酶工程问答题

酶工程习题集

第一章 绪论

1、 发展史：

1903年Henri中间络合物学说；1913年Leonor Michaelis和Maud Menten

米氏方程；Daniel E. Koshland提出了诱导契合学说。1926年，萨母纳（Sumner）

提出酶的本质是蛋白质的观点。1960年．雅各（Jacob）和莫若德（Monod）提出操纵子学说，1982年，切克（Cech）等人发现四膜虫（Tetrahynena）细胞的26s rRNA前体具有自我剪接功能(self-splicing)。核酶（Ribozyme，也称核糖核酸酶，以区别于蛋白质酶）；1983年阿尔彻曼（Sidney. Altman）发现核糖核酸酶P（RNAase P）

2、核酸类酶（ribozyme)：具有生物催化剂所有特性，是一类由RNA组成的酶。底物有哪些？

3、酶的新概念？分类？

4、人工酶、模拟酶、化学修饰酶、克隆酶、突变酶、新酶、抗体酶

第二章 酶学基础

1、酶促反应的特点？优缺点？

2、按酶促反应性质将生物体所有的酶分为哪六大类？如何编号？

3、终止一个酶促反应的方法有哪些？

4、全酶的组成？按酶蛋白结构不同分类？

5、别构酶、别构效应、配体

6、活性部位（结合部位与催化部位），必需基团，活性中心的亲核性基团：酸碱性基团：

7、参与蛋白类酶活性中心频率最高的氨基酸 7 种？

8、酶活力单位（U）；比活力；同族酶；丝氨酸蛋白酶与巯基蛋白酶各有哪些？

9、酶活性中心基团的检测方法有哪三种？

10、酶的pH稳定性与温度稳定性如何测定？

第三章 酶的催化机制

1、 酶高效率催化的五种机制

2、 何谓邻近与定向效应？何谓构象变化效应？何谓共价催化？何谓酸碱催化？何谓微环境效应？如何理解？

第四章 酶的催化动力学

1、绘制底物浓度对酶促反应速度影响的双曲线（标明各参数），并简述其影响。

2、米-曼氏方程（Michaelis-Menten equation）；中间产物学说

3、稳态的含义，中心内容。

3、绘制酶反应过程中各物质浓度变化曲线图

4、如何利用双倒数作图法（又称林-贝氏作图法）求Km值与 Vmax值测定

5、通过酶促动力学方法鉴别一个抑制剂对酶的抑制是可逆还是不可逆抑制作用？

6、从线性动力学模型表示式、动力学方程、米氏方程图、双倒数方程作图区别竞争性抑制、非竞争性抑制作用和反竞争性抑制作用？

7、竞争性抑制、非竞争性抑制作用和反竞争性抑制的特点是什么？

8、各举一例说明何谓Ks型不可逆抑制剂和Kcat型不可逆抑制剂（自杀性底物）？

9、酶活力、比活力、纯化倍数、得率概念，计算。

例：下表是对虾几丁质酶的分离纯化方案，请把表格中未完成的空格填好。

第五章 微生物发酵产酶

1、 与酶的生物合成有密切关系的基因有哪些？

2、 转录水平调控的3种模式是什么？

3、 何谓分解代谢物阻遏作用？其作用机理是什么？实质是什么？

4、 何谓酶生物合成的诱导作用？

5、 何谓酶生物合成的反馈阻遏作用？

6、 产酶促进剂有哪些？提高酶产量的措施有哪些？酶发酵生产中诱导物有哪三类？各举一例。

7、 请根据酶生物合成的调节类型提出提高生物酶产量的策略。

8、 产酶细胞生长经历了哪四个阶段？

9、 四种酶生物合成的模式是什么？图示加以区别，各有何特点？

10、 影响酶生物合成模式的主要因素是什么？酶工业生产上，为了提高酶产率和缩短发酵周期，最理想的是何模式？其它合成类型的酶要如何适当调节其生产工艺？

