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正在进行安全检测...

发布时间：2024-03-08 15:59:22 来源：文档文库

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浙江大学学报（农业与生命科学版）４１（３）：３６５￣３７０，２０１５　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｚｈｅｊｉａｎｇ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ａｇｒｉｃ．８Ｌ　Ｌｉｆｅ　Ｓｃｉ．１　ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｊｏｕｒｎａｌｓ．ｚｊｕ．ｅｄｕ．ｃｎ／ａｇｒ　Ｅ—ｍａｉｌ：ｚｄｘｂｎｓｂ＠ｚｊｕ．ｅｄｕ．ｃｎ　ＤＯＩ：１０．３７８５／ｊ．ｉｓｓｎ．１００８—９２０９．２０１４．０６．３０２　绍兴鸭生长激素基因多态性与生长性能关联性分析　李丽　，徐琪　，陈阳　，黄学涛。，李柳萌　，陶仲连　，陈国宏ｈ　（１．扬州大学动物科学与技术学院，江苏扬州２２５００９；２．福建省农业科学院畜牧兽医研究所，福州３５００１３　３．浙江省农业科学院畜牧兽医研究所，杭州３１００２１；４．诸暨国家级绍兴鸭保种场，浙江绍兴３１１８００；　５．缙云县畜牧兽医局，浙江缙云３２１４００）　摘要　以绍兴鸭为材料，选择与生长发育密切相关的候选生长激素（ｇｒｏｗｔｈ　ｈｏｒｍｏｎｅ，ＧＨ）基因，通过直接测序方　法扫描其单核苷酸多态性（ｓｉｎｇｌｅ　ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ，ＳＮＰ）位点，并分析其与生长性能的关联性．结果表明：　在ＧＨ基因的２　５１４　Ａ＞Ｇ和２　６９１　Ｃ＞Ｔ处检测到２个ＳＮＰ位点，且２个基因座均处于Ｈａｒｄｙ－Ｗｅｉｎｂｅｒｇ平衡状　态．最小二乘法分析表明，ＧＨ基因（２　６９ｌ　Ｃ＞Ｔ）ＴＴ基因型个体的６周龄体质量、８周龄体质量、１２周龄龙骨长、　５３周龄胸宽显著高于ＣＴ基因型个体（Ｐ＜０．０５）；ＴＴ基因型５３周龄胸肌质量、腹脂质量、腹脂率显著高于ＣＴ和　ＣＣ基因型个体（Ｐ＜０．０５）．研究为在本品种选育中监测绍兴鸭公鸭的生长发育和充分利用淘汰种公鸭肉用价值提　供了一定的参考材料，同时从分子水平上丰富了绍兴鸭遗传信息．　关键词　绍兴鸭；生长激素基因；单核苷酸多态性；生长性能　中图分类号Ｓ　８３４．８９　文献标志码Ａ　Ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｔｈｅ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ　ｏｆ　ｇｒｏｗｔｈ　ｈｏｒｍｏｎｅ　ｇｅｎｅ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ　ｉｎ　Ｓｈａｏｘｉｎｇ　ｄｕｃｋｓ．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｚｈｅｊｉａｎｇ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ａｇｒｉｃ．　＆Ｌｉｆｅ　Ｓｃｉ．），２０１５，４１（３）：３６５—３７０　Ｌｉ　Ｌｉ　一，Ｘｕ　Ｑｉ　，Ｃｈｅｎ　Ｙａｎｇ　，Ｈｕａｎｇ　Ｘｕｅｔａｏ。，Ｌｉ　Ｌｉｕｍｅｎｇ　，Ｔａｏ　Ｚｈｏｎｇｌｉａｎ　，Ｃｈｅｎ　Ｇｕｏｈｏｎｇ　（１．Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ａｎｉｍａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｙａｎｇｚｈｏｕ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙａｎｇｚｈｏｕ　２２５００９，Ｊｉａｎｇｓｕ，Ｃｈｉｎａ　２．Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ａｎｉｍａｌ　Ｈｕｓｂａｎｄｒｙ　ａｎｄ　Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ，Ｆ　ｉａｎ　Ａｃａｄｅｍｙ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｆｕｚｈｏｕ　３５００１３，Ｃｈｉｎａ；３．Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ａｎｉｍａｌ　Ｈｕｓｂａｎｄｒｙ　ａｎｄ　Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｚｈｅｉ　ｉａｎｇ　Ａｃａｄｅｍｙ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ　Ｈａｎｇｚｈｏｕ　３１　００２１　Ｃｈｉｎａ；　４．Ｓｈａｏｘｉｎｇ　Ｄｕｃｋ　Ｎａｔｉｏｎａｌ　Ｃｏｎｓｅｒｖａｔｉｏｎ　Ｆｉｅｌｄ　ｏｆ　ＺｈｕＪｉ，Ｓｈａｏｘｉｎｇ　３１１８００，Ｚｈｅｊｉａｎｇ，Ｃｈｉａｎ　５．Ｊｉｎｙｕｎ　Ｂｕｒｅａｕ　ｏｆ　Ａｎｉｍａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｖｅｔｅｒｉａｎｒｙ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｊｉｎｙｕｎ　３２１４００，Ｚｈｅｊｉａｎｇ，Ｃｈｉａｎ）　Ｓｕｍｍａｒｙ　Ａｓ　ｅｘｃｅｌｌｅｎｔ　ｇｅｒｍｐｌａｓｍ　ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ　ｉｎ　Ｃｈｉｎａ，Ｓｈａｏｘｉｎｇ　ｄｕｃｋ　ｉｓ　ｆａｍｏｕｓ　ｆｏｒ　ｉｔｓ　ｈｉｇｈ　ｅｇｇ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ａｌｌ　ｏｖｅｒ　ｔｈｅ　ｗｏｒｌｄ．Ｌａｙｉｎｇ　ｔｒａｉｔｓ，ｒａｔｈｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ａｎｄ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｔｒａｉｔｓ，ａｒｅ　ｔｈｅ　ｍａｉｎ　ｂｒｅｅｄｉｎｇ　ｃｒｉｔｅｒｉａ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｄｕｃｋ　ｂｒｅｅｄｉｎｇ　ａｔ　ｐｒｅｓｅｎｔ．Ｗｅ　ｕｓｕａｌｌｙ　ｕｓｅ　ｅｇｇ　ｌａｙｉｎｇ　ｔｒａｉｔｓ　ａｓ　ｔｈｅ　ｍａｉｎ　ｂｒｅｅｄｉｎｇ　ｇｏａｌ，ｂｕｔ　ｉｇｎｏｒｅ　ｔｈｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ａｎｄ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｔｒａｉｔｓ，　ｅｓｐｅｃｉａｌｌｙ　ｉｎ　ｄｒａｋｅ　ｂｒｅｅｄｉｎｇ．Ｄｅｆｅｃｔｉｖｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ａｎｄ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｍａｙ　ｌｅａｄ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｌｏｓｓ　ｏｆ　ｄｕｃｋ　ｂｒｅｅｄｉｎｇ　ｖａｌｕｅ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｌｏｗ　ｆｅｒｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ　ｒａｔｅ，ｗｈｉｃｈ　ｗｉｌｌ　ｆｉｎａｌｌｙ　ｒｅｄｕｃｅ　ｔｈｅ　ｅｃｏｎｏｍｉｃ　ｂｅｎｅｆｉｔ　ｏｆ　ｄｒａｋｅｓ．Ｔｈｕｓ，ｄｒａｋｅｓ’ｇｒｏｗｔｈ　ｔｒａｉｔｓ　ｍｕｓｔ　ｂｅ　ｅｍｐｈａｓｉｚｅｄ　ｉｎ　ｂｒｅｅｄｉｎｇ　ｏｆ　ｌａｙｉｎｇ　ｄｕｃｋｓ．Ｗｅ　ｍｕｓｔ　ｐａｙ　ｍｏｒｅ　ａｔｔｅｎｔｉｏｎ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｓｅｌｅｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｄｒａｋｅｓ’ｇｒｏｗｔｈ　ｔｒａｉｔｓ．　Ｔｈｉｓ　ｓｔｕｄｙ　ａｎａｌｙｚｅｄ　ｔｈｅ　ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｔｈｅ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ　ｏｆ　ｇｒｏｗｔｈ　ｈｏｒｍｏｎｅ（ＧＨ）ｇｅｎｅ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｇｒｏｗｔｈ　基金项目：浙江省农业（畜禽）新品种选育重大科技专项项目（２０１２Ｃ１２９０６—１４）．　通信作者（Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ　ａｕｔｈｏｒ）：陈国宏，Ｅ—ｍａｉｌ：ｇｈｃｈｅｎ＠ｙｚｕ．ｅｄｕ．ｃｎ　第一作者联系方式：李丽，Ｅ—ｍａｉｌ：５７６８０１７９２＠ｑｑ．ｃｏｍ　收稿日期（Ｒｅｃｅｉｖｅｄ）：２０１４—０６—３０；接受日期（Ａｃｃｅｐｔｅｄ）：２０１４—１０—２８；网络出版日期（Ｐｕｂｌｉｓｈｅｄ　ｏｎｌｉｎｅ）：２０１５—０５—１９　ＵＲＩ　：ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｎｋｉ　ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／３３．１２４７．ｓ．２０１５０５１９．１３５２．Ｏ１６．ｈｔｍｌ　
浙江大学学报（农业与生命科学版）　第４１卷　ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ　ａｎｄ　ｓｌａｕｇｈｔｅｒ　ｉｎ　Ｓｈａｏｘｉｎｇ　ｄｕｃｋｓ，ｗｈｉｃｈ　ｐｒｏｖｉｄｅｄ　ｓｏｍｅ　ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ　ｍａｔｅｒｉａｌ　ｆｏｒ　ｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ　ｔｈｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ａｎｄ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｓｈａｏｘｉｎｇ　ｄｕｃｋｓ　ｂｒｅｅｄｉｎｇ．　Ａｓ　ｔｈｅ　ｃａｎｄｉｄａｔｅ　ｇｅｎｅｓ．ＧＨ　ｇｅｎｅ　ｉｓ　ｃｌｏｓｅｌｙ　ｒｅｌａｔｅｄ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ａｎｄ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ．