病毒感染的检查方法与防治原则

第12章 病毒感染的检查方法与防治原则

学习要点

一、病毒感染的检查方法

1.检材的采集与送检

病毒分离标本的采集原则是：①早期取材；②注意无菌操作；③正确处理含菌标本；④低温保存与尽快送检。

2.病毒的分离培养与鉴定

（1）动物接种

（2）鸡胚接种

（3）组织培养：原代细胞；二倍体细胞；传代细胞系

（4）病毒增殖的指标：①细胞的变化；②红细胞吸附；③干扰现象；④培养基pH改变。

3.病毒感染的血清学诊断

(1) 中和试验；

(2) 补体结合试验；

(3) 血凝抑制试验

4.病毒感染的快速诊断

(1) 形态学检查法：光学显微镜检查法；电镜和免疫电镜检查

(2) 免疫学检查法：检查病毒抗原；检查病毒特异性IgM

(3) 检测病毒核酸：核酸杂交技术；PCR技术

二、病毒感染的防治原则

1.病毒感染的预防

(1) 人工自动免疫 用于人工自动免疫的生物制品有：灭活疫苗；减毒活疫苗；基因工程疫苗；还有亚单位疫苗、多肽疫苗、核酸疫苗等。

(2) 人工被动免疫 人工被动免疫常用的制剂有：动物免疫血清、人血清丙种球蛋白、转移因子等。

2. 抗病毒治疗

(1) 抑制病毒穿入与脱壳 金刚烷胺

(2) 抑制病毒生物合成 核苷类化合物（疱疹净、阿昔洛韦、阿糖腺苷、病毒唑、叠氮脱氧胸苷、拉米呋啶等）；病毒蛋白酶的抑制物（沙喹纳伟、英迪纳伟等）；IFN及其诱生剂等。

(3) 免疫制剂 特异性免疫球蛋白、治疗性疫苗等。

(4) 抗病毒中草药

复习题

一、名词解释

1.二倍体细胞

2.细胞病变效应

3.红细胞吸附试验

4.血凝抑制试验

5.减毒活疫苗

6.灭活疫苗

二、选择题

A1型题

1.从患者体内分离病毒，采集标本时的错误做法是：

A.在发病早期采集 B.选取正确部位取材 C.标本冷藏

D.标本尽快送实验室 E.疾病恢复期取材

2.细胞病变效应不包括：

A.细胞圆缩、脱落 B.细胞融合 C.形成包涵体

D.干扰现象 E.细胞裂解

3.病毒凝集红细胞(血凝试验)的机制是：

A.红细胞表面抗原和血凝素抗体结合

B.红细胞表面受体与病毒表面血凝素结合

C.红细胞表面病毒抗原与相应抗体结合

D.病毒与结合在红细胞表面的抗体结合

E.红细胞上的血凝素与病毒结合

4.预防病毒病最有效的方法是使用：

A.抗毒素 B.抗病毒化学疗剂 C.中草药 D.疫苗 E.抗菌药物

5.以下描述正确的是

A.人工被动免疫接种的物质为抗原 B.人工被动免疫不能用于治疗

C.人工主动免疫接种的物质为丙种球蛋白 D.人工主动免疫主要用于治疗

E.人工被动免疫主要用于紧急预防

6.无环鸟苷(ACV)有效控制单纯疱疹病毒的作用机理是

A.ACV作用于敏感细胞表面受体 B.ACV抑制病毒DNA多聚酶和DNA合成

C.ACV抑制病毒RNA聚合酶 D.ACV抑制敏感细胞DNA复制

E.ACV抑制病毒蛋白合成

7.下列不适于培养动物病毒的方法是

A.鸡胚培养 B.人工合成培养基培养 C.器官培养

D.二倍体细胞培养 E.动物培养

8.不能作为病毒在细胞内生长繁殖指标的一项是

A.致细胞病变作用 B.红细胞凝集 C.干扰现象

D.细胞培养液变混浊 E.细胞培养液PH改变

9.有关病毒标本的采集和运送,不正确的方法是

A.发病早期或急性期采集标本 B.发病晚期采集标本

C.标本运送应放在带有冰块的保温桶中

D.标本采集后应立即送实验室检查

E.运输培养基中应含有抗生素

10.病毒的中和试验是病毒血清学特异试验,以下描述中不正确的是

A.中和试验是指中和抗体与病毒结合,使病毒失去感染性的一种试验

B.中和试验需用活细胞或鸡胚或动物来判断结果

C.中和试验是一种特异性较高的试验

D.中和抗体在体内维持时间较短

E.中和试验是用已知病毒抗原检测中和抗体

12.抗病毒药物不包括

A.金刚烷胺 B.无环鸟苷 C.叠氮脱氧胸苷

D.干扰素 E.头孢三嗪

13.对治疗病毒感染无效的药物是

A.干扰素 B.抗生素 C.聚肌胞

D.黄连、黄芩 E.三氮唑核苷

B1型题

（供1～3题备选答案）

A.鼻咽漱液

B.粪便

C.血液

D.脑组织

E.尿

1.分离狂犬病毒应取：

2.分离脊髓灰质炎病毒最好取：

3.分离流感病毒应采集：

（供4～6题备选答案）

A.中和试验

B.血凝抑制试验

C.补体结合试验

D.血凝试验

E.多聚酶链反应(PCR)

4.鉴定流感病毒型别或亚型的试验：

5.测定病毒感染力的试验：

6.可体外扩增病毒核酸的试验是：

三、填空题

1.分离病毒最好采集发病 天内的标本，采集标本必须严格遵守 操作。

2.含病毒标本采集后必须 送检，否则应置 液中保存送检。

3.分离培养病毒的方法有 、 和 。

4.常用于培养病毒的细胞类型有 、 和 。

5. 病毒血清学试验通常取双份血清检查， 期抗体效价比 期增高 倍或以上时，有诊断意义。

6.用化学方法裂解病毒，提取病毒 或 上与免疫有关的亚单位成分，除去核酸后制成的疫苗，称为 。

四、问答题

1.简述目前最常用的培养病毒的方法。

2.病毒检测和细菌检测有何区别?