11、 写出Monod（莫诺德）的生长动力学模型方程。指出方程中各参数的含义。

12、 写出宏观产酶动力学方程。指出方程中各参数的含义。

13、 根据不同的细胞产酶模式，分析产酶速率与细胞生长动力学的关系有何不同？

14、 微生物培养发酵产酶中培养基的碳源选择应注意哪些问题？

第六章 动植物细胞培养产酶

1、 植物细胞培养的特点是什么？植物细胞培养产酶的工艺流程。

2、 动物细胞培养主要用于生产哪些功能蛋白？

3、 动物细胞的培养方式有哪些？培养基的组成成分是什么？

第七章 酶的提取与分离纯化

1、 细胞破碎方法及其原理是什么？机械破碎法与物理破碎法有哪些具体的方法？最常用的物理破碎法？化学破碎法常用的化学试剂有哪些？

2、 何谓酶的抽提？酶的主要提取方法有哪些？影响提取的主要因素有哪些？从动物组织中提取胰岛素为何采用6.8％乙醇溶液并用草酸调溶液的pH为2.5～3.0进行提取？酶在抽提时经常添加一些酶的保护剂，具体有哪些？

3、 沉淀分离方法有哪些？

何谓分段盐析法与Ks分段盐析、β分段盐析？硫酸铵盐析法有何优、缺点？需注意哪些问题？硫酸铵浓度的表示方法是什么？

4、根据下表的硫酸铵分级试验结果，如何根据不同情况选择硫酸铵饱和度的范围？

表 硫酸铵分级试验

4、 有机溶剂沉淀法有哪些优点与缺点？

5、 何谓离心分离？按离心机转速的不同离心机可分为哪几类？按使用温度分为哪几类？超速离心机的最大转速可达多少？最大离心力达多少？在超速离心中，离心方法有哪些？密度梯度离心的梯度介质有哪些？使用最多的是什么？等密度梯度离心的特点以及常用的介质是什么？密度梯度的制备主要采用什么设备？

6、 在离心机及转子定下后，10000 r/min离心10 min，计算若用5000 r/min需离心的时间多少？

7、 相对离心力RCF与转速n有何关系？

8、 何谓膜分离技术？主要包括哪些？何谓超滤？主要用途是什么？何谓反渗透？有何特点与用途？

9、 何谓层析分离？最基本的特征是什么？按机理来分为哪几类？

酶的分离纯化中，吸附层析的吸附剂常用有哪些？何谓分配层析与分配系数？何谓离子交换层析？离子交换剂的特点？阴、阳离子交换树脂有何不同？如何正确使用？离子交换纤维素主要有哪些？如何根据酶分子带电情况不同选择不同离子交换剂？梯度洗脱有哪两种方法？举例说明离子交换剂如何转型？如何洗脱离子交换柱上的阳离子B+？

10、 凝胶层析的基本原理是什么？何谓外水体积Vo与峰洗脱体积Ve？葡聚糖商品名是什么？有何特点？主要用途？三种型号的葡聚糖凝胶SephadexG-50、G-75、G-100、G-150、G-200，其膨胀度从大到小的顺序？凝胶孔径从大到小的顺序？

11、 何谓亲和层析？有何特点？主要用途？有哪几种方法？何谓免疫亲和层析？何谓配基？

12、 何谓电泳？聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理是什么？催化体系中化学聚合与光聚合过程有何不同？不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳包含三个效应？

13、 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的原理？蛋白质分子的迁移速度主要取决于什么？如何用来测定蛋白质分子量？

