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内参基因βActin简介
内参基因βActin简介
发布时间:1713922239 来源:
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内参基因
β
-Actin
简介
日期:
2012-05-03
来源:未知
作者:周慕云
点击:次
相关专题
PCR
内参:选还是不选
β
-Actin
内参即是内部参照,它们在各组织和细胞中的表达相对恒定,在检测基因的表达水平变化时常
用它来做参照物。常用的
PCR
内参有
GAPDH
、β
-
actin
、
18sRNA
、
28sRNA
、
B2M
、
ACTB
、
SDHA
、
HPRT1
、
ARBP
内参基因
等。
β
-Actin
简介
Actin
即“肌动蛋白”,是细胞的一种重要骨架蛋白。同时
Actin
在细胞分泌、吞噬、移动、
胞质流动和胞质分离等过程中起重要作用。
Actin
在不同物种之间高度保守,以至于很难获得较好
的针对
actin
的抗血清。
Actin
大致可分为六种,其中四种是不同肌肉组织特异性的,包括
α
-skeletal
muscle
actin
,α
-cardiac
muscle
actin
,α
-smooth
muscle
actin
,和
γ
-smooth
muscle
actin;
其余两种广泛分布于各种组织中,包括
β
-
actin(β
-non-muscle
和
γ
-non-muscle
actin
。不同的
actin
之间同源性大于
90%
,但在
N-terminal
同源性仅
50%-60%
,因此
N-terminal
常被用作
actin
的抗原。
β
-Actin
是横纹肌肌纤维中的一种主要蛋白质成分,也是肌肉细丝及细
胞骨架微丝的主要成分。具有收缩功能,分布广泛。
β
-Actin
用途
β
-Actin
是
PCR
常用的内参,β
-Actin
抗体是
Western Blot
很好的内参指数。内参即是内部参
照
(Internal Control
,对于哺乳动物细胞表达来说一般是指由管家基因编码表达的蛋白。它们在各
组织和细胞中的表达相对恒定,在检测蛋白的表达水平变化时常用它来做参照物。常用的蛋白质内
参
有
细
胞
骨
架
蛋
白
beta-actin
或
beta-tubulin
和
GAPDH(glyceraldehyde-3-phosphate
dehydrogenase
等。因此
β
-Actin
抗体、β
-Tubulin
抗体以及
GAPDH
抗体成为最常见的三个动物
细胞内参抗体。
β
-Actin
作为内参是得到了公认的,这是针对大多数组织和细胞来说的,它广
泛分布于细胞浆内,表达量非常丰富。
Beta-actin
由
375
个氨基酸组成,分子量大小为
42-43kDa
左右。
β
-actin
的蛋白水平通常不会发生改变,因此被广泛用于
Western
时上样量是否一致的参照,
也常被用于免疫染色观察细胞的微丝结构。在用作
Western
的参照时,
Actin
抗体和
Tubulin
抗体
的主要不同之处在于两者所识别蛋白的分子量不同,这样可以选择合适的参照在同一块胶同一张膜
上实现同时检测目标蛋白和参照蛋白。
本文来源:
https://www.2haoxitong.net/k/doc/896769e9a3c7aa00b52acfc789eb172ded63996e.html
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