
>
本文来源:
https://www.2haoxitong.net/k/doc/ad18c65f1711cc7931b71631.html
《内参抗体和WB实验的关系.doc》
将本文的Word文档下载到电脑,方便收藏和打印
推荐度:
点击下载文档
文档为doc格式
分享到:
相
关
案
例
一什么鱼塘量词
2024-04-26
小班综合:圆怪物
2024-04-26
苏联犹太人为何“偷听敌台”
2024-04-26
管理沟通中存在的问题
2024-04-26
一年级语文量词大全
2024-04-26
实习单位鉴定意见评语【三篇】
2024-04-26
正在进行安全检测...
2024-04-26
企业公司负责人在党员民主评议及-终总结的文稿
2024-04-26
一种从新鲜茶叶中提取茶氨酸的方法
2024-04-26
孕妇糖耐量减低怎么办
2024-04-26
相关推荐
1
琵琶行教案定
2
梨黑星病
3
结核病防治工作计划5篇
4
人类探测火星的历程
5
巧用气泡袋
6
巧用气泡袋
7
脱贫攻坚先进集体和先进个人评选表彰工作方案
8
科学家竺可桢资料介绍
9
服装电子商务创业计划书
10
小学生三年级理想目标演讲稿
推荐内容
道德讲堂《以和为贵-友善相待》教学导案
和名师对话
最新-升学祝福语100句
小班社会你好教案反思
英语四级词汇大全:医学类.doc
预备党员承诺书最新范文
人生的起跑线
盘点世界各国男性对生殖器官长的要求
部编版九年级语文上册读读写写注音及解释
幼儿园10月份工作计划(完整版)