首页 > IVF实验室精液处理

IVF实验室精液处理

发布时间：2023-04-03 22:11:07 来源：文档文库

小中大

字号：

手机查看

IVF实验室精液操作规程
精液样本采集
患者取出精液后，直接交给相关实验室人员，不得由第三人转送。实验室人员应做到：
1.询问患者夫妻双方姓名并与精液杯上双方姓名核对。
2.检查精液杯中是否有精液样本，样本是否外泄，颜色是否异常，容器是否破损，容器内是否有明显异物等。如发生异常，应立即询问患者，并采取相应处理措施（如：重新取精）。
上游法分离优选精子
一、精液处理前的准备工作：

1．将精液处理液（HTF/G-IVF）分装至5ml试管内，每份精液样本使用2支小管，分别分装1.5ml（A管）和2.5ml（B管）培养液,放入培养箱预热平衡过。
2．耗材：巴斯德吸管，5ml试管，载玻片，盖玻片，橡胶吸头，无菌镊子。
一、正常精液：密度≧20x106/ml，活力a+b≥30%的精液样本
1.将精液置于室温15-20min液化。
2.将混匀的精液取1滴滴于清洁载玻片上于生物显微镜下观察并纪录精液密度、形态、
1

活力等相关数据。
3.精液的收集：在巴斯德吸管和含1.5ml培养液的试管（A管）上填好相应的姓名标签，并在其后的每一步操作之前核对姓名。吸取1.5ml精液加入试管中与培养液1:1充分混合，如液化不全可多次吹吸至混匀，500g离心10min。
4.精液的洗涤：吸弃上清，用一支新的巴斯德吸管从含2.5ml培养液的试管中（B管）吸取1.5ml液体加入含精液沉淀的管中。吹吸重悬精液沉淀，400g离心8min。
5.上游：吸弃上清，将试管B中剩余的1ml培养液吸出，沿含精液沉淀的试管A管壁缓慢加入。两管均贴好标签，将试管A倾斜45°角放于培养箱中静置30min。
6.分离优质精子：上游结束后，用巴斯德吸管将试管A中的上游液小心吸出，转入试管B中混匀，取一滴滴于一载玻片上，压片镜检。报告上游液中精子密度、活力和形态等相关数据，将分离好的精子置于培养箱中待用。
7.分离结束后关闭超净台，整理并丢弃相应污物。精液沉淀须保存至移植日，精液杯盖好后置于物品台上，待当日受精结束后丢弃。
二、轻度少弱精：密度5x106/ml至20x106/ml之间，活力a+b:<30%处理方法与正常精液处理基本一致，但注意在精液收集步骤可采用多管同时收集，并在上游时依据精液情况减少上游培养液的使用。
三、重度少弱精：密度＜5x106/ml

2

本文来源：https://www.2haoxitong.net/k/doc/04ed686558fb770bf78a55e0.html