14、 为什么SDS-PAGE电泳会不受蛋白质所带电荷及分子性状的影响？

15、 凝胶材料主要有哪些？选择凝胶主要是依据什么？适用于分子质量较大的蛋白质和多糖的分离纯化的凝胶是什么？

16、 何谓膜分离技术？在酶的生产中有何应用？

17、 何谓等电聚焦电泳？主要用途？

18、 萃取的方法有哪些？何谓超临界萃取？何谓反胶束萃取与反胶束？

19、 浓缩方法有哪些？

20、 如何检查一种酶制剂是否达到了纯的制剂？试用所学过的知识加以论述。

21、 有三种酶蛋白，其相对分子质量和等电点各不相同，试设计一个方案来分离纯化这三种蛋白质。

22、 今欲生产糖化酶结晶产品，试拟出合理的工艺步骤，并说明下游工程的主要工艺条件。

第八章 酶分子修饰

1、 酶分子改造、模拟酶、酶的化学修饰、抗体酶的概念

2、 金属离子置换修饰的主要作用与置换步骤是什么？

3、 何谓大分子结合修饰？常见的水溶性大分子修饰剂有哪些？

4、 PEG有何特点？常用的修饰剂是什么？PEG化学修饰时则何物质为修饰剂？

5、 大分子结合修饰后酶性质主要发生哪些变化？何谓分子内交联修饰？

6、 以L-19 IVS的形成为例说明何谓核苷酸链剪切修饰？

7、 下列化合物是氨基酸哪些基团的修饰剂？

DNFB；TNBS；炭二亚胺；DTT；巯基乙醇；TNM；碘乙酸；DPC；NBS；丁二酮；戊二醛；已二胺；DTNB

8、 氨基酸置换修饰的作用有哪些？各举一例说明。

9、 何谓定点突变技术？其特点是什么？主要运用在哪方面？

10、为什么要进行酶分子修饰，酶分子修饰都能解决哪些问题？

第九章 固定化酶

1、何谓固定化酶？固定化酶的制备原则是什么？

2、比较吸附法、离子结合法、共价结合法、包埋法和交联法五种固定化酶方法的优缺点？包埋法包括哪两种？最常用的包埋法是什么？共价结合法主要有哪些？

3、固定化对酶稳定性有哪些影响？

4、固定化酶与游离酶比较有哪些优缺点？

5、固定化植物细胞有哪些特点？

6、固定化动物细胞有哪些特点？

7、何谓转瓶与微载体？各有何特点？

第十章 酶的非水相催化

1、 非水相催化、微水介质（体系）、非水酶学、超临界介质、正胶束、反胶束、最适水量、水活度、必需水、极性系数lgP、手性化合物、pH印记，

2、 非水介质中的生物催化反应特点有哪些？

3、 有机介质反应体系有哪些？

4、 简述水活度对有机介质中酶催化的影响？

5、 简述有机溶剂极性系数lgP对有机介质中酶催化的影响？

6、 如何理解酶在有机介质中的催化特性？酶在有机介质中有哪些酶学特性发生改变？

7、 黏合剂酚树脂、导电聚合物聚苯胺、甜味剂天苯肽是如何在非水相中催化合成的？

8、 非水介质酶催化反应的优点有哪些？

9、酶在非水介质中的结构性质发生怎样的变化？

10、非水介质中酶催化反应是否在无水环境中进行，为什么？

11、不同有机溶剂对酶的非水相催化有何影响？

12、在有机溶剂介质中催化，为什么选用2≤ lgP ≤5的有机溶剂较适宜？

第十一章 酶反应器

1、 酶反应器概念

2、 酶反应器的类型有哪些（按结构、按操作方式不同）？

3、 比较各类型酶反应器的优缺点是什么？

4、 如何根据底物或产物的理化性质选择反应器？

5、 如何根据酶反应动力学性质来选择酶反应器？

6、 酶反应器在使用过程中应注意哪些方面问题？

7、 游离酶反应器有哪些？各有何优缺点？

8、 固定化酶反应器有哪些？各有何优缺点？

本文来源：https://www.2haoxitong.net/k/doc/145e2352b52acfc789ebc9e9.html