Ｔｈｅ　ＳＮＰ　ｌｏｃｉ　ｏｆ　ＧＨ　ｗｅｒｅ　ｓｃａｎｎｅｄ　ｂｙ　ｄｉｒｅｃｔ　ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ　ｍｅｔｈｏｄ．Ｔｈｅ　ｂｏｄｙ　ｓｉｚｅ　ｗａｓ　ｍｅａｓｕｒｅｄ　ａｔ　ｔｈｅ　ａｇｅ　ｏｆ　１　２　ｗｅｅｋｓ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｓｌａｕｇｈｔｅｒ　ｉｎｄｅｘｅｓ　ｗｅｒｅ　ｍｅａｓｕｒｅｄ　ａｔ　ｔｈｅ　ａｇｅ　ｏｆ　５　３　ｗｅｅｋｓ．Ａｌｌ　ｄｕｃｋｓ　ｗｅｒｅ　ｓａｍｐｌｅｄ　ｒａｎｄｏｍｌｙ　ａｃｃｏｒｄｉｎｇ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｇｒｏｕｐ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｒｅｌｅｖａｎｃｅ　ｏｆ　Ｓｈａｏｘｉｎｇ　ｄｕｃｋ　ｇｒｏｗｔｈ　ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ　ａｎｄ　ｓｌａｕｇｈｔｅｒ　ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ　ｗｅｒｅ　ａｎａｌｙｚｅｄ．Ｔｈｅ　ｇｅｎｏｍｉｃ　ＤＮＡ　ｗａｓ　ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　ｂｙ　ｐｈｅｎｏｌ　ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ　ｍｅｔｈｏｄ　ｆｒｏｍ　ｂｌｏｏｄ．Ａｌｌ　ｄａｔａ　ｗｅｒｅ　ｓａｍｐｌｅｄ　ｒａｎｄｏｍｌｙ　ａｃｃｏｒｄｉｎｇ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｇｒｏｕｐ．Ａｃｃｏｒｄｉｎｇ　ｔｏ　ｔｈｅ　ｐｕｂｌｉｓｈｅｄ　ＧＨ　ｇｅｎｅ　ｓｅｑｕｅｎｃｅ　ｉｎ　ＧｅｎＢａｎｋ，ｔｈｅ　ｐｒｉｍｅｒｓ　ｗｅｒｅ　ｄｅｓｉｇｎｅｄ　ｔｏ　ａｍｐｌｉｆｙ　ｔｈｅ　ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ　ｏｆ　ｉｎｔｒｏｎ　２，ｅｘｏｎ　４　ａｎｄ　ｅｘｏｎ　５．Ｔｈｅ　ＳＮＰ　ｌｏｅｉ　ｏｆ　ＧＨ　ｗｅｒｅ　ｓｃａｎｎｅｄ　ｂｙ　ｄｉｒｅｃｔ　ｓｅｑｕｅｎｃｉｎｇ　ｍｅｔｈｏｄ．ａｎｄ　ｔｈｅ　ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ　ｗｅｒｅ　ｃｏｍｐａｒｅｄ　ｂｙ　ｕｓｉｎｇ　ＤＮＡＳｔａｒ　ｔｏ　ｌｏｏｋ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｃ　１ｏｃｉ．Ｔｈｅ　ｇｅｎｏｔｙｐｅ　ａｎｄ　ａｌｌｅｌｅ　ｆｒｅｑｕｅｎｃｉｅｓ　ｗｅｒｅ　ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ　ａｎｄ　ｔｅｓｔｅｄ　ｂｙ　Ｈａｒｄｙ－Ｗｅｉｎｂｅｒｇ　ｂａｌａｎｃｅ．Ｔｈｅ　ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｔｈｅ　ｇｅｎｏｔｙｐｅｓ　ａｎｄ　ｔｒａｉｔｓ　ｗａｓ　ｃａｌｃｕｌａｔｅｄ　ｂｙ　ｕｓｉｎｇ　ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ　ｓｏｆｔｗａｒｅ　ＪＭＰ　４．０（ＳＡＳ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，２００２）ｔｏ　ｅｓｔｉｍａｔｅ　ｔｈｅ　１ｅａｓｔ　ｓｑｕａｒｅ　ｍｅａｎｓ　ｏｆ　ｔｒａｉｔｓ．　Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｗｏ　ｌｏｃｉ：ＧＨ　２　５１４　Ａ＞Ｇ．ＧＨ　２　６９１　Ｃ＞Ｔ．Ｔｈｅ　ｔｅｓｔ　ｒｅｖｅａｌｅｄ　ｔｈａｔ　ａｌｌ　１ｏｃｉ　ｗｅｒｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｂａｌａｎｃｅ　ｏｆ　Ｈａｒｄｙ－Ｗｅｉｎｂｅｒｇ（Ｐ＞Ｏ．０５）．Ｆｏｒ　ＧＨ（２　５１４　Ａ＞Ｇ＆２　６９１　Ｃ＞Ｔ），６　ｗｅｅｋ　ｂｏｄｙ　ｍａｓｓ，８　ｗｅｅｋ　ｂｏｄｙ　ｍａｓｓ，１２一ｗｅｅｋ　ｋｅｅｌ　ｂｏｎｅ　ｌｅｎｇｔｈ，５３一ｗｅｅｋ　ｃｈｅｓｔ　ｗｉｄｔｈ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓ　ｗｉｔｈ　ｇｅｎｏｔｙｐｅ　ＴＴ　ｗｅｒｅ　ｈｉｇｈｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈｅ　ｇｅｎｏｔｙｐｅ　ＣＴ．Ｔｈｅ　ｂｒｅａｓｔ　ｍｕｓｃｌｅ　ｍａｓｓ，ａｂｄｏｍｉｎａｌ　ｆａｔ　ｍａｓｓ　ａｎｄ　ａｂｄｏｍｉｎａｌ　ｆａｔ　ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ　ｏｆ　ｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓ　ｗｉｔｈ　ｇｅｎｏｔｙｐｅ　ＴＴ　ｗｅｒｅ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｈｉｇｈｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈｏｓｅ　ｗｉｔｈ　ｇｅｎｏｔｙｐｅ　ＣＴ　ａｎｄ　ＣＣ（Ｐ＜Ｏ．０５）．　ｈ　ｉｓ　ｓｕｇｇｅｓｔｅｄ　ｔｈａｔ　ＧＨ　ｇｅｎｅ　ｍａｙ　ｂｅ　ｔｈｅ　ｍａｊｏｒ　ｇｅｎｅ　ｗｈｉｃｈ　ｄｉｒｅｃｔｌｙ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｔｈｅ　ａｂｄｏｍｉｎａｌ　ｆａｔ　ａｎｄ　ｂｒｅａｓｔ　ｍｕｓｃｌｅ　ｒｅｌａｔｅｄ　ｔｒａｉｔｓ，ｏｒ　ｍａｙ　ｂｅ　ｔｉｇｈｔｌｙ　ｌｉｎｋｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｍａｊｏｒ　ｇｅｎｅｓ　ｉｎｄｉｒｅｃｔｌｙ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ　Ｓｈａｏｘｉｎｇ　ｄｕｃｋ；ｇｒｏｗｔｈ　ｈｏｒｍｏｎｅ　ｇｅｎｅ；ｓｉｎｇｌｅ　ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ；ｇｒｏｗｔｈ　ｔｒａｉｔ　绍兴鸭具有产蛋多、体质量小、饲料报酬高、抗　病力强等特点，是世界优秀水禽品种之一ｌ１］．但长期　以来，因绍兴鸭体型较小，对其肉用性能的研究较　少，所以对绍兴鸭公鸭的遗传特征和生长性能进行　深人研究，进一步了解鸭体内脂肪分布和生长发育　１．１试验材料及各生长性能指标测定　１　材料与方法　绍兴鸭１９５只，均为公鸭，来自浙江省诸暨市国　家级绍兴鸭保种场同一鸭舍、同一批次，饲料与饲养　方法相同，记录其生长指标，１２周龄时参照《畜禽遗　的差异，为合理保护和利用我国地方鸭品种遗传资　源，具有重要的理论和实践意义．　生长激素（ｇｒｏｗｔｈ　ｈｏｒｍｏｎｅ，ＧＨ）是一种具有　传资源调查手册》ｌ９　规定的方法测定试验鸭的体质　量和体尺指标，５３周龄时测定屠宰指标．所有数据　广泛生理功能的生长调节素．ＧＨ基因对动物体的　影响主要表现为显著提高生长速度，促进肌肉生长，　降低脂肪含量，进而影响机体生长发育速度．