小白鼠肝细胞线粒体的超活染色及观察实验报告

发布时间:2012-12-31 11:29:36   来源:文档文库   
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小白鼠肝细胞线粒体的超活染色及观察

实验目的:1、掌握线粒体活体染色技术

2、观察和了解活细胞内线粒体的形态、结构与分布特点

实验材料:小鼠、解剖盘、镊子、眼科剪、小烧杯、双凹片、载玻片、盖玻片、胶头滴管、詹纳斯绿B溶液、Ringer溶液

实验原理:詹纳斯绿B是毒性较小的碱性染料,可专一性地对线粒体进行超活染色。这是由于线粒体内的细胞色素氧化酶系的作用,使染料始终保持氧化状态(即有色状态——蓝绿色);而线粒体周围的细胞质中,这些染料被还原为无色的色基(即无色状态)

实验步骤:1、断头法处死小白鼠,置于解剖盘中,剪开腹腔,取小白鼠肝组织。选取边缘较薄的肝组织0.5cm³,放入小烧杯中,用Ringer溶液冲洗去血污

2、在干净的凹面载玻片的凹穴中,滴加1/5000詹纳斯绿B溶液,再将肝组织块移入染液中,注意不可将组织块完全淹没,要使组织块上面部分半露在染液外,这样细胞内的线粒体酶系可充分得到氧化,易被染色。当组织块边缘被染成蓝绿色即成(一般需染20~30min

3、吸去染液,用眼科剪将组织块着色部分剪下重置小烧杯中,滴加Ringer溶液0.5ml,用剪刀充分剪碎制悬液。

4、去上述细胞悬液滴片加盖玻片,高倍镜下观察

实验结果:肝细胞中的线粒体被染成蓝绿色

分析与讨论:视野中除肝细胞外还有很多红细胞,红细胞比肝细胞小,且没被染上蓝绿色

本文来源:https://www.2haoxitong.net/k/doc/26dad82fa5e9856a561260e8.html

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