3.比较减毒活疫苗和灭活疫苗的异同。

4.使用减毒活疫苗应注意哪些事项？

参考答案

一、名词解释

1.二倍体细胞：是目前常用培养病毒的细胞类型。其特点是在体外可连续传40至50代仍保持23对染色体，因此广泛用于病毒的分离和疫苗的生产。

2.细胞病变效应：指病毒在体外细胞培养时引起的细胞损害。根据病毒种类和细胞种类的不同，细胞病变效应可有不同表现，均可在显微镜下观察到，作为病毒在细胞内增殖的指标。

3.红细胞吸附试验：某些带有血凝素的病毒在细胞内生长不引起明显的细胞病变效应，但病毒在出芽释放时可将其血凝素表达在宿主细胞膜上，使细胞可以吸附人和某些动物的红细胞。

4.血凝抑制试验：是一种特异性的抗体中和反应，其基本原理是病毒的血凝素可凝集红细胞，但若先用特异性抗体与病毒作用，再加入红细胞，则不出现红细胞凝集，称为血凝抑制。该试验常用于鉴定带有血凝素的病毒的型别，或是检测此类病毒感染者体内特异性抗体。

5.减毒活疫苗：用人工诱导病毒发生毒力变异而获得的毒力降低而抗原性不变的病毒株制备的疫苗，如脊髓灰质炎疫苗。

6.灭活疫苗：用甲醛灭活病毒核酸但抗原性不变而制备的疫苗，如乙型脑炎疫苗和狂犬疫苗等。

二、选择题

A1型题

1.E 2.D 3.B 4.D 5.E 6.B 7.B 8.D 9.B 10.D 11.E 12.B

B1型题

1.D 2.B 3.A 4.B 5.D 6.E

三、填空题

1.4；无菌；2.立即；50%甘油缓冲；3.组织培养；动物接种；鸡胚培养；

4.原代细胞；二倍体细胞株；传代细胞系；5.恢复；急性；4；

6.衣壳；包膜；亚单位疫苗

四、问答题

1.目前最常用的培养病毒的方法是细胞培养。根据细胞来源和性状的不同可分为三类：(1)原代细胞：新鲜组织经胰酶消化后形成单细胞，加入培养液后37 培养，数日可贴壁长成单层细胞，即为原代细胞培养； (2)二倍体细胞：是目前最常用的细胞，该细胞可以在体外连续传40至50代仍保持23对染色体的特点，故广泛用于病毒的分离和疫苗的制备；(3)传代细胞：是体外可以无限传代的细胞，来源于肿瘤细胞或细胞株传代过程中发生的变异株。

2.病毒检测和细菌检测的区别主要在于，病毒是非细胞型微生物，必须在活细胞内才能增殖，因此与细菌检测主要在分离培养和形态观察上有较大区别：

（1）病毒的观察需电子显微镜。光学显微镜只能观察病毒在细胞内形成的包涵体；细菌则可以用光学显微镜观察。

（2）病毒的分离培养需用动物接种、鸡胚培养和组织细胞培养，而细菌大多可用人工培养基培养。

（3）培养物的签定：病毒多通过观察动物发病或细胞病变效应等方法；细菌则主要通过生化反应。

3.相同点：两种疫苗都用于人工主动免疫。

不同点：(1)免疫效果：活疫苗免疫效果好，既可产生体液免疫，也可产生细胞免疫，免疫维持时间长。而灭活疫苗免疫效果较差，仅产生体液免疫而无细胞免疫，免疫维持时间短；(2)给药途径和次数：活疫苗可模拟自然感染方式或注射，免疫一次即可；灭活疫苗只能通过注射且需多次免疫；(3)保存：活疫苗需冷藏，不易保存；灭活疫苗不需冷藏，易保存；(4)缺点：活疫苗极偶然可能发生并发症、持续感染、毒力回复突变等，免疫缺陷者和孕妇不能应用；灭活疫苗的最大缺点是免疫力不强。

4.使用减毒活疫苗应注意：

(1)冷藏：活疫苗对温度很敏感，使用之前应一直保持冷藏以保证疫苗活性。

(2)注意给药时间、浓度和途径：接种疫苗应选择适当时间，如不同的疫苗选择不同年龄分别进行计划免疫；两种活疫苗应避免同时接种而发生干扰。口服肠道病毒疫苗以冬季服用为好，可避免其他肠道病毒的干扰。疫苗的剂量一定要足。口服疫苗应注意不要用热水和母乳送服。

(3)注意禁忌证：被免疫者应无急性发热性疾病、腹泻、免疫缺陷或其他慢性疾病，避免发生病毒之间的干扰或疫苗增殖引起不良反应。接种疫苗时应避免用免疫球蛋白。

本文来源：https://www.2haoxitong.net/k/doc/2c4aa10a10a6f524ccbf85b6.html