ＧＨ基　因由５或６个外显子和４或５个内含子组成，ｃＤＮＡ　长度一般为８００　１　２００　ｂｐ，信号肽和成熟肽分别为　资料均按群组随机取样，同一指标现场专人测定．采　用酚一三氯甲烷法对全部个体血液基因组ＤＮＡ进　行提取，０．６　琼脂糖检测，一２０℃保存备用．　１．２　引物设计和聚合酶链反应扩增　１６～２７个和１８６～１９１个氨基酸＿２叫］．在对畜禽的研　究中发现，ＧＨ基因存在丰富的多态性Ｉｓ－ｓ］．与哺乳　动物相比，禽类ＧＨ基因的研究起步较晚．本试验　以绍兴鸭公鸭为材料，运用ＤＮＡ直接测序技术，对　根据ＧｅｎＢａｎｋ公布的ＧＨ基因（登录号：　ＡＢ１５８７６０．２）序列设计引物，扩增其内含子２、外显　子４、外显子５序列（表１）．引物由上海翼和生物工　程技术服务有限公司合成，用灭菌超纯水溶解．　聚合酶链反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ　ｃｈａｉｎ　ｒｅａｃｔｉｏｎ，　ＰＣＲ）反应体系：缓冲液（１０×，含２０　ｍｏｌ／Ｉ　Ｍｇ纠）　２．０　Ｌ，１０　ｍｏｌ／Ｌ脱氧核苷酸（ｄＮＴＰｓ）２．０　Ｌ，１０　ＧＨ基因进行单核苷酸多态性（ｓｉｎｇｌｅ　ｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ　ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ，ＳＮＰ）检测，对不同外显子、内含子　的遗传变异进行分析，并对其多态性与生长性能进　行关联分析，以期找到遗传变异位点，寻找绍兴鸭生　长性能的主效基因和分子遗传标记，旨在从分子水　平上分析绍兴鸭ＧＨ基因单核苷酸多态性及其与　生长性能的遗传调控规律．　“ｍｏｌ／Ｌ上、下游引物各２．０　ｔＬＬ，模板ＤＮＡ　５０　ｎｇ，１　Ｕ　Ｔａｑ　ＤＮＡ聚合酶０．２　Ｌ，加超纯水补足体积至　２０．０“Ｌ．ＰＣＲ反应条件：９５℃２　ｍｉｎ；随后３０个循　环，９４℃３０　ｓ，５６　ｏＣ　３０　ｓ，６５℃１　ｍｉｎ；最后６５℃延　

浙江大学学报（农业与生命科学版）　第４１卷　２．２　ＧＨ基因内含子２的群体遗传特性　果表明，该基因座处于Ｈａｒｄｙ—Ｗｅｉｎｂｅｒｇ平衡状态．　２．３　ＧＨ基因内含子２多态性及其与生长发育性　对绍兴鸭群体中ＧＨ突变位点基因型分布进　行统计，发现存在ＴＴ基因型、ＣＴ基因型、ＣＣ基因　型以及ＧＧ基因型、ＧＡ基因型和ＡＡ基因型个体．　绍兴鸭ＧＨ基因内含子２的基因型频率和等位基　能和屠体性能的关联性分析　连锁不平衡分析结果表明，２　５１４　Ａ＞Ｇ和　２　６９１　Ｃ＞Ｔ位点之间的Ｒ　一１，处于完美连锁不平　因频率见表２．２　５１４　Ａ＞Ｇ位点ＧＧ纯合子为群体　中的优势基因型，等位基因Ｇ为优势等位基因，　衡状态，一个位点的信息完全可以代表另外一个位　点．因此，本研究只对２　６９１　Ｃ＞Ｔ位点进行了关联　检验结果表明，该基因座处于Ｈａｒｄｙ—Ｗｅｉｎｂｅｒｇ平　衡状态；２　６９１　ｃ＞Ｔ位点ＴＴ纯合子为群体中的优　势基因型，等位基因Ｔ为优势等位基因，　检验结　性分析．采用最小二乘均值法对ＧＨ基因多态性与　其生长发育性能和屠体性能进行关联性分析的结果　见表３和表４．　表２绍兴鸭ＧＨ基因内含子２的基因型频率、等位基因频率　Ｔａｂｌｅ　２　Ｇｅｎｅ　ｆｒｅｑｕｅｎｃｉｅｓ，ａｌｌｅｌｅ　ｆｒｅｑｕｅｎｃｉｅｓ　ｏｆ　ＧＨ　ｇｅｎｅ　ｉｎｔｒｏｎ　２　ｉｎ　Ｓｈａｏｘｉｎｇ　ｄｕｃｋｓ　表３　ＧＨ基因内含子多态位点（２　６９１　Ｃ＞Ｔ）对鸭生长发育性能的影响　Ｔａｂｌｅ　３　Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ　ａｍｏｎｇ　ｔｈｅ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ

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